大腸菌グリコーゲンリン酸化酵素の同定と機能解析

• 研究課題/領域番号: 19780072
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 応用生物化学
• 研究機関: 三重大学
• 研究代表者: 磯野 直人 三重大学, 大学院・生物資源学研究科, 助教 (70378321)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2008
• 研究課題ステータス: 完了 (2008年度)
• 配分額: 3,300千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 300千円); 2008年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2007年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
• キーワード: リン酸化 / グリコーゲン / デンプン / 大腸菌

研究概要

グリコーゲンや穀物デンプンのリン酸化に関与する酵素を探索した. 大腸菌抽出液から酵素精製を試みた. 複数のクロマトグラフィーで分離する段階で, グリコーゲンリン酸化酵素の活性は急激に減少することが認められた. そのため, 目的タンパク質の同定には至らなかった. 一方, イネのデンプンリン酸化酵素は1457残基からなる162 kDaのタンパク質であることを明らかにした. これは完全長cDNAデータベースに登録されている構造とは異なっていた. 大腸菌で本酵素を発現させたところ, グリコーゲンのリン酸化率が上昇し, 酵素活性を有することが確認された.

研究成果

• [雑誌論文] Origin of defects in assembled supramolecular structures of sweet potato starches with different amylopectin chain-length distribution. (2009)
  • 著者名/発表者名: Noda, T., Isono, N., Krivandin, A. V., Shatalova, O. V., Braszczak, W. and Yuryev V. P.
  • 雑誌名: Carbohydr. Polym. 76 ページ: 400-409
  • 査読あり
• [雑誌論文] Origin of defects in assembled supramolecular structures of sweet potato starches with different amylopectin chain-length distribution (2009)
  • 著者名/発表者名: Noda, et.al.
  • 雑誌名: Carbohydrate Polymers 76 ページ: 400-409
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structural, thermal and viscoelastic properties of potato starches. (2008)
  • 著者名/発表者名: Singh, N., Isono, N., Srichuwong, S., Noda, T. and Nishinari, K.
  • 雑誌名: Food Hydrocolloids 22 ページ: 979-988
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structural, thermal and viscoelastic properties of potato starches. (2008)
  • 著者名/発表者名: Singh, et. al.
  • 雑誌名: Food Hydrocolloids 22 ページ: 979-988
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enzymatic characterization of starch synthase III from kidney bean (Phaseolus vulgaris L.) (2007)
  • 著者名/発表者名: Senoura, T., Asao, A., Takashima, Y., Isono, N., Hamada, S., Ito, H. and Matsui, H.
  • 雑誌名: FEBS J. 274 ページ: 4550-4560
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enzymatic characterization of starch synthase III from kidney bean (Phaseolus vulgaris L.) (2007)
  • 著者名/発表者名: Senoura, et. al.
  • 雑誌名: FEBS Journal 274 ページ: 4550-4560
  • 査読あり
• [学会発表] 米類似品種及び白未熟粒のデンプンの構造比較 (2009)
  • 著者名/発表者名: 平井宏和, 市橋悠哉, 布目知広, 三島隆, 磯野直人, 久松眞
  • 学会等名: 第57回日本応用糖質科学会中部支部講演会
  • 発表場所: 愛知県名古屋市
  • 年月日: 2009-01-30
• [学会発表] デンプンの特性解析と新しい利用の探求 (2008)
  • 著者名/発表者名: 磯野直人
  • 学会等名: NPOバイオものづくり中部 平成20年度糖鎖分科会
  • 発表場所: 愛知県名古屋市
  • 年月日: 2008-10-10
• [学会発表] デンプンの特性解析と新しい利用の探求 (2008)
  • 著者名/発表者名: 磯野直人
  • 学会等名: NPOバイオものづくり中部平成20年度糖鎖分科会
  • 発表場所: 愛知県名古屋市
  • 年月日: 2008-10-10
• [学会発表] アミロース含量類似の澱粉間における物性差に関与する構造部位の研究 (2008)
  • 著者名/発表者名: 市橋悠哉, 布目知広, 橋本和樹, 三島隆, 磯野直人, 久松眞, 大坪研一
  • 学会等名: 日本応用糖質科学会2008年度大会
  • 発表場所: 沖縄県中頭郡西原町
  • 年月日: 2008-09-18
• [学会発表] パプアニューギニアのサゴヤシデンプンの特性 (2008)
  • 著者名/発表者名: 三島隆, 内藤整, 江原宏, 豊田由貴夫, 磯野直人, 久松眞
  • 学会等名: 第17回サゴヤシ学会講演会
  • 発表場所: 三重県津市
  • 年月日: 2008-06-21
• [学会発表] 奄美大島のソテツデンプンの特性 (2008)
  • 著者名/発表者名: 飯野良介, 三島隆, 江原宏, 磯野直人, 久松眞
  • 学会等名: 第17回サゴヤシ学会講演会
  • 発表場所: 三重県津市
  • 年月日: 2008-06-21
• [学会発表] サゴヤシデンプンの種間差 (2008)
  • 著者名/発表者名: 三島隆, 江原宏, 内藤整, 溝田智俊, 磯野直人, 久松眞
  • 学会等名: 日本農芸化学会2008年度大会
  • 発表場所: 愛知県名古屋市
  • 年月日: 2008-03-27
• [学会発表] デンプンの構造から特性を予測する (2007)
  • 著者名/発表者名: 磯野直人
  • 学会等名: 第5回糖鎖科学名古屋拠点「若手の力」フォーラム
  • 発表場所: 愛知県名古屋市
  • 年月日: 2007-09-15
• [学会発表] 澱粉結晶領域の微細構造と物性に関する研究 (2007)
  • 著者名/発表者名: 布目知広, 加藤拓也, 橋本和樹, Sathaporn Srichuwong, 三島隆, 磯野直人, 久松眞
  • 学会等名: 日本応用糖質科学会2007年度大会
  • 発表場所: 神奈川県藤沢市
  • 年月日: 2007-08-29
• [学会発表] 採取地の異なるサゴヤシデンプンの比較 (2007)
  • 著者名/発表者名: 三島隆, 江原宏, 内藤整, 溝田智俊, 磯野直人, 久松眞
  • 学会等名: 第16回サゴヤシ学会講演会
  • 発表場所: 東京都豊島区
  • 年月日: 2007-06-17