胆道癌におけるCK2阻害薬感受性マーカーの同定と薬剤抵抗性機序の解明

• 研究課題/領域番号: 19K08449
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 審査区分: 小区分53010:消化器内科学関連
• 研究機関: 名古屋市立大学
• 研究代表者: 宮部 勝之 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 研究員 (00543985)
• 研究分担者: 吉田 道弘 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 講師 (20636328)
• 研究期間 (年度): 2019-04-01 – 2023-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2022年度)
• 配分額: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2021年度: 520千円 (直接経費: 400千円、間接経費: 120千円); 2020年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2019年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
• キーワード: 胆管癌 / Silmitasertib / CK2阻害薬 / 薬剤抵抗性 / 胆道癌 / CK2 inhibitor / drug resistance

研究開始時の研究の概要

Silmitasertib抵抗性細胞株を作成するとともに、xenograftを使用しRNA sequencingによる薬剤抵抗性遺伝子変異の候補を検出、実際に薬剤抵抗性細胞株から候補遺伝子異常除去後に薬剤感受性が回復するかを検証することで、薬剤抵抗性に関与する遺伝子異常を同定し、関連する薬剤抵抗性因子の存在確認を検体上で行う。次に、胆管癌細胞株に薬剤抵抗性関与遺伝子のクローニングを行うと共にin vitro、in vivoでの薬剤抵抗性の評価も行う。同定された薬剤抵抗性に対する分子標的治療薬追加投与の評価も行い、胆道癌の病理組織標本を用いて、薬剤抵抗性遺伝子発現の臨床検体を用いた確認を行う。

研究成果の概要

SilmitasertibおよびGEM+CDDPを投与されたマウス、GEM+CDDPを投与されたマウス、コントロールのマウスより得られたxenograftからDNAを抽出しExome sequenceを行い、遺伝子変異などの違いを調べたところ、GEM+CDDPとGEM+CDDP+Silmitasertibの比較においてPGLYRP2、PCDH86などの遺伝子増幅も明らかにされた。in vitroの実験を行うため、薬剤耐性株の作成を行っていたがうまくいかず、in vivoでの検体から得られたデータをもとに解析を行い、薬剤耐性機序を明らかにしていくよう、研究を継続していく。

研究成果の学術的意義や社会的意義

CK2阻害剤Silmitasertibの薬剤抵抗性獲得に寄与する機序を検討した。すでにSilmitasertibを投与されたサンプルおよび投与されていないサンプルとの比較をすることにより、薬剤耐性に関わる遺伝子を探り出すことができた。Silmitasertibは近年胆管癌の治療に有望な分子標的薬として注目されており、一部の胆管癌患者の予後を延長するものと期待されている。その薬剤耐性機序を探るうえでのヒントを見つけ出すことにより、本阻害剤が実際の患者に投与され、耐性となった際の次の治療戦略を考える上で、本研究が重要な意義を果たすものと思われる。

研究成果

• [国際共同研究] Mayo Clinic(米国)
• [国際共同研究] メイヨークリニック(米国)
• [国際共同研究] Mayo Clinic(米国)
• [雑誌論文] Relevance of gene mutations and methylation to the growth of pancreatic intraductal papillary mucinous neoplasms based on pyrosequencing. (2022)
  • 著者名/発表者名: Asano, G., Miyabe, K., Kato, H., Yoshida, M., Sawada, T., Okamoto, Y., Sahashi, H., Atsuta, N., Kachi, K., Kato, A., Jinno, N., Natsume, M., Hori, Y., Naitoh, I., Hayashi, K., Matsuo, Y., Takahashi, S., Suzuki, H., Kataoka, H.
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 12 号: 1 ページ: 419-419
  • DOI: 10.1038/s41598-021-04335-z
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] IgG4-related Sclerosing Cholangitis Complicated with Cholangiocarcinoma and Detected by Forkhead Box P3 Immunohistochemical Staining (2021)
  • 著者名/発表者名: Toyohara Tadashi、Nakazawa Takahiro、Zakharia Kais、Shimizu Shuya、Miyabe Katsuyuki、Harada Kenichi、Notohara Kenji、Yamada Tomohiro、Hayashi Katsumi、Naitoh Itaru、Hayashi Kazuki、Kataoka Hiromi
  • 雑誌名: Internal Medicine 巻: 60 号: 6 ページ: 859-866
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.5920-20
  • NAID: 130007998464
  • ISSN: 0918-2918, 1349-7235
  • 年月日: 2021-03-15
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Early Detection of High-grade Biliary Intraepithelial Neoplasia (BilIN-3) in the Cystic Duct Visualized by SpyGlass DS Cholangioscopy (2021)
  • 著者名/発表者名: Miyabe Katsuyuki、Notohara Kenji、Asano Go、Kato Akihisa、Jinno Naruomi、Natsume Makoto、Hori Yasuki、Yoshida Michihiro、Naitoh Itaru、Tsuboi Ken、Matsuo Yoichi、Ohara Hirotaka、Hayashi Kazuki、Kataoka Hiromi
  • 雑誌名: Internal Medicine 巻: 60 号: 1 ページ: 47-52
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.5072-20
  • NAID: 130007965395
  • ISSN: 0918-2918, 1349-7235
  • 年月日: 2021-01-01
• [雑誌論文] Over-the-scope-clip treatment for perforation of the duodenum after endoscopic papillectomy (2021)
  • 著者名/発表者名: Miyabe Katsuyuki、Hori Yasuki、Yoshida Michihiro、Naitoh Itaru、Hayashi Kazuki
  • 雑誌名: VideoGIE 巻: 6 号: 2 ページ: 101-104
  • DOI: 10.1016/j.vgie.2020.10.001
• [雑誌論文] Effect of Statins on the Risk of Extrahepatic Cholangiocarcinoma (2020)
  • 著者名/発表者名: Lavu Sravanthi、Therneau Terry M.、Harmsen William S.、Mara Kristin C.、Wongjarupong Nicha、Hassan Mohamed、Ali Hamdi A.、Antwi Samuel、Giama Nasra H.、Miyabe Katsuyuki、Roberts Lewis R.
  • 雑誌名: Hepatology 巻: - 号: 4 ページ: 1298-1309
  • DOI: 10.1002/hep.31146
  • 査読あり
• [雑誌論文] Novel technique for intraductal cholangioscopy-assisted biliary drainage with over-the-wire microcatheter manipulation. (2019)
  • 著者名/発表者名: Yoshida M, Kato A, Hayashi K, Naitoh I, Miyabe K, Hori Y, Asano G.
  • 雑誌名: Endoscopy 巻: 51 号: 12 ページ: 398-399
  • DOI: 10.1055/a-0962-9628
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Predictive factors for the mortality of acute pancreatitis on admission. (2019)
  • 著者名/発表者名: Jinno N, Hori Y, Naitoh I, Miyabe K, Yoshida M, Natsume M, Kato A, Asano G, Sano H, Hayashi K.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 14 号: 8 ページ: e0221468-e0221468
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0221468
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Relevance of Gene Mutations and Methylation to the Growth of IPMN Based on Pyrosequencing (2022)
  • 著者名/発表者名: Go Asano
  • 学会等名: 第53回日本膵臓学会・第26回国際膵臓学会
  • 国際学会
• [学会発表] The role of the biliary and gut microbiome in the progression of cholangiocarcinoma and primary sclerosing cholangitis (2019)
  • 著者名/発表者名: Katsuyuki Miyabe, Vinay Chandrasekhara, Nicha Wongjarupong, Jun Chen, Stephen Johnson, Nicholas Chia, Marina Walther-Antonio, Gregory J. Gores, Mark D. Topazian, Purma C. Kashyap, Lewis R. Roberts, et al.
  • 学会等名: American College of Gastoenterology Annual Meeting 2019
  • 国際学会