アデノ随伴ウイルスベクターの組織特異性と血友病遺伝子治療における有用性の検討

• 研究課題/領域番号: 19591134
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 血液内科学
• 研究機関: 自治医科大学
• 研究代表者: 水上 浩明 自治医科大学, 医学部, 講師 (20311938)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2008
• 研究課題ステータス: 完了 (2008年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2008年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円); 2007年度: 2,470千円 (直接経費: 1,900千円、間接経費: 570千円)
• キーワード: 遺伝子治療 / AAV ベクター / 組織特異性 / 免疫応答 / トランスジェニックマウス / 中和抗体 / AAVベクター / トランスジェニックスマウス

研究概要

様々な血清型に由来するAAV ベクターの組織特異性に関する検討を行った結果、骨格筋に対しては1型のベクターにCMV プロモーターを用いた場合が、肝臓には8型のベクターにhAAT プロモーターを用いるのが最も有効との結論を得た。また、in vivo のベクター投与において問題となる中和抗体検出系に関して検出方法・反応方法などの関連条件を検討することで、検出感度を著明に改善させることができた。

研究成果

• [雑誌論文] Systemic delivery of IL-10 by an AAV vector prevents vascular remodeling and end-organ damage in stroke-prone spontaneously hypertensive rat. (2009)
  • 著者名/発表者名: Nomoto, T., Okada, T., Shimazaki, K., Yoshioka, T., Nonaka-Sarukawa, M., Ito, T., Takeuchi, K., Katsura, K., Mizukami, H., Kume, A., Ookawara, S., Ikeda, U., Katayama, Y., Ozawa, K.
  • 雑誌名: Gene Ther 16 ページ: 383-91
  • 査読あり
• [雑誌論文] Systemic delivery of IL-10 by an AAV vector prevents vascular remodeling and end-organ damage in stroke-prone spontaneously hypertensive rat. (2009)
  • 著者名/発表者名: Nomoto T
  • 雑誌名: Gene Therapy 16 ページ: 383-391
  • 査読あり
• [雑誌論文] Overexpression of PTEN in ovarian cancer cells suppresses i.p. dissemination and extends survival in mice. (2008)
  • 著者名/発表者名: Takei, Y., Saga, Y., Mizukami, H., Takayama, T., Ohwada, M., Ozawa, K., Suzuki, M.
  • 雑誌名: Mol Cancer Ther 7 ページ: 704-11
  • 査読あり
• [雑誌論文] Adeno-associated virus vector-mediated systemic interleukin-10 expression ameliorates hypertensive organ damage in Dahl salt-sensitive rats. (2008)
  • 著者名/発表者名: Nonaka-Sarukawa, M., Okada, T., Ito, T., Yamamoto, K., Yoshioka, T., Nomoto, T., Hojo, Y., Shimpo, M., Urabe, M., Mizukami, H., Kume, A., Ikeda, U., Shimada, K., Ozawa, K.
  • 雑誌名: J Gene Med 10 ページ: 368-74
  • 査読あり
• [雑誌論文] Adeno-associated virus vector-mediated production of hepatocyte growth factor attenuates liver fibrosis in mice. (2008)
  • 著者名/発表者名: Suzumura, K., Hirano, T., Son, G., Iimuro, Y., Mizukami, H., Ozawa, K., Fujimoto, J.
  • 雑誌名: Hepatol Int 2 ページ: 80-88
  • 査読あり
• [雑誌論文] Protection Against Aminoglycoside-induced Ototoxicity by Regulated AAV Vector-mediated GDNF Gene Transfer Into the Cochlea. (2008)
  • 著者名/発表者名: Liu, Y., Okada, T., Shimazaki, K., Sheykholeslami, K., Nomoto, T., Muramatsu, SI., Mizukami, H., Kume, A., Xiao, S., Ichimura, K., Ozawa, K.
  • 雑誌名: Mol Ther 16 ページ: 474-80
  • 査読あり
• [雑誌論文] Overexpression of PTEN in ovarian cancer cells suppresses i. p. dissemination and extends survival in mice. (2008)
  • 著者名/発表者名: Takei Y
  • 雑誌名: Molecular Cancer Therapy 7 ページ: 704-11
  • 査読あり
• [雑誌論文] Adeno-associated virus vector-mediated production of hepatocyte growth factor attenuates liver fibrosis in mice. (2008)
  • 著者名/発表者名: Suzumura K
  • 雑誌名: Hepatology International 2 ページ: 80-88
  • 査読あり
• [雑誌論文] Overexpression of PTEN in ovarian cancer cells suppresses i.p. dissemination and extends survival in mice (2008)
  • 著者名/発表者名: Takei Y, et. al.
  • 雑誌名: Mol Cancer Ther 7 ページ: 704-11
  • 査読あり
• [雑誌論文] Interleukin-10 expression mediated by an adeno-associated virus vector prevents monocrotaline-induced pulmonary arterial hypertension in rats. (2007)
  • 著者名/発表者名: Ito, T., Okada, T., Miyashita, H., Nomoto, T., Nonaka-Sarukawa, M., Uchibori, R., Maeda, Y., Urabe, M., Mizukami, H., Kume, A., Takahashi, M., Ikeda, U., Shimada, K., Ozawa, K.
  • 雑誌名: Circ Res 101 ページ: 734-41
  • 査読あり
• [雑誌論文] Adenoassociated virus-mediated prostacyclin synthase expression prevents pulmonary arterial hypertension in rats. (2007)
  • 著者名/発表者名: Ito, T., Okada, T., Mimuro, J., Miyashita, H., Uchibori, R., Urabe, M., Mizukami, H., Kume, A., Takahashi, M., Ikeda, U., Sakata, Y., Shimada, K., Ozawa, K.
  • 雑誌名: Hypertension 50 ページ: 531-6
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prevention of diabetic retinopathy by intraocular soluble flt-1 gene transfer in a spontaneously diabetic rat model. (2007)
  • 著者名/発表者名: Ideno, J., Mizukami, H., Kakehashi, A., Saito, Y., Okada, T., Urabe, M., Kume, A., Kuroki, M., Kawakami, M., Ishibashi, S., and Ozawa, K.
  • 雑誌名: Int J Mol Med 19 ページ: 75-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Suppression of ovarian cancer by muscle-mediated expression of soluble VEGFR-1/Flt-1 using adeno-associated virus serotype 1-derived vector. (2007)
  • 著者名/発表者名: Takei, Y., Mizukami, H., Saga, Y., Yoshimura, I., Hasumi, Y., Takayama, T., Kohno, T., Matsushita, T., Okada, T., Kume, A., Suzuki, M., Ozawa, K.
  • 雑誌名: Int J Cancer 120 ページ: 27-84
  • 査読あり
• [雑誌論文] Tendon healing in vitro: Adeno-associated virus-2 effectively transduces intrasynovial tenocytes with persistent expression of the transgene, but other serotypes do not. (2007)
  • 著者名/発表者名: Wang, X.T., Liu, P.Y., Tang, J.B., Mizukami, H., Xin, KQ., Ozawa, K., Ushijima, H.
  • 雑誌名: Plast Reconstr Surg 119 ページ: 227-34
  • 査読あり
• [雑誌論文] Interleukin-10 expression mediated by an adeno-associated virus vector prevents monocrotaline-induced pulmonary arterial hypertension in rats. (2007)
  • 著者名/発表者名: Ito T, et. al.
  • 雑誌名: Circulation Research 101 ページ: 734-41
  • 査読あり
• [雑誌論文] Adenoassociated virus-mediated prostacyclin synthase expression prevents pulmonary arterial hypertension in rats 50:,2007. (2007)
  • 著者名/発表者名: Ito T, et. al.
  • 雑誌名: Hypertension 50 ページ: 531-6
  • 査読あり
• [学会発表] 遺伝子治療の現状と課題 (2008)
  • 著者名/発表者名: 水上浩明、小澤敬也
  • 学会等名: 第28 回 医療情報学連合大会
  • 発表場所: オーガナイズドセッション「ゲノムインフォマティクス」横浜
  • 年月日: 2008-11-23
• [学会発表] Therapeutic efficacy of AAV vectors encoding sflt-4 against endometrial cancer model with lymph node metastasis. (2008)
  • 著者名/発表者名: Takahashi K, Mizukami H, Saga Y, Takei Y, Urabe M, Kume A, Suzuki M, Ozawa K
  • 学会等名: The 67^<th> annual meeting of the Japanese Cancer Association(EW11-2, Abstract p495)
  • 発表場所: Nagoya
  • 年月日: 2008-10-28
• [学会発表] Role of inflammatory cytokines in tumor tropism of mesenchimal stromal cells. (2008)
  • 著者名/発表者名: Uchibori R, Ito T, Mizuguchi H, Urabe M, Mizukami H, Kume A, Ozawa K
  • 学会等名: The 67^<th> annual meeting of the Japanese Cancer Association(O-369, Abstract p300)
  • 発表場所: Nagoya
  • 年月日: 2008-10-27
• [学会発表] Inhibitory actions of very low titer neutralizing antibody against AAV8 capsid upon transgene expression in monkey. (2008)
  • 著者名/発表者名: Mizukami H, Urabe M, Kume A, Ozawa K
  • 学会等名: The 67^<th> annual meeting of the Japanese Cancer Association(O-162, Abstract p91)
  • 発表場所: Nagoya
  • 年月日: 2008-10-26
• [学会発表] AAV に対する中和抗体の遺伝子導入に及ぼす影響・カニクイザルにおける検討 (2008)
  • 著者名/発表者名: 水上浩明、八木洋也、卜部匡司、久米晃啓、小澤敬也
  • 学会等名: 第56 回日本ウイルス学会学術集会(抄録集p229)
  • 発表場所: 岡山
  • 年月日: 2008-10-26
• [学会発表] AAVベクターを用いた遺伝子導入法と免疫反応-血友病Bに関する検討を中心に (2008)
  • 著者名/発表者名: 水上浩明
  • 学会等名: 第70回日本血液学会総会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2008-10-10
• [学会発表] Inhibitory actions of very low titer neutralizing antibody against AAV8 capsid upon liver-mediated factor IX expression in non-human primates (2008)
  • 著者名/発表者名: Mizukami H, Mimuro J, Ishiwata A, Ono F, Yagi H, Urabe M, Ito T, Kume A, Terao K, Yasutomi Y, Sakata Y, Ozawa K.
  • 学会等名: The 14^<th> Annual Meeting of Japan Society of Gene Therapy(Abstract #65)
  • 発表場所: Sapporo
  • 年月日: 2008-06-14
• [学会発表] Full reconstitution of in vivo oxidative activity for phenylalanine in self-complementary AAV vector-treated phenylketonuria mice. (2008)
  • 著者名/発表者名: Kume A, Yagi H, Mizukami H, Urabe M, Ito T, Ozawa, K.
  • 学会等名: The 14^<th> Annual Meeting of Japan Society of Gene Therapy(Abstract #70)
  • 発表場所: Sapporo
  • 年月日: 2008-06-14
• [学会発表] Establishment of a lymph node metastasis model with endometrial cancer and therapeutic efficacy of AAV vectors encoding sflt-4. (2008)
  • 著者名/発表者名: Takahashi, T., Mizukami, H., Saga, Y., Takei, Y., Urabe, M., Kume, A., Suzuki, M., Ozawa, K.
  • 学会等名: The 14^<th> Annual Meeting of Japan Society of Gene Therapy(Abstract #74)
  • 発表場所: Sapporo
  • 年月日: 2008-06-14
• [学会発表] Immune responses in gene herapy using adeno-associated vectors (2008)
  • 著者名/発表者名: Mizukami, H.
  • 学会等名: Educational seminar IV "AAV vectors" The 14^<th> Annual Meeting of Japan Society of Gene Therapy
  • 発表場所: Sapporo
  • 年月日: 2008-06-13
• [学会発表] Unexpected silencing of transgene integrated at AAVS1 locus using AAV machinary. (2008)
  • 著者名/発表者名: Obara Y, Urabe M, Ito T, Mizukami H, Kume A, Ozawa K.
  • 学会等名: The 14^<th> Annual Meeting of Japan Society of Gene Therapy(Abstract #11)
  • 発表場所: Sapporo
  • 年月日: 2008-06-13
• [学会発表] AAV vector-mediated systemic interleukin-10 expression ameliorates the metabolic syndrome in Zucker fatty rats. (2008)
  • 著者名/発表者名: Ito T, Nakata M, Uchibori R, Urabe M, Mizukami H, Kume A, Yada T, Shimada K, Ozawa K.
  • 学会等名: The 14^<th> Annual Meeting of Japan Society of Gene Therapy(Abstract #32)
  • 発表場所: Sapporo
  • 年月日: 2008-06-13
• [学会発表] “Immune responses in gene therapy using adeno-associated vectors"Educational seminar IV, “AAV vectors". (2008)
  • 著者名/発表者名: Mizukami H
  • 学会等名: The 14^<th> Annual Meeting of Japan Society of Gene Therapy
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2008-06-13
• [学会発表] Aromatic L-amino acid decarboxylase gene transfer for parkinson's disease: preliminary results of an open-label safety study. (2008)
  • 著者名/発表者名: Muramatsu S, Fujimoto K, Kato S, Mizukami H, Ikeguchi K, Kawakami T, Urabe M, Kume A, Sato T, Watanabe E, Ozawa K, Nakano I.
  • 学会等名: The 14^<th> Annual Meeting of Japan Society of Gene Therapy(Abstract #4)
  • 発表場所: Sapporo
  • 年月日: 2008-06-12
• [学会発表] Liver-mediated factor IX expression and neutralizing antibody in non-human primates. (2008)
  • 著者名/発表者名: Mizukami H
  • 学会等名: The 11^<th> Annual Meeting of American Society of Gene Therapy
  • 発表場所: Boston, USA
  • 年月日: 2008-05-29
• [学会発表] 「AAV ベクターを用いた遺伝子治療の現状と展望」自治医科大学21 世紀COE プログラム (2008)
  • 著者名/発表者名: 水上浩明、小澤敬也
  • 学会等名: 第5回合同シンポジウム
  • 発表場所: 自治医科大学
  • 年月日: 2008-02-02
• [学会発表] 間葉系幹細胞と造血幹細胞の相互作用の分子メカニズム (2008)
  • 著者名/発表者名: 菊池裕二、久米晃啓、卜部匡司、水上浩明、鈴木隆浩、尾崎勝俊、小澤敬也
  • 学会等名: 第6回幹細胞シンポジウム
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] カニクイザルを用いたAAV ベクターの有効性評価 (2007)
  • 著者名/発表者名: 水上浩明
  • 学会等名: 第3回霊長類医科学フォーラム
  • 発表場所: つくば
  • 年月日: 2007-12-06
• [学会発表] Low seropositivity against AAV serotypes 1,8 and 9 in specific pathogen-free cynomolgus monkey colony (2007)
  • 著者名/発表者名: Mizukami H, et. al.
  • 学会等名: European Society for Gene and Cell Therapy
  • 発表場所: Rotterdam,Netherland
  • 年月日: 2007-10-29
• [学会発表] "AAV-mediated gene transfer: current status and future perspectives" The department of Microbiology (2007)
  • 著者名/発表者名: Mizukami, H.
  • 学会等名: Molecular Genetics and Immunology Seminar Series
  • 発表場所: The University of Kansas Medical Center, Kansas City (USA)
  • 年月日: 2007-05-29
• [学会発表] 肝臓特異的にFVIII を高発現するAAV8 ベクターを用いた血友病A マウスへのFVIII 遺伝子導入 (2007)
  • 著者名/発表者名: 石渡彰、三室淳、柏倉裕志、大森司、諏合輝子、窓岩清治、水上浩明、久米晃啓、小澤敬也、坂田洋一
  • 学会等名: 第30 回日本血栓止血学会総会(抄録集p462)
  • 発表場所: 志摩
• [学会発表] 血友病B 遺伝子治療の非ヒト霊長類モデルにおける基礎的検討 (2007)
  • 著者名/発表者名: 石渡彰、三室淳、水上浩明、小野文子、柏倉裕志、大森司、諏合輝子、窓岩清治、寺尾恵治、小澤敬也、坂田洋一
  • 学会等名: 第69 回日本血液学会総会・第49 回日本臨床血液学会合同総会(抄録集p190)
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] Sustained expression of prostacyclin synthase by an intramuscular injection of an AAV vector attenuates obesity in Zucker fatty rats. (2007)
  • 著者名/発表者名: Ito, T., Okada, T., Mimuro, J., Nakata, M., Uchibori, R., Urabe, M., Mizukami, H., Kume, A., Sakata, Y., Yada, T., Shimada, K., Ozawa, K.
  • 学会等名: The 13th Annual Meeting of Japan Society of Gene Therapy(Abstract #092)
  • 発表場所: Nagoya
• [学会発表] Efficient and stable liver transduction by a self-complementary adeno-associated virus vector for phenylketonuria gene therapy. (2007)
  • 著者名/発表者名: Kume, A., Matsushita, T., Mizukami, H., Urabe, M., Okada T., Ozawa, K.
  • 学会等名: The 13th Annual Meeting of Japan Society of Gene Therapy(J Gene Med 10:443-444, 2008)
  • 発表場所: Nagoya
• [学会発表] Prevalence of neutralizing antibody against AAV serotypes 1, 8 and 9 in cynomolgus monkey colonies. (2007)
  • 著者名/発表者名: Mizukami, H., Ishiwata, A., Ono, F., Takano, J., Fujimoto, K., Mimuro, J., Urabe, M., Kume, A., Terao, K., Sakata, Y., Ozawa, K.
  • 学会等名: The 13th Annual Meeting of Japan Society of Gene Therapy(J Gene Med 10:453, 2008)
  • 発表場所: Nagoya
• [学会発表] Safety of intracranial AAV vector injection in cynomolgus monkeys. (2007)
  • 著者名/発表者名: Mizukami, H., Muramatsu, S., Ono, F., Mimuro, J., Sakata, Y., Urabe, M., Kume, A., Tera,o K., Nakano, I., Ozawa, K.
  • 学会等名: The 13th Annual Meeting of Japan Society of Gene Therapy(J Gene Med 10:454, 2008)
  • 発表場所: Nagoya
• [学会発表] Overexpression of PTEN in ovarian cancer cells suppresses peritoneal dissemination and extends survival in mice. (2007)
  • 著者名/発表者名: Takei, Y., Saga, Y., Mizukami, H., Ozawa, K., Suzuki, M.
  • 学会等名: The 66th Annual Meeting of the Japanese Cancer Association2007.(Proceedings of the 66th Annual Meeting of the Japanese Cancer Association, p245)
  • 発表場所: Yokohama
• [学会発表] Tumor tracking and therapeutic gene amplification by using retroviral vector-producing Mesenchymal stem cells for reinforcement of suicide cancer gene therapy. (2007)
  • 著者名/発表者名: Uchibori, R., Okada, T., Ito, T., Matsushita, T., Urabe, M., Mizukami, H., Kume, A., Ozawa, K.
  • 学会等名: The 13th Annual Meeting of Japan Society of Gene Therapy(J Gene Med 10:478-479, 2008)
  • 発表場所: Nagoya
• [学会発表] Production of more potent type 1 adeno-associated virus vectors in insect cells. (2007)
  • 著者名/発表者名: Urabe, M., Mizukami, H., Bakker, A., Kume, A., Hermens, W., Ozawa, K.
  • 学会等名: The 13th Annual Meeting of Japan Society of Gene Therapy(Abstract #010)
  • 発表場所: Nagoya
• [図書] 『糖尿病学-基礎と臨床』 (2007)
  • 著者名/発表者名: 水上 浩明(分担執筆)
  • 総ページ数: 1200
  • 出版者: 西村書店