ヒト細胞におけるsiRNAを介したRNAiの超誘導とその分子シグナルに関する研究

• 研究課題/領域番号: 19592169
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 病態科学系歯学・歯科放射線学
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 大和 建嗣 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 講師 (50174751)
• 研究分担者: 西原 達治 九州歯科大学, 歯学部, 教授 ; 西原 達次 九州歯科大学, 歯学部, 教授 (80192251)
• 連携研究者: 西原 達治 九州歯科大学, 歯学部, 教授
• 研究期間 (年度): 2007 – 2008
• 研究課題ステータス: 完了 (2008年度)
• 配分額: 4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円); 2008年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2007年度: 2,730千円 (直接経費: 2,100千円、間接経費: 630千円)
• キーワード: 実験腫瘍学 / RNAi / siRNA / RNA干渉 / ルシフェラーゼ

研究概要

siRNA創薬のためには, 標的遺伝子に対して高いRNAi活性と特異性を有する配列を選択し, これらsiRNAを標的細胞へ効率よく導入しなければならない。現在バイオインフォマティクスを駆使したコンピュータ解析によって理論的に優れたsiRNAの設計が可能となっているが, その効果は実際に生きた細胞を用いて検証しなければならない。本研究ではこの目的のために様々な培養細胞からなるシステムを構築した。

研究成果

• [雑誌論文] Functional dissection of siRNA sequence by systematic DNA substitution : short interfering DNA-RNA chimera with a DNA seed arm is a powerful tool for mammalian gene silencing with virtually no off-target effect. (2009)
  • 著者名/発表者名: Ui-Tei, K., Naito, Y., Zenno, S., Nishi, K., Yamato. K., Takahashi, F., Juni, A., Saigo, K.
  • 雑誌名: Nucleic Acids Res. 36 ページ: 2152-2162
  • 査読あり
• [雑誌論文] New highly potent and specific E6 and E7 siRNAs for treatment of HPV16-positive cervical cancer (2008)
  • 著者名/発表者名: Yamato, K., Yamada, T., Kizaki, M., Ui-Tei, K., Natori, Y., Fujino, M., Nishihara, T., Ikeda, Y., Nasu, Y., Saigo, K., Yoshinouchi, M
  • 雑誌名: Cancer Gene Ther 15 ページ: 140-153
  • 査読あり
• [雑誌論文] Functional dissection of siRNA sequence by systematic DNA substitution : short interfering DNA-RNA chimera with a DNA seed arm is a powerful tool for mammalian gene silencing with virtually no off-target effect. (2008)
  • 著者名/発表者名: Ui-Tei, K., Naito, Y., Zenno, S., Nishi, K., Yamato, K., Takahashi, F., Juni, A., Saigo, K
  • 雑誌名: Nucleic Acids Res. 36 ページ: 2152-2162
  • 査読あり
• [雑誌論文] New highly potent and specific E6 and E7 siRNAs for treatment of HPV16-positive cervical cancer. (2008)
  • 著者名/発表者名: Yamato, K., et. al.
  • 雑誌名: Cancer Gene Ther. 15 ページ: 140-153
  • 査読あり
• [雑誌論文] Functional dissection of siRNA sequence by systematic DNA substitution: short interfering DNA-RNA chimera with a DNA seed arm is a powerful tool for mammalian gene silencing with virtually no off-target effect. (2008)
  • 著者名/発表者名: Ui-Tei, K., et. al.
  • 雑誌名: Nucleic Acids Res. (Electronic publication a head of print)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Myeloperoxidase (MPO) is a key regulator of oxidative stress-mediated apoptosis in myeloid leukemic cells (2007)
  • 著者名/発表者名: Nakazato, T., Sagawa, M., Yamato, K., Xian, M., Yamamoto, T., Suematsu, M, Ikeda, Y., Kizaki, M.
  • 雑誌名: Clin.Cancer Res 13 ページ: 5436-5445
  • 査読あり
• [雑誌論文] Myeloperoxidase (MPO) is a key regulator of oxidative stress-mediated apoptosis in myeloid leukemic cells. (2007)
  • 著者名/発表者名: Nakazato, T., et. al.
  • 雑誌名: Clin. Cancer Res. 13 ページ: 5436-5445
  • 査読あり
• [学会発表] 2本鎖RNA-DNAキメラによるHPV16 E6E7特異的RNAiの誘導Induction of HPV16 E6E7-specific RNAi in cervical cancer cells by double strand RNA-DNA chimeras (2008)
  • 著者名/発表者名: 大和建嗣, 吉野内光夫, 山田健人
  • 学会等名: 第67回日本癌学会総会
  • 発表場所: 名古屋
• [学会発表] 部分的DNA置換によるsiRNA配列の機能解析 : シード領域をDNA に置換したsiRNAはoff-target効果がないDNA-modified siRNA is responsible for significantly reduced off-target effet (2008)
  • 著者名/発表者名: 程久美子, 内藤雄樹, 善野修平, 西賢二, 大和建嗣, 従二綾, 田中愛, 西郷薫
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会(BMB2008)
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] 2本鎖RNA-DNAキメラによるHPV16 E6E7特異的RNAiの誘導 (2008)
  • 著者名/発表者名: 大和建嗣, 吉野内光夫, 山田健人
  • 学会等名: 第6 7回日本癌学会総会
  • 発表場所: 名古屋
• [学会発表] 部分的DNA置換によるsiRNA配列の機能解析 : シード領域をDNAに置換したsiRNAはoff-target効果がない (2008)
  • 著者名/発表者名: 程久美子, 内藤雄樹, 善野修平, 西賢二, 大和建嗣, 従二綾, 田中愛, 西郷薫
  • 学会等名: 第3 1回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] Potent and specific E6 and E7 siRNAs for treatment of HPV16-positive cervical cancer (2007)
  • 著者名/発表者名: 大和建嗣, 吉野内光夫, 山田健人
  • 学会等名: 第66回日本癌学会総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
• [学会発表] Potent and Specific E6 and E7 siRNAs for treatment of HPV16-positive cervical cancer (2007)
  • 著者名/発表者名: Yamato, K., et. al.
  • 学会等名: 第66回日本癌学会総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
• [産業財産権] ヒトパピローマ16型遺伝子を標的とする二本鎖核酸分子およびそれを含む医薬 (2008)
  • 発明者名: 大和建嗣, 名取幸和, 山田健人, 吉野内光夫
  • 権利者名: 大和建嗣, 名取幸和, 山田健人, 吉野内光夫
  • 出願年月日: 2008-04-30
  • 外国
• [産業財産権] ヒトパピローマ1 6型遺伝子を標的とする二本鎖核酸分子およびそれを含む医薬 (2008)
  • 発明者名: 大和建嗣, 名取幸和, 山田健人, 吉野内光夫
  • 権利者名: 東京医科左同
  • 出願年月日: 2008-04-30
  • 外国