電子線単粒子解析によるスルフォニル尿素剤受容体の制御機構解明

• 研究課題/領域番号: 19790034
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 物理系薬学
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 木村 泰久 京都大学, 大学院・農学研究科, 助教 (10415143)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2008
• 研究課題ステータス: 完了 (2008年度)
• 配分額: 3,780千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 480千円); 2008年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円); 2007年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
• キーワード: スルフォニル尿素受容体 / 単粒子解析 / ATP感受性カリウムチャネル / KATP / SUR1 / Kir6.2 / ABC transporter / single particle analysis

研究概要

本研究ではヒト培養細胞を用いた哺乳類由来の膜タンパク質複合体につき、発現精製に必要な基盤技術を開発した。またこれらの技術を用いてスルフォニル尿素剤受容体を発現精製し、単粒子解析により基準となる構造の決定を行った。また、タンパク質工学的手法によりヒトMDR1のリンカードメインが持つ機能を明らかにした。さらにヒトABCA1のシステイン結合が機能に必須であることを明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Formation of two intramolecular disulfide bonds is necessary for apoA-I-dependent cholesterol efflux mediated by ABCA1 (2009)
  • 著者名/発表者名: Hozoji, M., Kimura, Y., Kioka, N., Ueda, K.
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. 284 ページ: 11293-11300
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sodium taurocholate-dependent lipid efflux by ABCA1-Effects of W590S mutation on lipid translocation and apoA-I dissociation (2009)
  • 著者名/発表者名: Nagao, K. Zhao, Y., Takahashi, K., Kimura, Y., Ueda, K.
  • 雑誌名: J. Lipid Res. 50 ページ: 1165-1172
  • 査読あり
• [雑誌論文] Functional role of the linker region in purified human P-glycoprotein (2009)
  • 著者名/発表者名: Sato, T., Kodan, A., Kimura, Y., Ueda, K., Nakatsu, T. and Kato, H
  • 雑誌名: FEBS J. (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Formation of two intramolecular disulfide bonds is necessary for apoA-I-dependent cholesterol efflux mediated by ABCAl. (2009)
  • 著者名/発表者名: Hozoji, M., Kimura, Y., Kioka, N. and Ueda, K.
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sodium taurocholate-dependent lipid efflux by ABCAl-Effects of W590S mutation on lipid translocation and apoA-I dissociation. (2009)
  • 著者名/発表者名: Nagao, K. Zhao, Y., Takahashi, K., Kimura, Y., and Ueda, K.
  • 雑誌名: J. Lipid Res (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mechanism of multi-drug recognition by MDR1/ABCB1 (2007)
  • 著者名/発表者名: Kimura, Y., Morita, S.-y., Matsuo, M., Ueda, K.
  • 雑誌名: Cancer Sci. ページ: 1303-1310
  • NAID: 10019998059
  • 査読あり
• [雑誌論文] Functional role of the linker region in purified human P-glycoprotein
  • 著者名/発表者名: Sato, T., Kodan, A., Kimura, Y., Ueda, K., Nakatsu, T., Kato, H.
  • 雑誌名: FEBS J. (in press)
  • 査読あり
• [学会発表] Large scale production and purification of KATP channel in mammalian cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Y. Kimura, H. Kato, K. Ueda
  • 学会等名: Takeda Science Foundation Symposium on PharmaSciences
  • 発表場所: Tokyo
  • 年月日: 2009-05-24
• [学会発表] ヒトABCG1の大量培養系の構築・安定化条件の探索 (2009)
  • 著者名/発表者名: 平山裕士, 木村泰久, 松尾道憲, 木岡紀幸, 植田和光
  • 学会等名: 農芸化学会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2009-03-28
• [学会発表] ヒト培養細胞を用いたATP感受性カリウムチャネル複合体の大量生産、高純度精製 (2009)
  • 著者名/発表者名: 木村泰久, 平山裕士, 松尾道憲, 木岡紀幸, 加藤博章, 植田和光
  • 学会等名: 農芸化学会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2009-03-28
• [学会発表] ヒト培養細胞を用いたATP感受性カリウムチャネル復合体の大量生産、高純度精製 (2009)
  • 著者名/発表者名: 木村泰久、平山裕士、加藤博章、植田和光
  • 学会等名: 農芸化学会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2009-03-28
• [学会発表] ヒト培養細胞を用いたヒトABCトランスポーターの大量発現系の構築および精製条件スクリーニング手法の開発 (2008)
  • 著者名/発表者名: 木村泰久, 平山裕士, 浅見成美, 木岡紀幸, 松尾道憲, 加藤博章, 植田和光
  • 学会等名: 分子生物学会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2008-12-15
• [学会発表] Mechanism of multidrug recognition by MDR1 - cholesterol fill-in model (2008)
  • 著者名/発表者名: 木村泰久, 松尾道憲, 木岡紀幸, 植田和光
  • 学会等名: FEBS-ABC2008
  • 発表場所: Innsbruck, Austria