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人工的な複合微生物反応場の構築と難培養性微生物の取得

研究課題

研究課題/領域番号 19K05170
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
審査区分 小区分27040:バイオ機能応用およびバイオプロセス工学関連
研究機関大阪市立大学

研究代表者

尾島 由紘  大阪市立大学, 大学院工学研究科, 准教授 (20546957)

研究期間 (年度) 2019-04-01 – 2022-03-31
研究課題ステータス 完了 (2021年度)
配分額 *注記
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2021年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2020年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2019年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
キーワード大腸菌 / フロック / グリセロール / ポリオール / degP / OMV / 難培養性微生物 / 複合微生物化 / アンプリコンシーケンス解析 / 活性汚泥 / OD1 / 短鎖ポリオール / 外膜小胞 / エチレングリコール / 機能化
研究開始時の研究の概要

本研究では,研究期間に下記の2点に焦点を当て,フロック形成機構の解明と応用展開を並行して進め,基礎的ならびに応用的知見を得る.
Ⅰ. フロック形成機構ならびにポリオールによる形成促進機構の解明(平成31-32年度)
Ⅱ. 大腸菌フロックの複合微生物化と難培養性微生物の取得 (平成31-33年度)
ポリオール添加によってフロック形成が促進するという新たな結果に基づき,大腸菌の自発的なフロック形成機構の更なる解明を行うことと,フロックの人工的な機能化に基づき複合微生物反応場を構築することで,最終的に難培養性微生物の共生培養による取得を目指す.

研究成果の概要

ポリオール添加により大腸菌のフロック形成が促進する機構の解明と,フロックを足場とした複合微生物化ならびに難培養性微生物の可培養化を目的として検討した.促進機構に関しては,培地の粘度変化や忌避応答は関与しせず,ポリオール添加により外膜小胞の生産が増加し,フロック内の生細胞数が大きく減少することから,膜ストレスを介して細胞に損傷が与えられ促進すると結論付けた.さらに,フロック構造を強化するBacillus licheniformis RK14株や蘇生因子を産生するMicrococcus luteusとの複合微生物化に成功したが,共培養により難培養性微生物を取得することはできず課題として残った.

研究成果の学術的意義や社会的意義

本研究では,ポリオール類の添加が大腸菌の細胞に物理的なダメージを与え,外膜小胞と呼ばれる細胞外小胞の生産促進を介して,フロック形成を促進させることを明らかにした.ポリオールが外膜小胞現象を介してフロック形成に関連することを明らかにしたのは本研究が初めてであり,学術的に意義があるものである.また,難培養性微生物の可培養化は達成できなかったが,複合微生物化によりフロック構造の強化や機能化に成功した.このようなボトムアップアプローチにより,微生物複合系を構築する内容はこれまでに例が少ないことから,微生物が関与する分野・産業への波及効果は大きく,得られた研究成果の社会的意義は大きい.

報告書

(4件)
  • 2021 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2020 実施状況報告書
  • 2019 実施状況報告書
  • 研究成果

    (14件)

すべて 2021 2020 2019 その他

すべて 雑誌論文 (4件) (うち査読あり 2件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (8件) (うち国際学会 3件、 招待講演 1件) 備考 (2件)

  • [雑誌論文] Aberrant membrane structures in hypervesiculating Escherichia coli strain ΔmlaEΔnlpI visualized by electron microscopy2021

    • 著者名/発表者名
      Y. Ojima, T. Sawabe, M. Nakagawa, YO. Tahara, M. Miyata, and M. Azuma
    • 雑誌名

      Frontiers in Microbiology

      巻: 12 ページ: 706525-706525

    • DOI

      10.3389/fmicb.2021.706525

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] 外膜小胞に着目した大腸菌のタンパク質分泌生産の試み2021

    • 著者名/発表者名
      尾島 由紘、 東 雅之
    • 雑誌名

      化学工業

      巻: 72(5) ページ: 319-324

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [雑誌論文] 大腸菌の外膜小胞高生産株の作製とタンパク質分泌生産等への利用2021

    • 著者名/発表者名
      尾島 由紘,東 雅之
    • 雑誌名

      酵素工学ニュース

      巻: 86 ページ: 32-35

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [雑誌論文] Enhanced floc formation by degP-deficient Escherichia coli cells in the presence of glycerol2021

    • 著者名/発表者名
      Yoshihiro Ojima, Hiroaki Honma, Mio Otsuka, Satsuki Matano, Masayuki Azuma
    • 雑誌名

      Journal of Bioscience and Bioengineering

      巻: 131 号: 1 ページ: 33-38

    • DOI

      10.1016/j.jbiosc.2020.09.001

    • NAID

      120007189880

    • URL

      https://ocu-omu.repo.nii.ac.jp/records/2019953

    • 関連する報告書
      2020 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] Aberrant membrane structures in hypervesiculating Escherichia coli strain ΔmlaEΔnlpI visualized by quick-freeze deep-etch electron microscopy2021

    • 著者名/発表者名
      Yoshihiro Ojima, Tomomi Sawabe, Mao Nakagawa, Yuhei O. Tahara, Makoto Miyata, Masayuki Azuma
    • 学会等名
      EMBO Biologists Workshop Bacterial membrane vesicles
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] 電子顕微鏡により可視化された大腸菌の外膜小胞高生産株ΔmlaEΔnlpIの異常な膜構造2021

    • 著者名/発表者名
      尾島由紘,澤邊朋美,中川真緒,田原悠平,宮田真人,東雅之
    • 学会等名
      第73回日本生物工学会大会
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] 土壌より単離したBacillus licheniformis RK14株の自発的な凝集体形成2021

    • 著者名/発表者名
      俣野沙月,尾島由紘,東雅之
    • 学会等名
      第73回日本生物工学会大会
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] 大腸菌フロックの複合微生物化の検討2020

    • 著者名/発表者名
      俣野 沙月、大塚 未音、本間 裕章、尾島 由紘、東 雅之
    • 学会等名
      日本生物工学会関西支部 2020年度学生オンライン発表会
    • 関連する報告書
      2020 実施状況報告書
  • [学会発表] 大腸菌の外膜小胞高生産株の生産促進機構2020

    • 著者名/発表者名
      尾島 由紘、東雅之
    • 学会等名
      生物工学Webシンポジウム2020(日本生物工学会)
    • 関連する報告書
      2020 実施状況報告書
  • [学会発表] 外膜小胞に誘発される大腸菌フロックのグリセロールによる形成促進機構の解析2019

    • 著者名/発表者名
      本間裕章, 尾島由紘, 東雅之
    • 学会等名
      膜シンポジウム2019
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
  • [学会発表] Outer membrane vesicles of Gram-negative bacteria and its application to microbial biotechnology2019

    • 著者名/発表者名
      Yoshihiro Ojima, Masayuki Azuma
    • 学会等名
      ICGEB-IMBT Workshop2019
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Efficient formation of Escherichia coli flocs by glycerol addition2019

    • 著者名/発表者名
      Hiroaki Honma, Mio Otsuka, Yoshihiro Ojima, Masayuki Azuma
    • 学会等名
      18th Asian Pacific Confederation of Chemical Engineering Congress (APCChE 2019)
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [備考] 研究者総覧

    • URL

      https://research-soran17.osaka-cu.ac.jp/html/100000485_ja.html

    • 関連する報告書
      2020 実施状況報告書
  • [備考] 研究室ホームページ

    • URL

      https://www.bioa.eng.osaka-cu.ac.jp/bie/index.html

    • 関連する報告書
      2020 実施状況報告書

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公開日: 2019-04-18   更新日: 2023-01-30  

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