| 研究課題/領域番号 |
19J10993
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| 研究種目 |
特別研究員奨励費
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 国内 |
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| 審査区分 |
小区分34020:分析化学関連
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| 研究機関 | 東京工業大学 |
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研究代表者 |
宮川 晃尚 東京工業大学, 理学院, 特別研究員(DC2)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-25 – 2021-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2019年度)
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| 配分額 *注記 |
2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
2019年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
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| キーワード | 超音波 / 粒子 / アプタマー / 微量計測 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
本研究は超音波－重力場を利用した新規高感度計測法を開発する。この手法は数十分子程度の物質を検出する能力を有しており、生化学、環境科学の観点から非常に重要な物質の検出を可能にする。計測物質の汎用性を広げるために、アプタマーと呼ばれるDNAを用いた計測法やマイクロ粒子のダイナミックな浮揚位置の変化を観測することによる計測法の開発を行う。また、その場計測を行うことで、反応の速度論的解析にも利用できることを示す。このように、汎用性・融通性の高い高感度計測法の開発を行う。
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| 研究実績の概要 |
次の検討を行った。
1.特定の分子と相互作用するアプタマーを利用し、生理活性物質の微量計測を行った。アクリル粒子(PMMA)と金ナノ粒子(AuNP)表面上にアプタマーと相補的に結合するDNAを修飾し、PMMAとAuNPをアプタマーを介して結合させた。ここにターゲット分子を導入することで、PMMAとAuNPの結合が切れることがわかった。超音波－重力複合場中で計測することで、この現象は浮揚位置の変化として観測できる。この原理を利用し、ATP、ドーパミン、アンピシリンをpM-nMのオーダーで検出できることがわかった。この測定系は豚の血中のATPの計測に適用し、本計測法が実サンプルにも利用できるということがわかった。本検出法における平衡モデルは、PMMA、アプタマー、AuNPの結合平衡と、AuNP結合PMMA粒子とターゲット分子の平衡という複雑なモデルで表される。しかし、密度標準粒子を用いてAuNPの結合量を正確に定量することにより、この複雑な平衡モデルにおいても解析が可能であるということを示した。
2.微小空間内での粒子表面反応過程を評価するためのフローセル設計および実験条件検討を行った。12μLの流路を有するセルを作製し、746 kHzの共振周波数で流路内に一つの定在波が発生できた。超音波定在波による粒子トラップ後、0.5 μL/minで送液を行っても、粒子が安定的にトラップされることがわかった。この条件下で、その場反応を起こし、反応過程を追跡することで、可逆・平衡系反応の計測が可能である。
3.デジタルセンシングに必要なナノバブル(NB)の作製を行った。5%デキストラン、5%牛血清アルブミンを含むPBS溶液を作製し、20 kHz超音波ホーンで処理することで、5, 15, 300 nmのNBを作製した。これらは、さらに条件検討を重ねることで100 nm NBを作製する。
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| 現在までの達成度 (段落) |
翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。
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