C型肝炎におけるDNA傷害及び遺伝子修復機構の解析

• 研究課題/領域番号: 19590419
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 実験病理学
• 研究機関: (財)東京都医学研究機構
• 研究代表者: 塗谷 秀子 財団法人東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 主任研究員 (80270685)
• 研究分担者: 小原 道法 財団法人東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 参事研究員 (10250218)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2008
• 研究課題ステータス: 完了 (2008年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2008年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円); 2007年度: 2,600千円 (直接経費: 2,000千円、間接経費: 600千円)
• キーワード: 細胞 / HCV / DNA傷害 / 修復異常 / 修復関連蛋白 / 肝細胞培養系 / 局在変化

研究概要

HCVによる遺伝子傷害または遺伝子修復機能に与える影響を解析するため、DNA二本鎖切断(DSB)を導入後に相同組換え(修復)が起こるとGFPの蛍光を発生する特徴を持つヒト繊維肉腫細胞株に、レンチウイルスでHCV各蛋白を発現させ35日間培養した。この各HCV蛋白発現細胞を用いて、経日的なFACS解析によりGFPの蛍光を生じた細胞数の割合から相同組換え(修復)の異常の有無を確認した。強制的にDNA傷害を誘導する系と誘導しない系の両者で実施した。
各実験系でGFP陽性細胞の割合がEmpと差があるHCV蛋白が存在し、HCV蛋白によるDNA修復異常の可能性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Modification of hepatitis C virus 1b RNA polymerase to make a highly active JFH1-type polymerase by mutation of the thumb domain (2009)
  • 著者名/発表者名: Leiyun Weng Jiamu Du Jingling Zhou Jianping Ding Takaji Wakita Michinori Kohara Tetsuya Toyoda.
  • 雑誌名: Arch Virol. in press ページ: 0-0
  • 査読あり
• [雑誌論文] Disruption of IFN Signaling and HCV Synergistically Enhance Lymphoproliferation through Type II CD95 and Interleukins. (2009)
  • 著者名/発表者名: Keigo Machida, Kyoko Tsukiyama-Kohara, Eiji Seike, Shigenobu Tone, Yukiko Hayashi, Yuri Kasama, Masumi Shimizu, Hidemi Takahashi, Chyoji Taya, Hiromichi Yonekawa, Nobuyuki Tanaka, and Michinori Kohara.
  • 雑誌名: Gastroenterology in press ページ: 0-0
  • 査読あり
• [雑誌論文] Synthesis of nuclease- resistant siRNAs possessing universal overhangs. (2009)
  • 著者名/発表者名: Yoshihito Ueno, Yuuji Watanabe, Aya Shibata, Kayo Yoshikawa, Takashi Takano,Michinori Kohara, Yukio Kitade.
  • 雑誌名: Bioorganic & Medicinal Chemistry in press ページ: 0-0
  • 査読あり
• [雑誌論文] A mutational shift from domain III to II in the internal ribosome entry site of hepatitis C virus after interferon-ribavirin therapy. (2008)
  • 著者名/発表者名: Kei Ogata, Takahito Kashiwagi, Jun Iwahashi, Koyu Hara, Haruhito Honda, Tatsuya Ide, Ryukichi Kumashiro, Michinori Kohara, Michio Sata, and Nobuyuki Hamada.
  • 雑誌名: Arch Virol. 153(8) ページ: 1575-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inhibition of hepatitis C virus infection and expression in vitro and in vivo by recombinant adenovirus expressing short hairpin RNA. (2008)
  • 著者名/発表者名: Naoya Sakamoto, Yoko Tanabe, Takanori Yokota, Kenichi Satoh, Yuko Sekine-Osajima, Mina akagawa, Yasuhiro Itsui, Megumi Tasaka, Yuki Sakurai, Chen Cheng-Hsin, Masahiko Yano, Shogo Ohkoshi, Yutaka Aoyagi, Shinya Maekawa, Nobuyuki Enomoto, Michinori Kohara, and Mamoru Watanabe.
  • 雑誌名: J. Gastroenterology Hepatology. 23(9) ページ: 1437-47
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparative aspects on the role of polypyrimidine tract-binding protein in internal initiation of hepatitis C virus and picornavirus RNAs. (2008)
  • 著者名/発表者名: T. Nishimura, M. Saito, T. Takano, A. Nomoto, M. Kohara, K. Tsukiyama-Kohara.
  • 雑誌名: Compara. Immu. Microbio. Infect. Dises. 31 ページ: 435-448
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hepatitis C virus NS5A protein interacts with and negatively regulates the non-receptor protein-tyrosine kinase Syk. (2008)
  • 著者名/発表者名: Sachiko Inubushi, Motoko Nagano-Fujii, Kikumi Kitayama, Motofumi Tanaka, Chunying An, Hiroshi Yokozaki, Hirohei Yamamura, Hideko Nuriya, Michinori Kohara, Kiyano Sada, and Hak Hotta.
  • 雑誌名: J. Gen. Virology 89 ページ: 1231-1242
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hepatitis C virus NS5A protein interacts with and negatively regulates the non-receptor protein-tyrosine kinase Syk (2008)
  • 著者名/発表者名: Sachiko Inubushi, Motoko Nagano-Fujii, Kikumi Kitayama
  • 雑誌名: Journal of General Virology 89 ページ: 1231-1242
  • 査読あり
• [雑誌論文] Therapeutic application of RNA interference for Hepatitis C Virus. (2007)
  • 著者名/発表者名: Tsunamasa Watanabe, Takuya Umehara, Michinori Kohara.
  • 雑誌名: Advanced Drug Delivery Reviews 59 ページ: 1263-1276
• [雑誌論文] Liver target delivery of small interfering RNA to the HCV gene by lactosylated cationic liposome. (2007)
  • 著者名/発表者名: Tsunamasa Watanabe, Takuya Umehara, Fumihiko Yasui, Shin-ichiro Nakagawa, Junichi Yano, Tadaaki Ohgi, Satoru Sonoke, Kazuaki Inoue, Makoto Yoshiba and Michinori Kohara.
  • 雑誌名: J. Hepatology 47 ページ: 744-750
• [雑誌論文] Survival of liver failure pigs by transplantation of reversibly immortalized human hepatocytes with Tamoxifen-mediated self-recombination. (2007)
  • 著者名/発表者名: Totsugawa T, Yong C, Rivas-Carrillo JD, Soto-Gutierrez A, Navarro-Alvarez N, Noguchi H, Okitsu T, Westerman KA, Kohara M, Reth M, Tanaka N, Leboulch P, Kobayashi N.
  • 雑誌名: J. Hepatology 47 ページ: 74-82
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of CTL epitopes in hepatitis C virus by a genome-wide computational scanning and a rational design of peptide vaccine. (2007)
  • 著者名/発表者名: Toshie Mashiba, Keiko Udaka, Yasuko Hirachi, Yoichi Hiasa, Tomoya Miyakawa, Yoko Satta, Tsutomu Osoda, Sayo Kataoka, Michinori Kohara and Morikazu Onji.
  • 雑誌名: Immunogenetics 59 ページ: 197-209
  • 査読あり
• [雑誌論文] Evaluation of a Cyclophilin Inhibitor in Hepatitis C Virus-Infected Chimeric Mice In Vivo. (2007)
  • 著者名/発表者名: Kazuaki Inoue, Takuya Umehara, Urs T. Ruegg, Fumihiko Yasui, Tsunamasa Watanabe, Hiroshi Yasuda, Makoto Yoshiba, Jean-Maurice Dumont, Pietro Scalfaro, Michinori Kohara.
  • 雑誌名: Hepatology 45 ページ: 921-928
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inhibition of Hsp90 suppresses HCV replication in replicon cell lines and in chimeric mice with humanized liver. (2007)
  • 著者名/発表者名: Shin-ichiro Nakagawa, Takuya Umehara, Chiho Matsuda, Shusuke Kuge, Masayuki Sudoh and Michinori Kohara.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 353 ページ: 882-888
  • 査読あり
• [学会発表] Serine palmitoyltransferase inhibitor suppresses HCV replication in a mouse model. (2008)
  • 著者名/発表者名: Hirata Y., Umehara T., Sudoh M., Kohara M.
  • 学会等名: XIV International Congress of Virology
  • 発表場所: Istanbul
• [学会発表] Serine Palmitoyltransferase Inhibitor Suppresses HCV Replication in a Mouse Model. (2008)
  • 著者名/発表者名: Hirata Y. Umehara T., Sudoh M., Yasui F., Kohara M.
  • 学会等名: 21th International Conference on Antiviral Research
  • 発表場所: Montreal
• [学会発表] Characterization of HCV Replication regulatory by DHCR24. (2007)
  • 著者名/発表者名: Takano T., Hayashi M., Umehara T., Hirata Y., Tsukiyama-Kohara K., Kohara M.
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] The novel regulatory pathway of TOM70 concerning with cell death. (2007)
  • 著者名/発表者名: Takano T., Kohara M., Kai C., Tsukiyama-Kohara K.
  • 学会等名: 第66回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜
• [備考]
  • URL: http://www.rinshoken.or.jp/
• [備考]
  • URL: http://www.rinshoken.or.jp/