分泌蛋白プロファイリング(secretome)によるマウス初期胚の機能評価

• 研究課題/領域番号: 19659426
• 研究種目: 萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 産婦人科学
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 丸山 哲夫 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (10209702)
• 研究分担者: 梶谷 宇 慶應義塾大学, 医学部, 助教 (60407111) ; 長島 隆 慶應義塾大学, 医学部, 助教 (40338116)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2008
• 研究課題ステータス: 完了 (2008年度)
• 配分額: 3,200千円 (直接経費: 3,200千円); 2008年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円); 2007年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
• キーワード: マウス / 胚 / プロテオミクス / 体外受精 / セクレトーム

研究概要

昨年度に引き続き本年度は、哺乳類胚発生のメカニズムならびに胚の個体発生能を含めた質的ポテンシャルを、非侵襲的に解明し評価することを目的とした。そのために、マウス胚発生過程において培養液中に分泌されるタンパク質のプロファイル(secretome)を明らかにし、そのデータベース構築を目指すとともに、agingや機械的受精操作などがsecretomeにどのような影響を及ぼすかについて検討するための実験システムの整備を行った。まず、secretomeと胚発生・発育の関連を検討する際に、十分な胚盤胞到達率が得られなければならない。一方、プロテインチップ解析に供するためには、出来るだけ少量の培養液で行う必要があり、これは胚発生・発育にとって厳しい環境となる。このように、両者は相反するため、至適条件の確立が極めて重要である。そこで、培養液の変更など種々の検討を行った結果、60μ1の培養液量で約90%の胚盤胞到達率を再現性良く得られる培養システムを確立し、引き続いてその実験システムにより得られた各時期の培養液をプロテインチップ解析に供した。その結果、コントロール培養液に比較して、胚存在下の培養液では、複数の特異的蛋白ピークが検出され、また時期に応じてそのプロファイルは変化した。これらの一連のsecretomeのプロファイリングと胚盤胞到達率との関連を検討するとともに、今回検出された複数の特異的蛋白の同定を目指し、MALDI/TOF-MS質量分析計への解析に供するに必要な実験システムの更なる構築を行った。昨年度より引き続いて本年度得られた上記の成果は、マウスのみならずヒト胚のqualityの非侵襲的評価システムを確立するうえで、重要な基盤データになると考えられる。

研究成果

• [雑誌論文] The UDP-glucose receptor P2RY14 triggers innate mucosalimmunity in the female reproductive tract by inducing IL-8. (2009)
  • 著者名/発表者名: Arase T, Uchida H, Kajitani T, Ono M, Tamaki K, Oda H, Nishikawa S, Kagami M, Nagashima T, Masuda H, Asada H, Yoshimura Y, Maruyama T
  • 雑誌名: The Journal of Immunology (In press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Analysis of serum FSH bioactivity in a patient with an FSH-secreting pituitary microadenoma and multicystic ovaries : A case report. (2008)
  • 著者名/発表者名: Kajitani T, Liu S, Maruyama T, Uchida H, Sakurai R, Masuda H, Nagashima T, Ono M, Arase T, Yoshimura Y
  • 雑誌名: Human reproduction (Oxford, England) 23 ページ: 435-439
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular and cellular mechanisms for differentiation and regeneration of the uterine endometrium. (2008)
  • 著者名/発表者名: Maruyama T, Yoshimura Y
  • 雑誌名: Endocrine journal 55 ページ: 795-810
  • NAID: 10024422609
  • 査読あり
• [雑誌論文] In vivo imaging in humanized mice. (2008)
  • 著者名/発表者名: Masuda H, Okano HJ, Maruyama T, Yoshimura Y, Okano H, Matsuzaki Y
  • 雑誌名: Current topics in microbiology and immunology 324 ページ: 179-196
  • 査読あり
• [雑誌論文] Activation of SRC kinase and phosphorylation of signal transducer and activator of transcription-5 are required for decidual transformation of human endometrial stromal cells. (2008)
  • 著者名/発表者名: Nagashima T, Maruyama T, Uchida H, Kajitani T, Arase T, Ono M, Oda H, Kagami M, Masuda H, Nishikawa S, Asada H, Yoshimura Y
  • 雑誌名: Endocrinology 149 ページ: 1227-1234
  • 査読あり
• [雑誌論文] Glycodelin blocks progression to S phase and inhibits cell growth : a possible progesterone-induced regulator for endometrial epithelial cell growth. (2008)
  • 著者名/発表者名: Ohta K, Maruyama T, Uchida H, Ono M, Nagashima T, Arase T, Kajitani T, Oda H, Morita M, Yoshimura Y
  • 雑誌名: Molecular human reproduction 14 ページ: 17-22
  • 査読あり
• [雑誌論文] Regeneration and adult stem cells in the human female reproductive tract. (2008)
  • 著者名/発表者名: Ono M, Maruyama T, Yoshimura Y
  • 雑誌名: Stem Cells and Cloning 1 ページ: 23-29
  • NAID: 110006958167
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pregnancy outcomes of reciprocal translocation carriers who have a history of repeated pregnancy loss. (2008)
  • 著者名/発表者名: Ozawa N, Maruyama T, Nagashima T, Ono M, Arase T, Ishimoto H, Yoshimura Y
  • 雑誌名: Fertil Steril 90 ページ: 1301-1304
  • 査読あり
• [雑誌論文] Subsequent pregnancy outcomes in recurrent miscarriage patients with a paternal or maternal carrier of a structural chromosome rearrangement. (2008)
  • 著者名/発表者名: Sugiura-Ogasawara M, Aoki K, Fujita T, Kawaguchi R, Maruyama T, Ozawa N, Sugi T, Takeshita T, Saito S
  • 雑誌名: J Hum Genet 53 ページ: 622-628
  • NAID: 10021249730
  • 査読あり
• [雑誌論文] 婦人科疾患の診断・治療・管理 内分泌疾患 月経異常を伴う内分泌疾患 多嚢胞性卵巣症候群. (2008)
  • 著者名/発表者名: 丸山哲夫, 吉村泰典
  • 雑誌名: 日本産科婦人科学会雑誌 60
  • 査読あり
• [雑誌論文] 【思春期の諸問題】排卵障害. (2008)
  • 著者名/発表者名: 丸山哲夫, 小田英之, 西川明花, 各務真紀, 内田 浩, 吉村泰典
  • 雑誌名: 産科と婦人科 75 ページ: 529-536
  • 査読あり
• [雑誌論文] 【ハイポキシア生物学 酸素代謝からみる生命現象の方程式】胎盤形成と酸素分圧. (2008)
  • 著者名/発表者名: 丸山哲夫, 小野政徳, 吉村泰典
  • 雑誌名: 医学のあゆみ 225 ページ: 1323-1326
  • 査読あり
• [雑誌論文] 【産婦人科ホルモン療法マニュアル】生殖内分泌・不妊 無月経. (2008)
  • 著者名/発表者名: 丸山哲夫, 西川明花, 小田英之, 荒瀬 透, 小野政徳, 各務真紀, 内田 浩, 吉村泰典
  • 雑誌名: 産科と婦人科 75 ページ: 8-14
  • 査読あり
• [雑誌論文] 【子宮内膜の機能と生殖医療 その最前線】子宮内膜脱落膜化の機序の解明 チロシンキナーゼSRCの役割と意義 (2008)
  • 著者名/発表者名: 丸山哲夫, 長島 隆, 梶谷 宇, 内田 浩, 吉村泰典
  • 雑誌名: 産婦人科の実際 57 ページ: 193-198
  • 査読あり
• [雑誌論文] 【ホルモン療法 最近の話題】月経異常を伴う内分泌疾患. (2008)
  • 著者名/発表者名: 内田 浩, 荒瀬 透, 小野政徳, 各務真紀, 小田英之, 西川明花, 丸山哲夫, 吉村泰典
  • 雑誌名: 産婦人科治療 96 ページ: 163-168
  • 査読あり
• [雑誌論文] 精査により診断に至った重症慢性骨盤痛を伴う異所性子宮内膜症の2例. (2008)
  • 著者名/発表者名: 古谷正敬, 浅田弘法, 内田 浩, 久慈直昭, 丸山哲夫, 青木大輔, 吉村泰典, 大東貴志, 木挽貢慈, 升田博隆, 青木 類, 中村修三
  • 雑誌名: エンドメトリオージス研究会会誌 29 ページ: 147-151
  • 査読あり
• [雑誌論文] 着床期特異的蛋白glycodelinによる子宮内膜腺上皮細胞の増殖機能制御. (2008)
  • 著者名/発表者名: 太田邦明, 丸山哲夫, 内田 浩, 小野政徳, 荒瀬 透, 長島隆, 青木大輔, 森田峰人, 吉村泰典
  • 雑誌名: 日本生殖内分泌学会雑誌 13 ページ: 43-47
  • 査読あり
• [雑誌論文] 不育症患者に対する大量ヒト免疫グロブリン療法の有効性の検討. (2008)
  • 著者名/発表者名: 小澤伸晃, 村島温子, 山口晃史, 丸山哲夫, 志村右子
  • 雑誌名: 成長科学協会研究年報 ページ: 235-238
  • 査読あり
• [雑誌論文] 妊娠子宮における子宮筋Side Population細胞の役割. (2008)
  • 著者名/発表者名: 小野政徳, 丸山哲夫, 梶谷 宇, 内田 浩, 荒瀬 透, 各務真紀, 小田英之, 西川明花, 升田博隆, 長島 隆, 太田邦明, 伊藤 守, 浅田弘法, 岡野栄之, 松崎有未, 吉村泰典
  • 雑誌名: 日本生殖内分泌学会雑誌 13 ページ: 25-29
  • NAID: 10021262312
  • 査読あり
• [雑誌論文] 【生殖医療と再生医療における倫理】ヒト雌性生殖器官の再生とモデル動物の確立. (2008)
  • 著者名/発表者名: 小野政徳, 升田博隆, 丸山哲夫, 吉村泰典, 松崎有未, 岡野栄之
  • 雑誌名: 再生医療 7 ページ: 137-141
  • 査読あり
• [雑誌論文] 子宮内膜症・腺筋症由来疼痛に関連する遺伝子の発現解析. (2008)
  • 著者名/発表者名: 梶谷 宇, 丸山哲夫, 浅田弘法, 小野政徳, 荒瀬 透, 小田英之, 西川明花, 内田 浩, 吉村泰典
  • 雑誌名: エンドメトリオージス研究会会誌 29 ページ: 91-93
  • 査読あり
• [雑誌論文] 【子宮内膜症の診療】異所性子宮内膜症. (2008)
  • 著者名/発表者名: 浅田弘法, 古谷正敬, 西尾 浩, 升田博隆, 内田 浩, 丸山哲夫, 梶谷 宇, 木挽貢慈, 吉村泰典
  • 雑誌名: 産婦人科治療 96 ページ: 241-247
  • 査読あり
• [雑誌論文] Histone deacetylase inhibitors stimulate cell migration in human endometdalMol Hum Reprod.adenocarcinoma cells through up-regulation of glycodelin (2007)
  • 著者名/発表者名: Uchida H, Maruyama T^*, Ono M, Ohta K, Kajitani T, Masuda H, Nagashima T, Arase T, Asada H, Yoshixnura Y
  • 雑誌名: Endocrinology 148 ページ: 896-902
  • 査読あり
• [雑誌論文] Histone acetylation and subcellular localization of chromosomal protein BRD4 during mouse oocyte meiosis and mitosis (2007)
  • 著者名/発表者名: Nagashima T, Maruyama T^*, Furuya M, Kajitani T, Uchida H, Masuda H, Ono M, Arase T, Ozato K, Yoshimura Y
  • 雑誌名: Mol Hum Reprod. 13 ページ: 141-148
  • NAID: 120000801922
  • 査読あり
• [雑誌論文] Noninvasive and real-time assessment of reconstructed functional human endometrium in NOD/SCID/□ cnull immunodeficient mice (2007)
  • 著者名/発表者名: Masuda H, Maruyama T^*, Hiratsu E, Yamane J, Iwanami A, Nagashima T, Ono M, Miyoshi H, Okano HJ, Ito M, Tamaoki N, Nomura T, Okano H, Matsuzaki Y, Yoshimura Y
  • 雑誌名: Proc Natl Acad Sci USA 104 ページ: 1925-1930
  • 査読あり
• [雑誌論文] Histone deacetylase inhibitor-induced glycodelin enhances the initial step of implantation (2007)
  • 著者名/発表者名: Uchida H^*, Maruyama T, Ohta K, Ono M, Arase T, Kagami M, Oda H, Kajitani T, Asada H, Toshimura Y
  • 雑誌名: Human Reproduction 22 ページ: 2615-2622
  • 査読あり
• [雑誌論文] Side population in human uterine myometrium displays phenotypic and functional chafacteristics of myometrial stem cells (2007)
  • 著者名/発表者名: Ono M, Maruyama T^*, Masuda H, Kajitani T, Nagashima T, Arase T, Ito M, Ohta K, Uchida H, Asada H, Yoshimura Y, Okano H, Matsuzaki Y
  • 雑誌名: Proc Natl Acad Sci USA 104 ページ: 18700-18705
  • 査読あり
• [学会発表] ヒト子宮における再生と幹細胞. (2009)
  • 著者名/発表者名: 丸山哲夫
  • 学会等名: 第11回 RMB (生殖医学・生物学) 研究会シンポジウム
  • 発表場所: 東京都新宿区
  • 年月日: 2009-01-24
• [学会発表] The role of uterine smooth muscle stem cells, isolated based on cell surface markers, in myometrial remodeling in the pregnant uterus. (2009)
  • 著者名/発表者名: Ono M, Maruyama T, Kajitani T, Uchida H, Oda H, Nishikawa S, Kagami M, Arase T, Nagashima T, Masuda H, Morikawa S, Mabuchi Y, Okano Y, Matsuzaki Y, Yoshimura Y
  • 学会等名: 56th Society for Gynecologic Investigation
  • 発表場所: Glasgow, Scotland
• [学会発表] 表面抗原を用いたヒト子宮平滑筋幹細胞の新しい分離法の開発とその妊娠至急リモデリングにおける役割. (2009)
  • 著者名/発表者名: 小野政徳, 丸山哲夫, 梶谷 宇, 内田 浩, 荒瀬 透, 小田英之, 西川明花, 各務真紀, 浅田弘法, 升田博隆, 岡野栄之, 松崎有未, 吉村泰典
  • 学会等名: 第8回 日本再生医療学会
  • 発表場所: 東京都千代田区
• [学会発表] CE-TOFMSによる子宮内膜症患者腹水のメタボローム解析. (2009)
  • 著者名/発表者名: 川田陽子, 浅田弘法, 杉本昌弘, 平山明由, 阿部しのぶ, 古谷正敬, 内田 浩, 浜谷敏生, 梶谷 宇, 丸山哲夫, 吉村泰典, 曽我朋義, 勝 冨
  • 学会等名: 第30回 日本エンドメトリオーシス学会
  • 発表場所: 宮城県仙台市
• [学会発表] 子宮内膜症組織におけるリポキシゲナーゼ経路関連遺伝子の発現解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 梶谷 宇, 丸山哲夫, 浅田弘法, 内田 浩, 各務真紀, 小田英之, 西川明花, 山崎彰子, 吉村泰典
  • 学会等名: 第30回 日本エンドメトリオーシス学会
  • 発表場所: 宮城県仙台市
• [学会発表] 腹腔鏡下ダグラス高子宮内膜症病巣切除術の定型化と疼痛緩和効果に関する検討. (2009)
  • 著者名/発表者名: 浅田弘法, 古谷正敬, 梶谷 宇, 内田 浩, 丸山哲夫, 吉村泰典, 升田博隆, 岸 郁子, 田島敏秀, 寺西貴英, 木挽貢慈
  • 学会等名: 第30回 日本エンドメトリオーシス学会
  • 発表場所: 宮城県仙台市
• [学会発表] 子宮内膜症の発症に対して、EP300およびAHRR遺伝子多型がおよぼす影響. (2009)
  • 著者名/発表者名: 辻 紘子, 浅田弘法, 浅井 哲, 古谷正敬, 内田 浩, 浜谷敏生, 丸山哲夫, 小崎健次郎, 柳橋達彦, 羽田智則, 安藤正明, 木挽貢慈, 吉村泰典
  • 学会等名: 第30回 日本エンドメトリオーシス学会
  • 発表場所: 宮城県仙台市
• [学会発表] ヒト子宮内膜幹様細胞の同定. 分離とその幹細胞特性の機能解析. (2008)
  • 著者名/発表者名: 升田博隆, 丸山哲夫, 小野政徳, 長島 隆, 梶谷 宇, 内田 浩, 浅田弘法, 岡野栄之, 松崎有未, 吉村泰典
  • 学会等名: 第13回 日本生殖内分泌学会
  • 発表場所: 大阪市北区
  • 年月日: 2008-11-29
• [学会発表] ヒト子宮の分化・再生と幹細胞システム. (2008)
  • 著者名/発表者名: 丸山哲夫
  • 学会等名: 第16回 日本ステロイドホルモン学会
  • 発表場所: 福井県福井市
  • 年月日: 2008-11-22
• [学会発表] Human dendometrial and myometrial stem cells. (2008)
  • 著者名/発表者名: Maruyama T
  • 学会等名: UCSF seminar
  • 発表場所: San Francisco, CA, USA
  • 年月日: 2008-11-13
• [学会発表] Regeneration potential of stem cells systems in the human uterus. (2008)
  • 著者名/発表者名: Maruyama T
  • 学会等名: Instituto Universitario IVI seminar
  • 発表場所: Valencia, Sapin
  • 年月日: 2008-07-11
• [学会発表] Laparoscopic treatment of rectovaginal endometriosis(Japaneseexperience). (2008)
  • 著者名/発表者名: Asada H, Furuya M, Uchida H, Maruyama T, Kobiki K, Kajitani T, Yoshimura Y
  • 学会等名: 9th Asia Pasific Association for Gynecologic Endoscopy and Minimally Invasive Therapy(APAGE)
  • 発表場所: Daegu, Korea
• [学会発表] Psychosocial stress and mental health status of Japanese couples with a history of repeated pregnancy loss. (2008)
  • 著者名/発表者名: Kagami M, Maruyama T, Kozumi T, Arase T, Uchida H, Yoshimura Y
  • 学会等名: 64th Amerikan Society for Reproductive Medicine (ASRM)
  • 発表場所: San Francisco, CA, USA
• [学会発表] Regeneration potential of stem cell systems in the human female reproductive tract. (2008)
  • 著者名/発表者名: Maruyama T
  • 学会等名: 1st World Congress on Reproductive Biology(WCRB)
  • 発表場所: Kailua-Kona, Hawaii, USA
• [学会発表] Isolation and functional analysis of putative human endometrial stem/ progenitor cells. (2008)
  • 著者名/発表者名: Masuda H, Mairuyama T, 0no M, Kajitani T, Okano H, Yoshimura Y
  • 学会等名: 24th European society of human reproduction and Embryology (ESHRE)
  • 発表場所: Barcelona, Spain
• [学会発表] 子宮平滑筋幹細胞の新しい分離法とその機能解析. (2008)
  • 著者名/発表者名: 小野政徳, 丸山哲夫, 梶谷 宇, 内田 浩, 荒瀬 透, 小田英之, 西川明花, 長島 隆, 升田博隆, 馬渕 洋, 森川 暁, 岡野栄之, 松崎有未, 吉村泰典
  • 学会等名: 第81回 日本内分泌学会学術総会
  • 発表場所: 青森県弘前市
• [学会発表] 染色体転座をもつ反復流産患者の生児獲得率に関する多施設共同研究 (2008)
  • 著者名/発表者名: 杉浦真弓, 川口里恵, 丸山哲夫, 小澤伸晃, 杉 俊隆, 竹下俊行, 齋藤 滋
  • 学会等名: 第53回 日本生殖医学会
  • 発表場所: 神戸市中央区
• [学会発表] 染色体転座をもっ反復流産患者の次回生児獲得率-多施設共同研究. (2008)
  • 著者名/発表者名: 杉浦真弓, 青木耕治, 藤井知行, 藤田富雄, 川口里恵, 丸山哲夫, 小澤伸晃, 杉 俊隆, 竹下俊行, 齊藤 滋
  • 学会等名: 第53回 日本人類遺伝学会
  • 発表場所: 神奈川県横浜市
• [学会発表] 腹腔鏡下ダグラス窩子宮内膜症病巣節叙述の疼痛緩和効果に関する検討. (2008)
  • 著者名/発表者名: 浅田弘法, 古谷正敬, 高野光子, 内田 浩, 丸山哲夫, 青木大輔, 吉村泰典, 木挽貢慈
  • 学会等名: 第48回 日本産科婦人科内視鏡学会
  • 発表場所: 横浜市西区
• [学会発表] 子宮内膜におけるP2RY14を介した新たな粘膜防御機構. (2008)
  • 著者名/発表者名: 荒瀬 透, 丸山哲夫, 内田 浩, 梶谷 宇, 西川明花, 小田英之, 各務真紀, 浅田弘法, 吉村泰典
  • 学会等名: 第23回日本生殖免疫学会
  • 発表場所: 富山県富山市
• [学会発表] Chemial abortionの既往を有する反復流産患者の病院および妊娠転帰に関する検討. (2008)
  • 著者名/発表者名: 西川明花, 丸山哲夫, 小田英之, 各務真紀, 荒瀬 透, 小野政徳, 長島 隆, 内田 浩, 吉村泰典
  • 学会等名: 第53回日本生殖医学会
  • 発表場所: 神戸市中央区