難治性呼吸器疾患に対してRNA干渉の治療応用を試みる基礎的研究

• 研究課題/領域番号: 19590896
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 呼吸器内科学
• 研究機関: 広島大学
• 研究代表者: 服部 登 広島大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 准教授 (00283169)
• 研究分担者: 横山 彰仁 高知大学, 医学部, 教授 (30191513) ; 石川 暢久 広島大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教 (90423368)
• 連携研究者: 横山 彰仁 高知大学, 医学部, 教授 (30191513) ; 石川 暢久 広島大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教 (90423368)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2009
• 研究課題ステータス: 完了 (2009年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2009年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2008年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2007年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: RNA干渉 / 肺線維症 / 肺癌 / 気管支喘息 / GFP

研究概要

本研究の目的は,難治性呼吸器疾患の治療の一手段に,small interfering RNA(siRNA)を応用できるかどうかを検証することであった.難治性呼吸器疾患として,肺線維症,リモデリングを伴う気管支喘息,肺癌の3つを想定し,それぞれの疾患の動物モデルに必要なGreen fluorescence protein(GFP)を恒常的に発現しているGFPトランスジェニックマウスを繁殖・維持と,GFPを恒常的に過剰発現するLewis lung carcinoma(LLC)細胞(GFP-LLC細胞)の作製に成功した.実際にキーエンス社製のBiozero蛍光顕微鏡を用いて,GFPトランスジェニックマウスの肺組織及びGFP-LLC細胞による腫瘍組織の蛍光を極めて鮮明に映し出すことが可能であった.そこで,GFPに対するsiRNA(GFP-siRNA)を合成し,GFPトランスジェニックマウス及びGFP-LLC細胞による肺腫瘍を保持するマウスに対して,GFP-siRNAを経気道投与し,Biozero蛍光顕微鏡にて観察したが,残念ながら蛍光の抑制は認められなかった.siRNAの使用量が少なすぎた可能性があり,今後の検討課題となった.

研究成果

• [雑誌論文] Perceived stress, severity of asthma, and quality of life in young adults with asthma. (2009)
  • 著者名/発表者名: K imura T, Yokoyama A, Kohno N, Nakamura H, Eboshida A
  • 雑誌名: Allergol Int 58 ページ: 71-79
  • NAID: 10025109114
  • 査読あり
• [雑誌論文] IL-12p40 is essential for the down-regulation of airway hyperresponsiveness in a mouse model of bronchial asthma with prolonged antigen exposure. (2009)
  • 著者名/発表者名: O nari Y, Yokoyama A, Haruta Y, Nakashima T, Iwamoto H, Hattori N, Kohno N
  • 雑誌名: Clin Exp Allergy 39 ページ: 290-298
  • 査読あり
• [雑誌論文] Airflow limitation in smokers is associated with subclinical atherosclerosis (2009)
  • 著者名/発表者名: I wamoto H, Yokoyama A, Kitahara Y, Ishikawa N, Haruta Y, Yamane K, Hattori N, Hara H, Kohno N
  • 雑誌名: Am J Respir Crit Care Med 179 ページ: 35-40
  • 査読あり
• [雑誌論文] Suplatast tosilate prevents bleomycin-induced pulmonary fibrosis in mice. (2009)
  • 著者名/発表者名: F uronaka M, Hattori N, Tanimoto T, Senoo T, Ishikawa N, Fujitaka K, Haruta Y, Yokoyama A, Kohno N
  • 雑誌名: J Pharmacol Exp Ther 328 ページ: 55-61
  • 査読あり
• [雑誌論文] Genetic ablation of Bach1 gene reduces hyperoxic lung injury in mice : role of IL-6 (2009)
  • 著者名/発表者名: Tanimoto T, et al.
  • 雑誌名: Free Radic Biol Med 179 ページ: 1119-1126
  • 査読あり
• [雑誌論文] Metastatic breast cancer presenting as air-space consolidation on chest computed tomography (2009)
  • 著者名/発表者名: Ohnishi H, et al.
  • 雑誌名: Intern Med 48 ページ: 727-731
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lymphocyte transformation test is not helpful for the diagnosis of methotrexate-induced pneumonitis in patients with rheumatoid arthritis (2009)
  • 著者名/発表者名: Hirata S, et al.
  • 雑誌名: Clin Chim Acta 407 ページ: 25-29
  • 査読あり
• [雑誌論文] Suppressor of cytokine signaling 1 inhibits pulmonary inflammation and fibrosis (2008)
  • 著者名/発表者名: N akashima T, Yokoyama A, Onari Y, Shoda H, Haruta Y, Hattori N, Naka T, Kohno N
  • 雑誌名: J Allergy Clin Immunol 121 ページ: 1269-1276
  • 査読あり
• [雑誌論文] Anti-inflammatory effects and clinical efficacy of theophylline and tulobuterol in mild-to-moderate chronic obstructive pulmonary disease. (2008)
  • 著者名/発表者名: K anehara M, Yokoyama A, Tomoda Y, Shiota N, Iwamoto H, Ishikawa N, Taooka Y, Haruta Y, Hattori N, Kohno N
  • 雑誌名: Pulm Pharmacol Ther 21 ページ: 874-874
  • 査読あり
• [雑誌論文] Usefulness of monitoring the circulating Krebs von den Lungen-6 levels to predict the clinical outcome of patients with advanced nonsmall cell lung cancer treated with epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors. (2008)
  • 著者名/発表者名: Ishikawa N, Hattori N, Yokoyama A, Tanaka S, Nishino R, Yoshioka K, Ohshimo S, Fujitaka K, Ohnishi H, Hamada H, Arihiro K, Kohno N.
  • 雑誌名: Int J Cancer 122 ページ: 2612-2620
  • 査読あり
• [雑誌論文] Circulating KL-6/MUC1 as an independent predictor for disseminated intravascular coagulation in acute respiratory distress syndrome. (2008)
  • 著者名/発表者名: N akashima T, Yokoyama A, Ohnishi H, Hamada H, Ishikawa N, Haruta Y, Hattori N, Tanigawa K, Kohno N
  • 雑誌名: J Intern Med 263 ページ: 432-439
  • 査読あり
• [雑誌論文] Suppressor of cytokine signaling 1 inhibits pulmonary inflammation and fibrosis. (2008)
  • 著者名/発表者名: Nakashima T.
  • 雑誌名: Journal of allergy and clinical immunology 121 ページ: 1269-1276
  • 査読あり
• [雑誌論文] Usefulness of monitoring the circulating Krebs von den Lungen-6 levels to predict the clinical outcome of patients with advanced nonsmall cell lung cancer treated with epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors. (2008)
  • 著者名/発表者名: Ishikawa N.
  • 雑誌名: International journal of cancer 122 ページ: 2612-2620
  • 査読あり
• [雑誌論文] Tiotropium bromide is effective for severe asthma with noneosinophilic phenotype. (2008)
  • 雑誌名: European respiratory journal 31 ページ: 1379-1380
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cancer-testis antigen lymphocyte antigen 6 complex locus K is a serologic biomarker and a therapeutic target for lung and esophageal carcinomas. (2007)
  • 著者名/発表者名: Ishikawa N, Takano A, Yasui W, Inai K, Nishimura H, Ito H, Miyagi Y, Nakayama H, Fujita M, Hosokawa M, Tsuchiya E, Kohno N, Nakamura Y, Daigo Y.
  • 雑誌名: Cancer Res 1567 ページ: 11601-11611
  • 査読あり
• [雑誌論文] Activation of KIF4A as a prognostic biomarker and therapeutic target for lung cancer. (2007)
  • 著者名/発表者名: T aniwaki M, Takano A, Ishikawa N, Yasui W, Inai K, Nishimura H, Tsuchiya E, Kohno N, Nakamura Y, Daigo Y
  • 雑誌名: Clin Cancer Res 13 ページ: 6624-6631
  • 査読あり
• [雑誌論文] Differential expression of the glycosylated forms of MUC1 during lung development. (2007)
  • 著者名/発表者名: S akurai J, Hattori N, Nakajima M, Moriya T, Suzuki T, Yokoyama A, Kohno N
  • 雑誌名: Eur J Histochem 51 ページ: 95-102
  • 査読あり
• [雑誌論文] Adenoviral transduction of MRP-1/CD9 and KAI1/CD82 inhibits lymph node metastasis in orthotopic lung cancer model. (2007)
  • 著者名/発表者名: T akeda T, Hattori N, Tokuhara T, Nishimura Y, Yokoyama M, Miyake M
  • 雑誌名: Cancer Res 67 ページ: 1744-1749
  • 査読あり
• [雑誌論文] Circulating KL-6/MUC1 mucin carrying sialyl Lewisa oligosaccharide is an independent prognostic factor in patients with lung adenocarcinoma. (2007)
  • 著者名/発表者名: Inata J.
  • 雑誌名: Int J Cancer 120 ページ: 2643-2649
  • 査読あり
• [雑誌論文] Differential expression of the glycosylated forms of MUC1 during lung development. (2007)
  • 著者名/発表者名: Sakurai J.
  • 雑誌名: Eur J Histochem 51 ページ: 95-102
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cancer-testis antigen lymphocyte antigen 6 complex locus K is a serologic biomarker and a therapeutic target for lung and esophageal carcinomas. (2007)
  • 著者名/発表者名: Ishikawa N.
  • 雑誌名: Cancer Res 67 ページ: 11601-11611
  • 査読あり