停止複製フォークを感知・プロセッシングする因子の網羅的探索と構造機能解析

• 研究課題/領域番号: 19770157
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 分子生物学
• 研究機関: (財)東京都医学研究機構
• 研究代表者: 田中 卓 財団法人東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 主任研究員 (80425686)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2008
• 研究課題ステータス: 完了 (2008年度)
• 配分額: 3,880千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 480千円); 2008年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円); 2007年度: 1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
• キーワード: DNA複製 / 複製再開始 / ・複製フォーク / 分子認識 / 分子間相互作用 / タンパク質 / マイクロアレイ / 核酸 / 結晶構造解析 / 大腸菌 / 複製

研究概要

停止フォークセンサー、大腸菌PriAタンパク質の DNA結合ドメインの結晶構造を解析し、極めてユニークなフォーク特異的認識機構を有していることを明らかにした。また、真核細胞のフォーク安定化因子、Mrc1、Swi1/3タンパク質が、直接物理的に結合しており、停止フォーク上で協調した相互作用をすることを見出した。これらの結果は、真核細胞のチェックポイント機構解明に重要な情報を提供するものである。

研究成果

• [雑誌論文] Structural basis of the 3'-end recognition of a leading strand in stalled replication forks by PriA (2007)
  • 著者名/発表者名: Sasaki, K., Ose, T., Okamoto, N., Maenaka, K., Tanaka, T., Masai, H., Saito, M., Shirai, T., and Kohda, D.
  • 雑誌名: EMBO J 28 ページ: 2584-2593
  • 査読あり
• [雑誌論文] Escherichia coli PriA protein, two modes of DNA binding and activation of ATP hydrolysis (2007)
  • 著者名/発表者名: Tanaka, T., Mizukoshi, T., Sasaki, K., Kohda, D., and Masai, H
  • 雑誌名: J. Biol. Chem 282 ページ: 19917-19927
  • 査読あり
• [雑誌論文] Strustural basis the 3'-end recognition of a leading strand in stall replication forks by PriA (2007)
  • 著者名/発表者名: Sasaki, K., Ose T., Okamoto n., Maenaka K., Tanaka T., Masai H ., Saito M., Shirai T., and Kohda D.
  • 雑誌名: EMBO Journal 26 ページ: 2589-2593
  • 査読あり
• [雑誌論文] Escherishia PriA protein, two modes of DNA binding and activation of ATP hydrolysis (2007)
  • 著者名/発表者名: Tanaka, T., Mizukohsi, T., Sasaki, K., Kohda, D., and Masai, H.
  • 雑誌名: Journal of Biological Chemistry 282 ページ: 19917-19927
  • 査読あり
• [学会発表] Regulation of replication fork integrity during S phase. (2008)
  • 著者名/発表者名: Hisao Masai, Motoshi Hayano, Seiji Matsranoto, Yutaka Kanoh, Mika Yokoyama, Michie Shimmoto, Naoko Kakusho, Naoko Yoshizawa-Sugata and Taku Tanaka.
  • 学会等名: 第31回 日本分子生物学会
  • 発表場所: 兵庫県神戸市
  • 年月日: 2008-12-10
• [学会発表] Regulation of replication fork in maintenance of genomic integrity. (2008)
  • 著者名/発表者名: Hisao Masai, Motoshi Hayano, Seiji Matsumoto, Yutaka Kanoh, Michie Shimmoto, Mika Yokoyama, Taku Tanaka, Naoko Kakusho, Naoko Yoshizawa-Sugata, Zhiying You, Sayuri Ito, Chika Taniyama and Ai Ishii.
  • 学会等名: 第6回 3R Symposium
  • 発表場所: 静岡県掛川市
  • 年月日: 2008-10-29
• [学会発表] Regulation of assembly and progression of replication fork by Cdc7 kinase. (2008)
  • 著者名/発表者名: Hisao Masai, Motoshi Hayano, Seiji Matsumoto, Yutaka Kanoh, Mika Yokoyama, Michie Shimmoto, Naoko Kakusho, and Taku Tanaka.
  • 学会等名: The First GCEO Symposium at Tokyo Institute of Technology on Chromosome Biology
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2008-10-24
• [学会発表] Regulation of establishment and maintenance of replication fork by Cdc7 kinase. (2008)
  • 著者名/発表者名: Hisao Masai, Motoshi Hayano, Seiji Matsumoto, Naoko Kakusho, Mika Yokoyama, Yutaka Kanoh, Michie Simmoto and Taku Tanaka.
  • 学会等名: EMBO Conference on "Replication and Segregation of Chromosomes"
  • 発表場所: Norway, Geilo
  • 年月日: 2008-06-19
• [学会発表] Regulation of establishment and maintenance of replication fork by Cdc7 kinase. (2008)
  • 著者名/発表者名: Hisao Masai, Motoshi Hayano, Seiji Matsumoto, Naoko Kakusho, Mchie Shimmoto, Mika Yokoyama, Yutaka Kanoh, Taku Tanaka and Yiikari Odagiri.
  • 学会等名: Ataxia-Telangiectasia Workshop
  • 発表場所: 滋賀県大津市
  • 年月日: 2008-04-25
• [学会発表] 分裂酵母Mrc1タンパクの精製とその性情の解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 横山 美佳、田中 卓、覺正 直子、正井 久雄
  • 学会等名: 第25回染色体ワークショップ
  • 発表場所: ポスター発表
• [学会発表] Regulation of establishment and maintenance of replication fork by Cdc7 kinase (2008)
  • 著者名/発表者名: Hisao Masai, Motoshi Hayano, Seiji Matsumoto, Naoko Kakusho, Michie Shimmoto, Mika Yokoyama, Yutaka Kanoh, Taku Tanaka and Yukari Odagiri
  • 学会等名: Ataxia-Telangiectasia Workshop 2008
  • 発表場所: 滋賀(招待講演)
• [学会発表] Regulation of establishment and maintenance of replication fork by Cdc7 kinase (2008)
  • 著者名/発表者名: Hisao Masai, Motoshi Hayano, Seiji Matsumoto, Naoko Kakusho, Mika Yokoyama, Yutaka Kanoh, Michie Simmoto and Taku Tanaka
  • 学会等名: EMBO Conference on "Replication and Segregation of Chromosomes"
  • 発表場所: ノルウェイ(招待講演)
• [学会発表] Regulation of assembly and progression of replication fork by Cdc7 kinase (2008)
  • 著者名/発表者名: Hisao Masai, Motoshi Hayano, Seiji Matsumoto, Yutaka Kanoh, Mika Yokoyama, Michie Shimmoto, Naoko Kakusho, and Taku Tanaka
  • 学会等名: The First GCEO Symposium at Tokyo Institute of Technology on Chromosome Biology 2008
  • 発表場所: 東京(招待講演)
• [学会発表] Regulation of replication fork in maintenance of genomic integrity (2008)
  • 著者名/発表者名: Hisao Masai, Motoshi Hayano, Seiji Matsumoto, Yutaka Kanoh, Michie Shimmoto, Mika Yokoyama, Taku Tanaka, Naoko Kakusho, Naoko Yoshizawa-Sugata, Zhiying You, Sayuri Ito, Chika Taniyama and Ai Ishii
  • 学会等名: 第6回3R Symposium
  • 発表場所: 静岡(招待講演)
• [学会発表] Regulation of replication fork integrity during S phase (2008)
  • 著者名/発表者名: Hisao Masai, Motoshi Hayano, Seiji Matsumoto, Yutaka Kanoh, Mika Yokoyama, Michie Shimmoto, Naoko Kakusho, Naoko Yoshizawa-Sugata and Taku Tanaka
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会
  • 発表場所: 神戸(招待講演)
• [学会発表] PriAタンパク質:停止複製フォーク特異的認識のための構造基盤 (2007)
  • 著者名/発表者名: 田中 卓、佐々木 香織、水越 利巳、神田 大輔、正井 久雄
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会
  • 発表場所: 神奈川県横浜市
  • 年月日: 2007-12-11
• [学会発表] DNA結合ドメインの2つのモジュールの役割とDNA3'末端結合ポケットの特異な構造 (2007)
  • 著者名/発表者名: 田中 卓、佐々木 香織、神田 大輔、正井 久雄
  • 学会等名: 第4回21世紀大腸菌研究会
  • 発表場所: 静岡県藤枝市
  • 年月日: 2007-07-18
• [学会発表] PriAタンパク質による停止複製フォーク認識:DNA結合ドメインの2つのモジュールの役割とDNA3'末端結合ポケットの特異な構造 (2007)
  • 著者名/発表者名: 田中 卓、佐々木 香織、神田 大輔、正井 久雄
  • 学会等名: 第4回21世紀大腸菌研究会
  • 発表場所: 静岡(口頭発表)
• [学会発表] PriAタンパク質:停止複製フォーク特異的認識のための構造基盤 (2007)
  • 著者名/発表者名: 田中 卓、佐々木 香織、水越 利巳、神田 大輔、正井 久雄
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会
  • 発表場所: 横浜(口頭およびポスター発表)
• [学会発表] Structural basis for the DNA recognition of PriA protein in the stalled DNA replication fork (2007)
  • 著者名/発表者名: 佐々木 香織、田中 卓、正井 久雄、前仲 勝実、神田 大輔
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会
  • 発表場所: 横浜(ポスター発表)
• [学会発表] 、分裂酵母Mrc1タンパクの精製とその性情の解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 横山 美佳、田中 卓、覺正 直子、正井 久雄
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会
  • 発表場所: 横浜(ポスター発表)
• [図書] 「分子間相互作用解析ハンドブック」(礒辺俊明,中山敬一,伊藤隆司/編) 第二章 タンパク質-核酸相互作用解析法 1.South-Western法 (2007)
  • 著者名/発表者名: 田中 卓、正井 久雄
  • 出版者: 羊土社