研究課題/領域番号 |
19780075
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研究種目 |
若手研究(B)
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配分区分 | 補助金 |
研究分野 |
応用生物化学
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研究機関 | 大阪大学 |
研究代表者 |
古賀 雄一 大阪大学, 大学院・工学研究科, 助教 (30379119)
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研究期間 (年度) |
2007 – 2008
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研究課題ステータス |
完了 (2008年度)
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配分額 *注記 |
2,310千円 (直接経費: 2,100千円、間接経費: 210千円)
2008年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
2007年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
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キーワード | タンパク質工学 / リパーゼ / 光学選択性 / 結晶構造解析 / 機能改変 / たんぱく質工学 / 結晶構造解 |
研究概要 |
Burkholderia cepacia由来リパーゼの3-phenylbutyric acidに対する光学選択性を熱力学的、構造学的に解析を行った。光学選択性の改変された4重変異体4種類の大量生産系構築を行った。1リットルの培養液当たり233mg以上の組換えリパーゼの発現が確認された。精製酵素を用いて結晶化実験を行い、20-30%のイソプロパノールを共沈剤として用いた条件で針状結晶がえられ、X線回折データの取得を行った。また、キラルカラムを用いて、ラセミックな基質に対する選択的分解を観察する手法を開発した。
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