ケミカルイムノロジーの萌芽的研究

• 研究課題/領域番号: 19659123
• 研究種目: 萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 免疫学
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 鍔田 武志 東京医科歯科大学, 大学院・疾患生命科学研究部, 教授 (80197756)
• 研究期間 (年度): 2007
• 研究課題ステータス: 完了 (2007年度)
• 配分額: 3,300千円 (直接経費: 3,300千円); 2007年度: 3,300千円 (直接経費: 3,300千円)
• キーワード: Bリンパ球 / マクロファージ / 化合物 / ケミカルバイオロジー / CD22 / 活性化 / スクリーニング / シアル酸

研究概要

大規模化合物ライブラリーから何らかの機能変化(フェノタイプ)を誘導できる低分子化合物を同定し、その化合物の標的分子の同定を通して生命現象を解明しようというケミカルバイオロジーという手法が確立しつつある。免疫学研究においてケミカルバイオロジー的な手法が有用である可能性については、免疫抑制剤シクロスポリンの単離により、その標的分子シクロフィリンが同定されたことなどからも明らかである。そこで、Bリンパ球およびマクロファージの機能を制御する化合物の単離を試みた。Bリンパ球については、B細胞株WEHI-231や正常B細胞を用いて、その活性化や細胞死を制御する化合物のスクリーニング系を樹立した。また、マクロファージについては、サイトカイン産生を制御するスクリーニング系を樹立した。さらに、CD22はB細胞の免疫応答を制御する重要な分子であるが、α2.6シアル酸を認識するレクチン活性を持つ。そこで、α2.6シアル酸産生に必須の糖鎖転移酵素ST6GalIの発現を欠損する細胞株J558Lと、ST6GalI遺伝子を導入しα2.6シアル酸の産生を回復したJ558LST6細胞を用いて、フローサイトメトリーにより高感度にCD22とα2.6シアル酸の反応を阻害する化合物を同定するスクリーニング系を樹立した。ついで、化合物ライブラリーのスクリーニングを行ない、CD22とその糖鎖ブガンドの反応を阻害する化合物を同定するっとともに、種々のシアル酸誘導体とCD22の反応性を解析し、α2.6シアル酸に比べ数百倍高い親和性でCD22に結合する化合物の単離に成功した。

研究成果

• [雑誌論文] Augmentation of signaling through BCR containing IgE but not that containing IgA due to lack of CD22-mediated signal regulation (2007)
  • 著者名/発表者名: Sato, M., Adachi, T., Tsubata, T.
  • 雑誌名: J. Immunol. 178 ページ: 2901-2907
• [雑誌論文] Synthetic glycan ligand excludes CD22 from antigen receptor-containing lipid rafts. (2007)
  • 著者名/発表者名: Yu, J., Sawada, T., Adachi, T., Gao, X., Takematsu, H., Kozutsumi, Y., Ishida, H., Kiso. M., Tsubata, T.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 360 ページ: 759-764
• [雑誌論文] ER stress is involved in B cell antigen receptor ligation-induced apoptosis (2007)
  • 著者名/発表者名: Yan, B, C., Adachi, T., Tsubata, T.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 365 ページ: 143-148
• [雑誌論文] Interdomain A is crucial for ITAM-dependent and -independent regulation of Syk (2007)
  • 著者名/発表者名: Adachi, T., Wienands, J., Tsubata, T., Kurosaki, T.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 364 ページ: 111-117
• [雑誌論文] CD22 Regulates Time Course of Both B Cell Division and Antibody Response (2007)
  • 著者名/発表者名: Onodera, T., Poe, J, C., Tedder, T. F., Tsubata, T.
  • 雑誌名: J. Immunol. 180 ページ: 907-913
• [雑誌論文] Novel binding site for Src homology 2-containing protein-tyrosine phosphatase-1 in CD22 achtivated by B lymphocyte stimulation with antigen (2007)
  • 著者名/発表者名: Zhu, C., Fujimoto, M., Sato, M., Yanagisawa, T., Tsubata, T.
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. 283 ページ: 1653-1659
• [雑誌論文] FRET-based Ca^<2+> measurement in B lymphocyte by flow cytometry and confocal microscopy (2007)
  • 著者名/発表者名: Adachi, T., Tsubata, T.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 142 ページ: 377-382
• [雑誌論文] Induction of autophagy by B cell antigen receptor stimulation and its inhibition by costimulation (2007)
  • 著者名/発表者名: Watanabe, K., Ichinose, S., Hayashizaki, K., Tsubata, T
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Comm. 374 ページ: 274-281
• [雑誌論文] Design, synthesis, and structure-activity relationships of novel series of sialosides as CD22-specific inhibitors (2007)
  • 著者名/発表者名: Abdu-Allah, H. H. M., Tamanaka, T., Yu' J., Lu, Z., Sadagopan, M., Adachi. T., Tsubata, T., Kelm, S., Ishida, H., Kiso, M.
  • 雑誌名: J. Med. Chem. 51 ページ: 6665-6681
• [雑誌論文] Autophagy connects antigen receptor signaling to costimulatory signaling in B lymphocytes (2007)
  • 著者名/発表者名: Watanabe, K., Tsubata, T.
  • 雑誌名: Autophagy 5 ページ: 108-110
• [雑誌論文] Ligation of tumor-produced mucins to CD22 dramatically impairs splenic marginal zone B cells (2007)
  • 著者名/発表者名: Toda, M., Hisano, R., Yurugi, H., Akita, K., Maruyama, K., Inoue, M., Adachi, T., Tsubata, T., Nakada, H.
  • 雑誌名: Biochem J. 417 ページ: 673-683
• [雑誌論文] The centromeric interval of chromosome 4 derived from C57BL/6 mice accelerates type 1 diabetes in NOD. CD72^<b> congenic mice (2007)
  • 著者名/発表者名: Hou, R., Ohtsuji, M., Ohtsuji, N., Zhang, L., Adachi, T., Hirose, S., Tsubata, T.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Comm. 380 ページ: 193-197
• [学会発表] Membrane-bound lectins and humoral immunity (2009)
  • 著者名/発表者名: Tsubata, T.
  • 学会等名: CREST International Symposium "Acquired Immunity and Glycobiology"
  • 発表場所: Kazusa, Japan
• [学会発表] 免疫応答と組織細胞ストレス (2008)
  • 著者名/発表者名: 鍔田武志
  • 学会等名: 第一回センシングバイオロジー・シンポジウム(第5回IBBフロンティアシンポジウム)
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2008-12-19
• [学会発表] Endoplasmic reticulum stress and autoimmune diseases (2008)
  • 著者名/発表者名: Tsubata, T.
  • 学会等名: 36. Kongress der Deutschen Gesellschaft fur Rheumatologie
  • 発表場所: Berlin, Germany
• [学会発表] Cell death, autophagy, cell senescence and their roles in diseases (2008)
  • 著者名/発表者名: Tsubata, T.
  • 学会等名: 7^<th> Surugadai International Symposium
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] Antigen receptor tail clue of class-switched memory B cells (2008)
  • 著者名/発表者名: N. Engels, C. Heemann, L. Koening, Tsubata, T., S. Griep, V. Schrader, J. Wienands
  • 学会等名: Joint Annual Meeting of Immunology of the Austrian and German Societies
  • 発表場所: Vienna, Austria
• [学会発表] B細胞特異的C型レクチン様分子CD72はオリゴマンノースに対してCa2+非依存性のレクチン活性を有する (2008)
  • 著者名/発表者名: 渡辺幸造, 中島権一, 今井有香, 安達貴弘, 佐藤元彦, 林崎浩史, 戸谷希一郎, 伊藤幸成, 鍔出武志
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] Increased tonic B cell antigen receptor signaling but reduced antigen-induced B cell response in transgenic B cells expressing IgG (2008)
  • 著者名/発表者名: 満栄勇, 小野寺大志, 鍔田武志
  • 学会等名: 第38回日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] SLE抵抗性を有するヒトCD72選択的スプライシングアイソフォームは小胞体ストレスによるアポトーシスを惹起する (2008)
  • 著者名/発表者名: 人見祐基, 安達貴弘, 岩井佳子, 土屋尚之, 本田善一郎, 徳永勝士, 鍔田武志
  • 学会等名: 第38回日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] B細胞特異的C型レクチン様分子CD72のオリゴマンノースに対するCa2+非依存性のレクチン活性 (2008)
  • 著者名/発表者名: 渡辺幸造, 安達貴弘, 鍔田武志
  • 学会等名: 第38回日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] CD22阻害化合物の構造活性相関 (2008)
  • 著者名/発表者名: 玉中大智, Hajjaj H. M. Abdu-Allah, Jie Yu, Lu Zhuoyuan, Magesh Sadagopan, 安達貴弘, 鍔田武志, Soerge Kelm, 石田秀治, 木曾眞
  • 学会等名: 第38回日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] CD22による糖鎖リガンド依存的および非依存的なB細胞抗原受容体シグル伝達制御 (2008)
  • 著者名/発表者名: 安達貴弘, 満栄勇, 矢倉英隆, 鍔田武志
  • 学会等名: 第38回日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] Design and synthesis of novel sialosides as potential CD22-specific inhibitors (2007)
  • 著者名/発表者名: Mohamed, A, A, H, H., Tsubata, T., Ishida, H., Kiso, M.
  • 学会等名: XIX International Symposium on Glycoconjugates
  • 発表場所: Cairns, Australia.
• [学会発表] 抗原受容体を介するBリンパ球アポトーシスの分子メカニズム (2007)
  • 著者名/発表者名: 鍔出武志
  • 学会等名: 平成19年生理学研究会
  • 発表場所: 東岡崎
• [学会発表] Design and synthesis of novel sialosides as potential CD22-specific inhibitors (2007)
  • 著者名/発表者名: A, A, H, H, Mohamed., Tsubata, T., Ishida, H., Kiso, M.
  • 学会等名: The 2nd Annual meeting of Japanese society for chemical biology
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] 糖鎖リガンド類似化合物によるBリンパ球活性化制御分子CD22の機能制御 (2007)
  • 著者名/発表者名: Yu, J., Sawada, T., Adachi, T., Gao, X., Takematsu, H., Kozutsumi, Y., Ishida, H., Kiso, M., Tsubata, T.
  • 学会等名: 日本ケミカルバイオロジー研究会第2回年会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] The alternatively spliced isoform of human CD72 that confers resistance against systemic lupus erythematosus regulats B lymphocyte apoptosis (2007)
  • 著者名/発表者名: Hitomi, Y., Adachi, T., Tsuchiya, N., Honda, Z., Tokunaga, K., Tsubata, T.
  • 学会等名: 第37回日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] The kinetics of antibody response is regulated by CD22 (2007)
  • 著者名/発表者名: Onodera, T., Poe, J, C., Tedder, T, F., Tsubata, T.
  • 学会等名: 第37回日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] 合成糖鎖リガンドによるCD22のB細胞受容体とのリピッドラフトでの共局在の阻害/Synthetic glycan ligand excludes CD22 from antigen receptor-containing lipid rafts (2007)
  • 著者名/発表者名: Yu, J., Adachi, T., Gao, X., Takematsu, H., Tsubata, T.
  • 学会等名: 第37回日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] 小胞体ストレスがB細胞抗原受容体を介したアポトーシスに関与する/Unfolded protein response is involved in B cell antgen receptor-mediated apoptosis (2007)
  • 著者名/発表者名: Yan, B., Adachi, T., Tsubata, T.
  • 学会等名: 第37回日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] An ITAM-like motif containing tyrosine 817 in CD22 together with an ITIM containing tyrosine 783 is sufficient for negative regulation of BCR signaling (2007)
  • 著者名/発表者名: Zhu, C., Adachi, T., Sato, M., Fujimoto, M., Tsubata, T.
  • 学会等名: 第37回日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] CD22によるアイソタイプ特異的抗原受容体シグナル伝達制御には多価の蛋白抗原が必要である/CD22-mediated isotype specific B cell antigen receptor signaling regulation requires multivalent hapenated antigen (2007)
  • 著者名/発表者名: Adachi, T., Yu, J., Ondera, T., Man, R., Tsubata, T.
  • 学会等名: 第37回日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] Ligation of tumor-produced mucin to CD22 dramatically impairs splenic marginal zone B cells (2007)
  • 著者名/発表者名: 戸田宗豊, 圓山浩二, 万木肇, 秋田薫, 井上瑞江, 竹内紀子, 安達貴弘, 鍔田武志, 中田博
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会年会・第80回日本生化学会大会
  • 発表場所: 横浜
• [図書] Siglec-2 is a key molecule for immune response. In "Experimental Glycoscience, Glycobiology" (ed by N. Taniguchi, A. Suzuki, Y. Ito, H. Narimatsu, T. Kawasaki and S. Hase) (2008)
  • 著者名/発表者名: Tsubata, T
  • 総ページ数: 4
  • 出版者: Springer