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冷温保存における細胞障害に及ぼす能動輸送停止回避の影響と疎水性ガス加圧溶解の効果

研究課題

研究課題/領域番号 19K04222
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
審査区分 小区分19020:熱工学関連
研究機関北里大学

研究代表者

氏平 政伸  北里大学, 医療衛生学部, 教授 (70286392)

研究期間 (年度) 2019-04-01 – 2022-03-31
研究課題ステータス 完了 (2021年度)
配分額 *注記
4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円)
2021年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2020年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2019年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
キーワード冷温保存 / キセノンガス加圧溶解 / 能動輸送停止の回避 / 細胞保護効果 / 電気インピーダンス計測 / 細胞の冷温保存 / 能動輸送停止の有無 / 細胞生存率 / 冷温保存温度 / 能動輸送停止回避 / 電気インピーダンス / 細胞障害低減効果 / 細胞障害 / 疎水性ガス加圧溶解
研究開始時の研究の概要

本課題は,5~10℃の間に存在する能動輸送が働く最低温度で,研究代表者がこれまで究明してきた疎水性ガス加圧溶解による細胞障害低減効果を利用し保存可能期間の延長に繋げようとする研究である.まず,電気インピーダンス周波数計測による細胞試料の冷温保存中の能動輸送停止に伴う電解質バランス喪失の検出方法を確立し,能動輸送停止の境界温度を探し出す.次に,-2~10℃の冷温保存における細胞の能動輸送停止の有無と,細胞障害との関連性と境界より高い温度における疎水性ガス加圧溶解の有効性を究明する.

研究成果の概要

本研究課題の成果として,まず,冷温保存中の能動輸送停止の境界温度を探し出すための電気インピーダンス計測法を確立した.そして,冷温保存におけるラット心臓横紋筋細胞の能動輸送は6℃で停止が回避されることが示唆された.
次に,冷温保存における細胞の能動輸送停止の有無と細胞障害の関連性および境界より高い温度におけるキセノンガスの加圧溶解の有効性を明らかにした.即ち,キセノン加圧溶解が有りの場合は特に4~6℃の範囲において保存時間が24時間までは高い細胞保護効果を示した.更に,能動輸送停止は細胞生存率を大きく低下させる要因となり,その結果として細胞膜の完全性の喪失による絶縁抵抗の低下が示唆された.

研究成果の学術的意義や社会的意義

次の3つの意義を合わせて移植医療や再生医療に貢献できる.
1)冷温保存で用いる能動輸送停止温度(0~4℃)に対しそれを回避した温度(6℃)の保存への有効性が示唆された.保存可能時間の延長に繋がる可能性がある.2)キセノンガス加圧溶解は冷温保存した細胞に高い保護効果を示すことから,保護物質に用いることで保存可能時間の延長に繋がる.また,保存中のみ効果を働かすことが出来,保存後の減圧で自然除去となることが画期的である.3)電気インピーダンス計測による能動輸送停止の判別の機序として細胞膜のダメージによる電気的性質の変化が示唆された.これは細胞生存率にも直結するため,生存率評価への利用にも繋がる.

報告書

(4件)
  • 2021 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2020 実施状況報告書
  • 2019 実施状況報告書
  • 研究成果

    (9件)

すべて 2022 2021 2020 2019

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (8件) (うち国際学会 1件)

  • [雑誌論文] Distinguishing heat-treated dead cells from viable cells using frequency dependence of electrical impedance.2022

    • 著者名/発表者名
      Fujimaki M, Sei R, Yokoseki K, Nebuya S, Sakai R, Yoshida K, Ujihira M
    • 雑誌名

      Bio-Medical Materials and Engineering

      巻: -

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 冷温保存による細胞障害に及ぼす温度と能動輸送停止の影響2021

    • 著者名/発表者名
      藤巻雅博,西室郁哉,吉田和弘,酒井利奈,氏平政伸
    • 学会等名
      日本機械学会 熱工学コンファレンス2021
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] 電気インピーダンスを用いた冷温保存中の単層細胞のリアルタイム測定2021

    • 著者名/発表者名
      藤巻雅博,冨樫竜之介,清来夢,根武谷吾,吉田和弘,酒井利奈,氏平政伸
    • 学会等名
      第60回 日本生体医工学会大会
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] 細胞の冷温保存中の能動輸送停止回避が生存率に及ぼす影響とXeガス加圧溶解による保護効果2020

    • 著者名/発表者名
      藤巻雅博, 高橋淳彦, 清 来夢, 細川慎也, 吉田和弘, 酒井利奈, 氏平政伸
    • 学会等名
      日本機械学会 熱工学コンファレンス 2020
    • 関連する報告書
      2020 実施状況報告書
  • [学会発表] 電気インピーダンス計測を用いた冷温保存細胞のリアルタイム生存率評価の試み2020

    • 著者名/発表者名
      藤巻雅博,清 来夢,根武谷吾,吉田和弘,酒井利奈,氏平政伸
    • 学会等名
      第59回日本生体医工学会大会
    • 関連する報告書
      2020 実施状況報告書
  • [学会発表] 細胞の冷温保存におけるキセノンガス加圧溶解による保護効果に及ぼす温度の影響2019

    • 著者名/発表者名
      藤巻雅博,細川慎也,清来夢,高橋淳彦,吉田和弘,酒井利奈,氏平政伸
    • 学会等名
      日本機械学会 第31回バイオエンジニアリング講演会
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
  • [学会発表] 電気インピーダンス周波数特性を用いた冷温保存細胞の生存評価2019

    • 著者名/発表者名
      清来夢,藤巻雅博,佐藤弘和,根武谷吾,吉田和弘,酒井利奈,氏平政伸
    • 学会等名
      日本機械学会 第31回バイオエンジニアリング講演会
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
  • [学会発表] Evaluation of cell viability during cold storage using electrical impedance measurement.2019

    • 著者名/発表者名
      Sei R, Sato H, Nebuya S, Yoshida K, Sakai R, Ujihira M
    • 学会等名
      The 11th International Biotribology Forum and the 40th Biotribology Symposium.
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] 電気インピーダンス周波数特性計測を用いた細胞の冷温保存における生存評価2019

    • 著者名/発表者名
      清来夢,佐藤弘和,根武谷吾,吉田和弘,酒井利奈,氏平政伸
    • 学会等名
      日本機械学会 福祉工学シンポジウム 2019
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書

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公開日: 2019-04-18   更新日: 2023-01-30  

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