イヌ乳腺腫瘍におけるFGFRの発現解析

• 研究課題/領域番号: 19K06408
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 審査区分: 小区分42020:獣医学関連
• 研究機関: 日本獣医生命科学大学
• 研究代表者: 山本 昌美 日本獣医生命科学大学, 獣医学部, 准教授 (30530026)
• 研究期間 (年度): 2019-04-01 – 2024-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2023年度)
• 配分額: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円); 2021年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2020年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2019年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
• キーワード: Dog / Mammary tumor / FGFR / Cell line / Real-time RT-PCR / immunohistochemistry / Cancer / IHC / TMA / イヌ / 乳腺腫瘍 / 遺伝子発現解析 / 分子標的薬

研究開始時の研究の概要

近年ヒト腫瘍で高い発現が報告されている線維芽細胞増殖因子受容体（Fibroblast growth factor receptor：FGFR）の発現を、イヌで発生の多い乳腺腫瘍において検索し、その発現と悪性度の関連を検索する。
検索対象としてイヌの乳腺腫瘍組織と乳腺細胞株を用いる。各FGFRの発現と悪性度との関連を調べ、悪性度をはかるマーカーとなりうるかを検討する。またヒトで報告のある遺伝子変異箇所などの検索をおこない、遺伝子変異の有無や発現の変化の腫瘍細胞の特性への影響を調べる。

研究実績の概要

最終年度となる今年度は、組織マイクロアレイ(TMA)を用いた線維芽細胞増殖因子受容体（Fibroblast growth factor receptors：FGFR ）1-4抗体による免疫組織化学染色について、これまで蓄積してきた症例について解析をおこなった。正常乳腺組織では構成する２つの上皮細胞のうちおもに腺上皮細胞での発現が認められ、一部の筋上皮細胞においても発現が確認された。乳腺腫瘍における発現では、同様におもに腺上皮細胞由来腫瘍細胞での発現が認められた。今回の検索範囲では腫瘍の病理診断分類による悪性度と染色性について、明らかな関係は確認できず用いる抗体の選別も含めての検討がさらに必要であると考えられた。
また、real-time RT-PCRによるイヌFGFR 1-4に対するTaqman Probeを用いたイヌ乳腺腫瘍およびその転移巣における発現と、同組織のホルマリン固定パラフィン包埋組織におけるFGFR 1-4抗体による免疫組織化学染色による発現を比較解析した。両者の解析方法ともに発現は確認できたが、その増減は一致しておらず、抗体の影響に加え、イヌの乳腺腫瘍の構成成分が多彩であることが影響していると考えられた。この差を埋めるためには乳腺腫瘍と正常乳腺の凍結包埋組織を用いた解析が必要となるため、今後の研究材料として継続してさらに症例の集積を進める。
今回の研究期間において、FGFR 1-4に対するTaqman ProbeによるRNA発現解析の有効性と、細胞株よりも乳腺腫瘍での高い発現が確認できたことから、周囲組織も含めた生体内で使用される分子標的マーカーとしての可能性が確認できたと考えている。

研究成果

• [雑誌論文] The unfolded protein response-glutathione metabolism axis: A novel target of a cycloruthenated complexes bypassing tumor resistance mechanisms (2024)
  • 著者名/発表者名: Riegel G, Orvain C, Recberlik S, Spaety ME, Poschet G, Venkatasamy A, Yamamoto M, Nomura S, Tsukamoto T, Masson M, Gross I, Le Lagadec R, Mellitzer G, Gaiddon C.
  • 雑誌名: Cancer Lett. 巻: 585 ページ: 216671-216671
  • DOI: 10.1016/j.canlet.2024.216671
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Apocrine carcinoma-and-malignant myoepithelioma in a dog: a case of simultaneous malignant progression of both luminal epithelium and myoepithelium (2023)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto Kana、Kishimoto Takuya Evan、Yamamoto Masami、Michishita Masaki、Takahashi Kimimasa、Yoshimura Hisashi
  • 雑誌名: Journal of Veterinary Diagnostic Investigation 巻: 35 号: 6 ページ: 789-794
  • DOI: 10.1177/10406387231202529
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Infective endocarditis with systemic bacterial embolism caused by Staphylococcus aureus in a free-ranging Amami rabbit (Pentalagus furnessi) (2023)
  • 著者名/発表者名: Masaki Konnai, Masami Yamamoto, Keiko Ito, Hanae Yamabe, Takuya E. Kishimoto, Hiroshi Aoki, Yukino Machida, Masaki Michishita, Makoto Haritani, Hisashi Yoshimura
  • 雑誌名: Journal of Comparative Pathology 巻: 201 ページ: 27-32
  • DOI: 10.1016/j.jcpa.2022.12.008
  • 査読あり
• [雑誌論文] Histological, immunohistochemical and ultrastructural features of polyglucosan bodies in uterine smooth muscle of pet rabbits (Oryctolagus cuniculus) (2023)
  • 著者名/発表者名: Hisashi Yoshimura, Kazushi Torikai, Anna Takahashi, Masaki Michishita, Takuya E Kishimoto, Masami Yamamoto, Makoto Haritani, Kimimasa Takahashi, Shinji Kamiya
  • 雑誌名: Journal of Comparative Pathology 巻: 201 ページ: 23-27
  • DOI: 10.1016/j.jcpa.2022.12.009
  • 査読あり
• [雑誌論文] Multiple cystic sphere formation from PK-8 cells in three-dimensional culture (2022)
  • 著者名/発表者名: Yuuki Shichi, Fujiya Gomi, Yoshibumi Ueda, Keisuke Nonaka, Fumio Hasegawa, Yasuko Hasegawa, Nae Hinata, Hisashi Yoshimura, Masami Yamamoto, Kimimasa Takahashi, Tomio Arai, Toshiyuki Ishiwata
  • 雑誌名: Biochemistry and Biophysics Reports 巻: 32 ページ: 101339-101339
  • DOI: 10.1016/j.bbrep.2022.101339
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Adenomatous Hyperplasia of Bowman's Capsule Epithelium in a Dog with Metastatic Nasal and Hepatic Neuroendocrine Carcinoma (2022)
  • 著者名/発表者名: Yukino Machida, Marika Higo, So Doge, Tomokazu Nagashima, Takuya E. Kishimoto, Hisashi Yoshimura, Masami Yamamoto, Kazuki Okada, Naoko Yayoshi, Hitoshi Hatakeyama, Masaki Michishita
  • 雑誌名: Journal of Comparative Pathology 巻: 197 ページ: 19-22
  • DOI: 10.1016/j.jcpa.2022.06.005
  • 査読あり
• [雑誌論文] In vitro anticancer effects of alpelisib against PIK3CA-mutated canine hemangiosarcoma cell lines (2022)
  • 著者名/発表者名: Maeda M, Ochiai K, Michishita M, Morimatsu M, Sakai H, Kinoshita N, Sakaue M, Onozawa E, Azakami D, Yamamoto M, Ishioka K, Sadahira T, Watanabe M, Tanaka Y.
  • 雑誌名: Oncology Reports 巻: 47 号: 4 ページ: 84-84
  • DOI: 10.3892/or.2022.8295
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Loss of YTHDF1 in gastric tumors restores sensitivity to antitumor immunity by recruiting mature dendritic cells (2022)
  • 著者名/発表者名: Bai Xiaowu、Wong Chi Chun、Pan Yasi、Chen Huarong、Liu Weixin、Zhai Jianning、Kang Wei、Shi Yu、Yamamoto Masami、Tsukamoto Tetsuya、Nomura Sachiyo、Chiu Philip、Yu Jun、Kwok-wai Ng Enders
  • 雑誌名: Journal for ImmunoTherapy of Cancer 巻: 10 号: 2 ページ: e003663-e003663
  • DOI: 10.1136/jitc-2021-003663
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Mouse gastric epithelial cells resist CagA delivery by the Helicobacter pylori Type IV secretion system (2022)
  • 著者名/発表者名: Shrestha R, Murata-Kamiya N, Imai S, Yamamoto M, Tsukamoto T, Nomura S, Hatakeyama M
  • 雑誌名: International Journal of Molecular Science 巻: 23 号: 5 ページ: 2492-2492
  • DOI: 10.3390/ijms23052492
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Involvement of Nestin in the Progression of Canine Mammary Carcinoma. (2021)
  • 著者名/発表者名: Yoshimura H, Moriya M, Yoshida A, Yamamoto M, Machida Y, Ochiai K, Michishita M, Nakagawa T, Matsuda Y, Takahashi K, Kamiya S, Ishiwata T
  • 雑誌名: Vet Pathol. 巻: 58 号: 5 ページ: 994-1003
  • DOI: 10.1177/03009858211018656
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] FGFR4 Inhibitor BLU9931 Attenuates Pancreatic Cancer Cell Proliferation and Invasion While Inducing Senescence: Evidence for Senolytic Therapy Potential in Pancreatic Cancer (2020)
  • 著者名/発表者名: Sasaki N, Gomi F, Yoshimura H, Yamamoto M, Matsuda Y, Michishita M, Hatakeyama H, Kawano Y, Toyoda M, Korc M, Ishiwata T.
  • 雑誌名: Cancers (Basel) 巻: 12 号: 10 ページ: 2976-2976
  • DOI: 10.3390/cancers12102976
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] An Oncogenic Alteration Creates a Microenvironment that Promotes Tumor Progression by Conferring a Metabolic Advantage to Regulatory T Cells (2020)
  • 著者名/発表者名: Shogo Kumagai, Yosuke Togashi, Chika Sakai, Akihito Kawazoe, Masahito Kawazu, Toshihide Ueno, Eiichi Sato, Takeshi Kuwata, Takahiro Kinoshita, Masami Yamamoto, Sachiyo Nomura, Tetsuya Tsukamoto, Hiroyuki Mano, Kohei Shitara, Hiroyoshi Nishikawa
  • 雑誌名: Immunity 巻: 14 号: 1 ページ: 187-203
  • DOI: 10.1016/j.immuni.2020.06.016
  • NAID: 120006952281
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Established fibrous peritoneal metastasis in an immunocompetent mouse model similar to clinical immune microenvironment of gastric cancer (2020)
  • 著者名/発表者名: Daisuke Fujimori, Jun Kinoshita, Takahisa Yamaguchi, Yusuke Nakamura, Katsuya Gunjigake, Takashi Ohama, Koichi Sato, Masami Yamamoto, Tetsuya Tsukamoto, Sachiyo Nomura, Tetsuo Ohta, Sachio Fushida
  • 雑誌名: BMC Cancer 巻: 20 号: 1 ページ: 1014-1014
  • DOI: 10.1186/s12885-020-07477-x
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [学会発表] 犬の乳腺腫瘍における長鎖ノンコーディングRNA H19 の発現の検討 (2023)
  • 著者名/発表者名: 松本佳奈, 吉村久志, 山本昌美
  • 学会等名: 日本動物看護学会第32 回大会
• [学会発表] 胃癌腹膜播種における胃癌細胞―血小板相互作用の役割 (2023)
  • 著者名/発表者名: 仲山孝, 古屋信二, 齊藤亮, 高橋和徳, 滝口光一, 芦沢直樹, 庄田勝俊, 中山裕子, 山本昌美, 野村幸世, 塚本徹哉, 市川大輔
  • 学会等名: 第82回日本癌学会学術総会
• [学会発表] 胃癌腹膜播種形成における血小板の役割 (2022)
  • 著者名/発表者名: 仲山 孝, 古屋 信二, 高橋 和徳, 山本 淳史, 滝口 光一, 芦沢 直樹, 庄田 勝俊, 中山 裕子, 山本 昌美, 野村 幸世, 塚本 徹哉
  • 学会等名: 第81回 日本癌学会学術総会
• [学会発表] カピバラ（Hydrochoerus hydrochaeris ）における消化器型リンパ腫3例 (2022)
  • 著者名/発表者名: 上田 海那人, 原藤 芽衣, 岸本 拓也, 吉村 久志, 山本 昌美
  • 学会等名: 第28回日本野生動物医学会大会
• [学会発表] イヌ乳腺複合癌の腺上皮細胞由来培養細胞株の樹立とその特徴付け (2022)
  • 著者名/発表者名: 松本佳奈, 渡邉由香, 岸本拓也, 吉村久志, 山本昌美
  • 学会等名: 第31回日本動物看護学会大会
• [学会発表] 犬の乳腺腫瘍におけるnestinの発現と悪性挙動への関与 (2021)
  • 著者名/発表者名: 吉村 久志, 山本 昌美, 岸本 拓也, 町田 雪乃, 道下 正貴, 落合 和彦, 中川 貴之, 松田 陽子, 高橋 公正, 石渡 俊行
  • 学会等名: 第164回日本獣医学会学術集会
• [学会発表] イヌの乳腺癌細胞における長鎖non-coding RNA H19の発現 (2020)
  • 著者名/発表者名: 加藤瑠惟、 渡邉由香、吉村久志、 山本昌美、播谷亮、中川貴之、松田陽子、石渡俊行、神谷新司
  • 学会等名: 第7回日本獣医病理学専門家協会学術集会
• [学会発表] マウス胃癌細胞株の樹立とそのFGFR4発現の解析 (2019)
  • 著者名/発表者名: 山本昌美、野村幸世、立松正衞、塚本徹哉
  • 学会等名: 第２回ニチジュウシンポジウム2020