受容体型チロシンキナーゼ活性制御機構における膜貫通部位・膜近傍部位の機能解析

• 研究課題/領域番号: 19710186
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 生物分子科学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 佐藤 毅 大阪大学, 蛋白質研究所, 助教 (90403013)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2008
• 研究課題ステータス: 完了 (2008年度)
• 配分額: 3,690千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 390千円); 2008年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2007年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
• キーワード: 活性発現の分子機構 / 受容体型チロシンキナーゼ / 固体NMR / 膜蛋白質 / ライゲーション

研究概要

本研究は細胞の発生や分化に重要な役割を果たしている受容体型チロシンキナーゼ,特に繊維芽細胞成長因子受容体(FGFR3)の活性化メカニズム,活性制御のメカニズムにおける膜貫通(TM)部位,細胞質内膜近傍(juxtamembrane :JM)部位の機能の解明を目的したものである. FGFR3のTM-JM部位配列の合成化学的調製法を確立し,その方法を用いて調製した試料を用いることにより, 当受容体TM-JM 配列の構造解析を行った. その結果,野生型の配列,常時活性型変異が導入されたそれら二つの配列ではdimerization interface,さらにはJM部位の構造が異なるという知見を得た. この結果はTM部位での構造変化が,JM部位にも影響を与え, 挙動の違いとして現れることを初めて示すものであり, 受容体型チロシンキナーゼの機能発現メカニズムの解明に大きく貢献するものと考えている.

研究成果

• [雑誌論文] AHelix-to-Coil Transition at the ε -Cut Site in the Transmembrane Dimer of the Amyloid Precursor Protein is Required for Proteolysis (2009)
  • 著者名/発表者名: Takeshi Sato, Tzu-chun Tang, Gabriella Reubins, Jeffrey Z. Fei, Taiki Fujimoto, Pascal Kienlen-Campard, Stefan N. Constantinescu, Jean-Noel Octave, Saburo Aimoto, Steven O. Smith.
  • 雑誌名: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 106 ページ: 1421-1426
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structure of the Transmembrane (2009)
  • 著者名/発表者名: Takeshi Sato, Tzu-chun Tang, Gabriella Reubins, Jeffrey Z. Fei, Taiki Fujimoto, Hiroko Tamagaki, Pascal Kienlen-Campard, Stefan N. Constantinescu, Jean-Noel Octave, Steven O. Smith and Saburo Aimoto
  • 雑誌名: Juxtamembrane Region of Amyloid Peptide Science 2008 ページ: 89-90
  • 査読あり
• [雑誌論文] A Helix-to-Coil Transition at the ε-Cut Site in the Transmembrane Dimer of the Amyloid Precursor Protein is Required for Proteolysis (2009)
  • 著者名/発表者名: Sato, Takeshi
  • 雑誌名: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 106 ページ: 1421-1426
  • 査読あり
• [雑誌論文] Jean-Noel Octave Amyloidogenic processing but not aicd production requires a precisely oriented APP dimer assembled by transmembrane GXXXG motifs (2008)
  • 著者名/発表者名: Pascal Kienlen-Campard, Bernadette Tasiaux, Joanne Van Hees, Mingli Li, Sandra Huysseune, Takeshi Sato, Jeffrey. Z. Fei, Saburo Aimoto, Pierre J. Courtoy, Steven O. Smith, Stefan N.Constantinescu, Jean-Noel
  • 雑誌名: J. Biol Chem. 283 ページ: 7733-7744
  • 査読あり
• [雑誌論文] Peptide Thioester Synthesis Based on an N-S Acyl Shift Reaction (2008)
  • 著者名/発表者名: Ken'ichiroh Nakamura, Tomoya Uesugi, Takeshi Sato, Toru Kawakami, Saburo Aimoto
  • 雑誌名: Peptide Science 2007 ページ: 41-42
  • NAID: 10021906551
  • 査読あり
• [雑誌論文] Chemical Synthesis of the Extracellular Juxtamembrane-Transmembrane Region of Thrombopoietin Receptor (2008)
  • 著者名/発表者名: Tomoya Uesugi, Ken'ichiroh Nakamura, Takeshi Sato, Toru Kawakami and Saburo Aimoto
  • 雑誌名: Peptide Science 2007 ページ: 211-212
  • NAID: 10021906895
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structural Analysis of the Transmembrane-Juxtamembrane Region of FGFR3 (2008)
  • 著者名/発表者名: Yusuke Furukawa, Takeshi Sato, Chihiro Matsushita, Yuen H. Lam, Xin Zhao, Steven O. Smith and Saburo Aimoto
  • 雑誌名: Peptide Science 2007 ページ: 319-320
  • NAID: 10021907085
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structure of the Membrane Reconstituted Transmembrane-Juxtamembrane Peptide Neu(647-693) and Its Interaction with Ca2+/Calmodulin (2008)
  • 著者名/発表者名: Chihiro Matsushita, Takeshi Sato, Yusuke Furukawa, Yuen Han Lam, Xin Zhao, Steven O. Smith, Saburo Aimoto
  • 雑誌名: Peptide Science 2007 ページ: 501-502
  • NAID: 10021907427
  • 査読あり
• [雑誌論文] Amyloidogenic processing but not AICD production requires a precisely oriented APP dimer assembled by transmembrane GXXXGmotifs (2008)
  • 著者名/発表者名: Pascal Kienlen-Campard
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. (印刷中)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Peptide Thioester Synthesis Basedon an N-S Acyl Shift Reaction (2008)
  • 著者名/発表者名: Ken'ichiroh Nakamura
  • 雑誌名: Peptide Sience 2008 (印刷中)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Chemical Synthesis of the Extracellular Juxtamembrane-Transmembrane Region of Thrombopoietin Receptor (2008)
  • 著者名/発表者名: Tomoya Uesugi
  • 雑誌名: Peptide Sience 2008 (印刷中)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structual Analysis of the Transmembrane-Juxtamembrane Region of FGFR3 (2008)
  • 著者名/発表者名: Yusuke Furukawa
  • 雑誌名: Peptide Sience 2008 (印刷中)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structure of the Menbrane Reconstituted Transmembrane-Juxtamembrane Peptode Neu(647-693) and Its Interaction with Ca^<2+>/Calmodulin (2008)
  • 著者名/発表者名: Chihiro Matsushita
  • 雑誌名: Peptide Sience 2008 (印刷中)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Peptide purification by affinity chromatography based on α-ketoacyl group chemistry
  • 著者名/発表者名: Toshiaki Hara, Akira Tainosho, Ken'ichiroh Nakamura, Takeshi Sato, Toru Kawakami, Saburo Aimoto
  • 雑誌名: J. Pept. Sci (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] High resolution 1H MAS RFDR NMR of biological membranes
  • 著者名/発表者名: Darryl Aucoin, Devin Camenares, Xin Zhao, Jay Jung, Takeshi Sato and Steven O. Smith
  • 雑誌名: J. Mag.Reson. (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Peptide purification by affinity chromatography based on α-ketoacyl group chemistry
  • 著者名/発表者名: Hara. Toshiaki
  • 雑誌名: J. Pept. Sci. (印刷中)
  • 査読あり
• [雑誌論文] High resolution 1H MAS RFDR NMR of biological membranes
  • 著者名/発表者名: Aucoin, Darryl
  • 雑誌名: J Mag. Reson. (印刷中)
  • 査読あり
• [学会発表] Structure of the transmembrane-juxtamembrane region of the amyloid precursor protein : Implication for proteolysis at the ε-cut site (2009)
  • 著者名/発表者名: Takeshi Sato, Steven O. Smith, Saburo Aimoto
  • 学会等名: Life Science against Intractable Diseases, The joint Symposium of the 4th International Symposium of Institutes Network and Osaka University Global COE Symposium
  • 発表場所: Hotel Hankyu Expo Park
• [学会発表] Structure of the transmembrane-juxtamembrane region of the amyloid precursor protein : Implication for proteolvsis at the ε-cut site (2009)
  • 著者名/発表者名: Sato, Takeshi
  • 学会等名: Life Science against Intractable Diseases, The joint Symposium of the 4th International Symposium of Institutes Network and Osaka University Global COE Symposium
  • 発表場所: Hotel Hankyu Expo Park吹田
• [学会発表] Structure of the transmembrane-juxtamembrane region of single transmembrane proteins (2008)
  • 著者名/発表者名: Sato, Takeshi
  • 学会等名: The 7th OIB Symposium
  • 発表場所: 岡崎カンファレンスセンター、岡崎
  • 年月日: 2008-11-13
• [学会発表] Structure of the transmembrane-juxtamembrane region of single transmembrane proteins (2008)
  • 著者名/発表者名: Takeshi Sato, Steven O. Smith, Saburo Aimoto
  • 学会等名: The 7th OIB Symposium
  • 発表場所: 岡崎カンファレンスセンター, 岡崎
• [学会発表] Structure of the Transmembrane - Juxtamembrane Region of Amyloid Precursor Protein (2008)
  • 著者名/発表者名: Takeshi Sato, Tzu-chun Tang, Gabriella Reubins, Jeffrey Z. Fei, Taiki Fujimoto, Hiroko Tamagaki, Pascal Kienlen-Campard, Stefan N. Constantinescu, Jean-Noel Octave, Steven O. Smith and Saburo Aimoto
  • 学会等名: 第45 回日本ぺプチド討論会
  • 発表場所: 2008 タワーホール船堀
• [学会発表] Structural studies on the membrane reconstituted transmembrane-juxtamembrane region of ErbB2/Neu (2008)
  • 著者名/発表者名: Chihiro Matsushita, Takeshi Sato, Yusuke Furukawa, Yuen Han Lam, Xin Zhao, Steven O. Smith and Saburo Aimoto
  • 学会等名: 30th European Peptide Symposium
  • 発表場所: Finlandia Hall, Helsinki, Finland
• [学会発表] FGFR3膜貫通-細胞質内膜近傍部位の構造解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 佐藤毅, 古川祐輔, 松下千紘, Steven O. Smith, 相本三郎
  • 学会等名: 第8回日本蛋白質科学会年会
  • 発表場所: タワーホール船堀
• [学会発表] Structural studies on the membrane reconstituted transmembrane-juxtamembrane region of ErbB2/Neu (2008)
  • 著者名/発表者名: Matsushita, Chihiro
  • 学会等名: European Peptide Symposium
  • 発表場所: Finlandia Hall, Helsinki, Finland
• [学会発表] ErbB2/Neuの膜貫通-細胞質内膜近傍部位の構造解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 松下千紘
  • 学会等名: 第8回日本蛋白質科学会年会
  • 発表場所: タワーホール船堀
• [学会発表] Structure of the transmembrane and juxtamembran e region of Neu and FGFR3 (2007)
  • 著者名/発表者名: Takeshi Sato
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会/第80回日本生化学会 合同大会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2007-12-11
• [学会発表] Structural Analysis of the Transmembrane-Juxtarnembrane Regien of FGFR3 (2007)
  • 著者名/発表者名: Takeshi Sato
  • 学会等名: 第44回日本ペプチド討論会
  • 発表場所: 富山
  • 年月日: 2007-11-07
• [学会発表] Peptide Thioester Synthesis Basedon an N-S Acy1 Shift Reaction (2007)
  • 著者名/発表者名: Ken'ichiroh Nakamura
  • 学会等名: 第44回目本ペプチド討論会
  • 発表場所: 富山
  • 年月日: 2007-11-06
• [学会発表] Chemical Synthesis of the Extracellular Juxtamembrane-Transmembrane Region of Thrombopoietin Receptor (2007)
  • 著者名/発表者名: Takeshi Sato
  • 学会等名: 第44回日本ペプチド討論会
  • 発表場所: 富山
  • 年月日: 2007-11-06
• [学会発表] Structure of the Membrane Reconstituted Transmembiane-Juxtainembiane P eptide Neu(647-693) arid lts Interaction with Ca^<2+>/Calmodulin (2007)
  • 著者名/発表者名: Takeshi Sato
  • 学会等名: 第44回日本ペプチド討論会
  • 発表場所: 富山
  • 年月日: 2007-11-06
• [学会発表] ネイティブケミカルラィゲーショシ法によるFGFR3膜貫通一膜近傍部位ベプチドの化学合成 (2007)
  • 著者名/発表者名: 佐藤 毅
  • 学会等名: 第7回日本蛋白質科学会年会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2007-05-25
• [学会発表] Structure of the transmembrane and juxtamembrane region of Neu and FGFR3 (2007)
  • 著者名/発表者名: Takeshi Sato, Yusuke Furukawa, Chihiro Matsushita, Steven O. Smith, Saburo Aimoto
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会/第80回日本生化学会 合同大会
  • 発表場所: パシフィコ横浜、ヨコハマグランドイインターコンチネンタルホテル横浜
• [学会発表] Peptide Thioester Synthesis Based on an N-S Acyl Shift Reaction (2007)
  • 著者名/発表者名: Ken'ichiroh Nakamura, Tomoya Uesugi,Takeshi Sato, Toru Kawakami, Saburo Aimoto
  • 学会等名: 第44回日本ぺプチド討論会2007
  • 発表場所: 富山国際会議場 富山
• [学会発表] Chemical Synthesis of the Extracellular Juxtamembrane-Transmembrane Region of Thrombopoietin Receptor (2007)
  • 著者名/発表者名: Tomoya Uesugi, Ken'ichiroh Nakamura, Takeshi Sato, Toru Kawakami, Saburo Aimoto
  • 学会等名: 第44回日本ぺプチド討論会2007
  • 発表場所: 富山国際会議場 富山
• [学会発表] Structural Analysis of the Transmembrane-Juxtamembrane Region of FGFR3 (2007)
  • 著者名/発表者名: Yusuke Furukawa, Takeshi Sato, Chihiro Matsushita, Yuen H. Lam, Xin Zhao, Steven O. Smith, Saburo Aimoto
  • 学会等名: 第44回日本ぺプチド討論会2007
  • 発表場所: 富山国際会議場 富山
• [学会発表] Structure of the Membrane Reconstituted Transmembrane-Juxtamembrane Peptide Neu(647-693) and Its Interaction with Ca2+/Calmodulin (2007)
  • 著者名/発表者名: Chihiro Matsushita, Takeshi Sato, Yusuke Furukawa, Yuen Han Lam, Xin Zhao, Steven O. Smith and Saburo Aimoto
  • 学会等名: 第44回日本ぺプチド討論会2007
  • 発表場所: 富山国際会議場 富山
• [学会発表] ネイティブケミカルライゲーション法によるFGFR3膜貫通-膜近傍部位ぺプチドの化学合成 (2007)
  • 著者名/発表者名: 古川祐輔, 佐藤毅, Steven O. Smith, 相本三郎
  • 学会等名: 第7回日本蛋白質科学会年会
  • 発表場所: 仙台