| 研究課題/領域番号 |
19K08359
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分52050:胎児医学および小児成育学関連
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| 研究機関 | 国立研究開発法人国立成育医療研究センター |
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研究代表者 |
内木 康博 国立研究開発法人国立成育医療研究センター, 小児内科系専門診療部, 医師 (20470007)
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| 研究分担者 |
勝又 規行 国立研究開発法人国立成育医療研究センター, 分子内分泌研究部, 室長 (10260340)
深見 真紀 国立研究開発法人国立成育医療研究センター, 分子内分泌研究部, 部長 (40265872)
阿久津 英憲 国立研究開発法人国立成育医療研究センター, 生殖医療研究部, 部長 (50347225)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2021年度)
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| 配分額 *注記 |
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2021年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2020年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2019年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
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| キーワード | 先天性副腎皮質過形成症 / 遺伝子治療 / アデノウィルス随伴ウィルスベクター / 21水酸化酵素欠損症 / 11β水酸化酵素欠損症 / iPS細胞 / 副腎皮質過形成症 / SF1 / CYP21A2 / CYP11B1 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
本研究目的は先天性副腎皮質過形成において遺伝子治療モデルを開発することである。これまでの研究機関において疾患モデルマウスにおいて有効性を確認できたため、今研究期間においてはヒト副腎皮質過形成症患者の線維芽細胞から疾患iPS細胞を樹立してステロイド合成細胞へ分化させ、それにAAVベクターを用いた欠損酵素の遺伝子導入で酵素活性が獲得できるか否かを確認するための実験を下記の概要で計画する。
1.ヒト副腎皮質過形成症患者由来のiPS細胞の作成
2.iPS細胞のステロイド産生細胞への分化誘導
3.AAVベクターを用いた遺伝子導入
4.遺伝子導入後のiPS細胞における酵素活性獲得の評価
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| 研究成果の概要 |
アデノウィルス随伴ウィルスベクター(AAV)を用いて21水酸化酵素欠損症(21OHD)モデルマウスでは血清型2型AAV（AAV2)の筋肉内、11β水酸化酵素欠損症(11βOHD)モデルマウスでは血清型9型AAV（AAV9)の副腎に遺伝子導入行い酵素活性を獲得しえたが患者線維芽細胞に対するAAV2による遺伝子導入は21OHDでは有効であったが11βOHDでは無効であった。11βOHD患者由来のiPS細胞に対しステロイド産生細胞へ分化させたうえでAAV9をもちいてCYP11B１遺伝子を導入し酵素活性が獲得できた。このことは副腎皮質過形成の欠損酵素に応じた遺伝子治療戦略の可能性を示した。
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| 研究成果の学術的意義や社会的意義 |
我々はこれまでの研究期間において先天性副腎皮質過形成症(CAH）の遺伝子治療モデルを開発してきた。本研究期間において疾患モデルマウスと患者由来のiPS細胞を用いて、欠損酵素によって遺伝子治療の対象組織を変える必要があることを示した。このことはCAHの遺伝子治療の臨床応用において欠損酵素に応じた遺伝子治療戦略の必要性を示し、より効果的で安全な遺伝子治療の開発をさらに推し進めることとなった。CAHのような単一遺伝子疾患に対する遺伝子治療において病型によって遺伝子治療の対象となる組織を変える必要性を示したことは今後多くの代謝性疾患などの単一遺伝子疾患に対する遺伝子治療開発に大きな知見となる。
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