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リバース・ジェネティクスを用いたブニヤウイルスのゲノム改変手法の確立

研究課題

研究課題/領域番号 19658112
研究種目

萌芽研究

配分区分補助金
研究分野 応用獣医学
研究機関東京大学

研究代表者

明石 博臣  東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (10334327)

研究期間 (年度) 2007 – 2008
研究課題ステータス 完了 (2008年度)
配分額 *注記
3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
2008年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
2007年度: 1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
キーワードアカバネウイルス / 胎子感染 / ブユヤウイルス / リバース・ジェネティクス / 異変株 / ブニヤウイルス
研究概要

ブニヤウイルス科、オルトブニヤウイルス属のアカバネウイルス(AKAV)を用いて、ブニヤウイルスのリバース・ジェネティクスに関する手法の確立を目指した。平成20年度は、他のマイナス鎖RNAウイルスで用いられているT7-RNA polymerase転写系を試みた。この結果、効率良く感染性ウイルスが回収出来た。AKAV野外分離株には、妊娠時胎子にのみ病変を形成する株(OBE-1株)と生後感染の結果脳炎を引き起こす株(Iriki株)の存在が知られている。このため、昨年作製したOBE-1株 cDNAと同様の手法を用い、Iriki株3分節cDNAを作製し、T7 RNA polymerase転写系を用いたリバース・ジェネティクスによるウイルス回収を試みた。OBF-1株と同様、Iriki株でも効率良く感染性ウイルスが回収出来た。両株の各分節cDNAを組み合わせることで、分節キメラウイルスである遺伝子再集合ウイルスを作出することに成功した。AKAVは3本のRNA分節よりなるため、理論的には親株の組み合わせも含め8種類の遺伝子再集合ウイルス作製が可能であり、現在全ての組み合わせを作出するため試験を行っている。この手法を使えば、インフルエンザウイルスで行われている遺伝子組換え型ワクチン用ウイルス作出が可能となることから、特許出願のためデータの整備を行っている。また、平成19年度に作出したOBE-1株NSs欠損ウイルスのマウス病原性低下原因を解析するため、欠損ウイルス感染細胞におけるインターフェロン誘導遺伝子群の発現状況を検討したところ、検討した因子(Mx1、XAF-1、OAS-1、viperin)の発現上昇がみられ、NSsがタイプIインターフェロンの抑制に関わっていることが確認された。

報告書

(2件)
  • 2008 実績報告書
  • 2007 実績報告書
  • 研究成果

    (5件)

すべて 2008 2007

すべて 雑誌論文 (4件) (うち査読あり 4件) 学会発表 (1件)

  • [雑誌論文] Sequence determination and function analysis of the Akabane virus (Bunyaviridae) L RNA segment.2007

    • 著者名/発表者名
      Ogawa, Y., Kato, K., Tohya, Y. and Akashi H.
    • 雑誌名

      Arch. Virol. 152

      ページ: 971-979

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Comparison of Akabane virus isolated from sentinel cattle in Japan.2007

    • 著者名/発表者名
      Ogawa, Y., Fukutomi, T., Sugiura, K., Sugiura, K., Kato, K., Tohya, Y. and Akashi H
    • 雑誌名

      Vet. Microbiol. 124

      ページ: 16-24

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Characterization of temperature-sensitive Akabane virus mutants and their roles in attenuation.2007

    • 著者名/発表者名
      Ogawa, Y., Kato, K., Tohya, Y. and Akashi H.
    • 雑誌名

      Arch. Virol. 152

      ページ: 1679-1686

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Rescue of Akabane virus (Bunyaviridae) entirely from cloned cDNAs using RNA polymerase I.2007

    • 著者名/発表者名
      Ogawa, Y., Sugiura, K., Kato, K., Tohya, Y. and Akashi H.
    • 雑誌名

      J. Gen. Virol. 88

      ページ: 3385-3390

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] Establishment of reverse gengtics system on Akabane virus and its application2008

    • 著者名/発表者名
      明石博臣
    • 学会等名
      ハルピン獣医研究所創立記念シンポジウム(招待講演)
    • 発表場所
      中国ハルピン市
    • 年月日
      2008-07-17
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書

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公開日: 2007-04-01   更新日: 2016-04-21  

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