発生工学的手法を用いた固型臓器再生の試み

• 研究課題/領域番号: 19659066
• 研究種目: 萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 医化学一般
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 中内 啓光 東京大学, 医化学研究所, 教授 (40175485)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2008
• 研究課題ステータス: 完了 (2008年度)
• 配分額: 3,300千円 (直接経費: 3,300千円); 2008年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円); 2007年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
• キーワード: 固型臓器再生 / ES細胞 / 膵臓 / 臓器再生 / blastcyst complementation / ES cells / 賢臓 / Sall 1

研究概要

ホルモン投与により過排卵誘発を施した雌のpdx-1+/マウスを同雄マウスと交配させ、3.5日目に子宮灌流法により胚盤胞を採取する。得られた胚盤胞にβ-アクチンプローモークー下でGFPを発現するドナーES細胞をピエゾーマイクロマニピュレークーを用い10〜12個注入後、精管結紫マウスと交尾後2.5日後の偽妊娠マウスの子宮へ移植し、産仔を得た。新生児期において全ての産仔で膵臓の形成が確認された。ヘテロ同士の交配であるため、得られた産仔の遺伝子解析をおこない、pdx1遺伝子座について+/+、-/+、-/-のタイピングを行なった。免疫組織染色で形態を解析したところ、-/-マウスに形成された眸臓では全ての細胞がES細胞由来であった。また、成体まで成育したマウスについては糖耐性試験を行い、インスリン分泌機能が正常であることを確認した。

研究成果

• [雑誌論文] A rapid and efficient strategy to generate allele-specific anti-HLA monoclonal antibodies. (2009)
  • 著者名/発表者名: Yamazaki S, Suzuki N, Saito T, Ishii Y, Takiguchi M, Nakauchi H, Watanabe N.
  • 雑誌名: J Immunol Methods. 343 ページ: 56-60
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sall4 regulates cell fate decision in fetal hepatic stem/progenitor cells.1 (2009)
  • 著者名/発表者名: Oikawa T, Kamiya A, Kakinuma S, Zeniya M, Nishinakamura R, Tajiri H, Nakauchi H.
  • 雑誌名: Gastronterology. 136 ページ: 1000-1011
  • 査読あり
• [雑誌論文] Flow cytometric isolation and clonal indentification of self-renewing bipotent hepatic progenitor cells in adult mouse liver. (2008)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, A, Sekiya S, Onishi M, Oshima N, Kiyonari H, Nakauchi H, Taniguchi H.
  • 雑誌名: Hepatlogy 48 ページ: 1964-1978
  • 査読あり
• [雑誌論文] The polycomb gene product BMI1 contributes to the maintenance of tumor-initiating side population cells in hepatocellular carcinoma. (2008)
  • 著者名/発表者名: Chiba T, Miyagi S, Saraya A, Aoki R, Seki A, Morita Y, Yonemitsu Y, Yokosuka O, Taniguchi H. Nakauchi H, Iwama A.
  • 雑誌名: Cancer Res 68 ページ: 13087-13092
  • 査読あり
• [雑誌論文] Recipient-derived cells after cord blood transplantation: dynamics by multicolor FACS, reflecting graft failure and relapse. (2008)
  • 著者名/発表者名: Watanabe N, Takahashi S, Ishige M, Ishii Y, Ooji, Tomonari A, Tsukada N, Konuma T, Kato S, Sato A, Tojo A, Nakauchi H.
  • 雑誌名: Biol Blood Marrow Transplant. 14 ページ: 693-701
  • 査読あり