定量位相顕微鏡技術を用いた新規循環腫瘍細胞検出技術の臨床応用

• 研究課題/領域番号: 19K09167
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 審査区分: 小区分55020:消化器外科学関連
• 研究機関: 浜松医科大学
• 研究代表者: 菊池 寛利 浜松医科大学, 医学部, 准教授 (70397389)
• 研究分担者: 竹内 裕也 浜松医科大学, 医学部, 教授 (20265838)
• 研究期間 (年度): 2019-04-01 – 2023-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2022年度)
• 配分額: 4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円); 2021年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2020年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2019年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
• キーワード: 循環腫瘍細胞 / 定量位相顕微鏡 / negative selection / 人工知能 / 画像認証 / 3次元 / イメージングフローサイトメーター

研究開始時の研究の概要

血中循環腫瘍細胞（CTC）は腫瘍から遊離し血中へ浸潤した癌細胞であり癌の転移に関わるとされるが、末梢血液中にわずかしか存在せず検出が困難である。また、既存のCTC検出方法の多くは上皮系細胞表面マーカーに依存しているため、上皮系マーカーが消失した浸潤性が強く悪性度の高いCTCを検出できない点が問題となっている。本研究は、非染色下に数ナノメートルの解像度で細胞を観察することができる定量位相顕微鏡と人工知能を用いた画像診断技術を利用し、表面マーカーに依存しない新たなCTC選別法の開発および臨床応用を目指す。

研究成果の概要

定量位相顕微鏡と人工知能(AI)を用いた画像診断による全く新しい血中循環腫瘍細胞検出技術として、2次元像位相イメージングフローサイトメーター(2D-IFCM)と3D-IFCMを組み合わせた、ハイブリッド型IFCMの開発を行った。健常人および進行癌患者さんの末梢血液から抽出した有核細胞をハイブリッド型IFCM試作機を用いて観察し、得られた3D画像のAI解析を行い、担癌患者と健常人との間で比率の異なる細胞分画が存在することを見出した。

研究成果の学術的意義や社会的意義

血中循環腫瘍細胞（CTC）は、腫瘍から遊離し血中へ浸潤した癌細胞で転移に関わるとされるが、その検出は困難であり、既存の方法では検出できないCTC分画が存在することも明らかなとなっている。本研究で開発したイメージングフローサイトメーターを用いて、末梢血中の臨床上重要なCTCを漏れなく同定できれば、新たな癌の診断法となり得る。低侵襲で繰り返し検査を行うことが可能であり、癌の早期発見や癌治療の個別化などの実現が期待される。

研究成果

• [雑誌論文] Artificial intelligence-based classification of peripheral blood nucleated cells using label-free imaging flow cytometry (2022)
  • 著者名/発表者名: Hirotsu Amane, Kikuchi Hirotoshi, Yamada Hidenao, Ozaki Yusuke, Haneda Ryoma, Kawata Sanshiro, Murakami Tomohiro, Matsumoto Tomohiro, Hiramatsu Yoshihiro, Kamiya Kinji, Yamashita Daisuke, Fujimori Yuki, Ueda Yukio, Okazaki Shigetoshi, Kitagawa Masatoshi, Konno Hiroyuki, Takeuchi Hiroya.
  • 雑誌名: Lab on a Chip 巻: 22 号: 18 ページ: 3464-3474
  • DOI: 10.1039/d2lc00166g
  • 査読あり
• [雑誌論文] Can Liquid Biopsy be Used to Explore Future Precision Medicine for Solid Tumors? (2021)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi H, Takeuchi H
  • 雑誌名: Annals of Surgical Oncology 巻: 28 号: 13 ページ: 8022-8024
  • DOI: 10.1245/s10434-021-10873-7
  • 査読あり
• [雑誌論文] Label-free imaging flow cytometer for analyzing large cell populations by line-field quantitative phase microscopy with digital refocusing (2020)
  • 著者名/発表者名: Yamada Hidenao、Hirotsu Amane、Yamashita Daisuke、Yasuhiko Osamu、Yamauchi Toyohiko、Kayou Tsukasa、Suzuki Hiroaki、Okazaki Shigetoshi、Kikuchi Hirotoshi、Takeuchi Hiroya、Ueda Yukio
  • 雑誌名: Biomedical Optics Express 巻: 11 号: 4 ページ: 2213-2213
  • DOI: 10.1364/boe.389435
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] 産学連携による新規循環腫瘍細胞検出機器の研究開発 (2021)
  • 著者名/発表者名: 菊池寛利、廣津周、羽田綾馬、山田秀直、山下大輔、岡崎茂俊、曽根田亘、川田三四郎、村上智洋、松本知拓、 平松良浩、神谷欣志、森田剛文、今野弘之、竹内裕也
  • 学会等名: 第121回日本外科学会定期学術集会
• [学会発表] 位相イメージングフローサイトメーターを用いたCTCの非標識下AI検出技術 (2021)
  • 著者名/発表者名: 廣津周、菊池寛利、山田秀直、山下大輔、岡崎茂俊、羽田稜馬、曽根田亘、川田三四郎、村上智 洋、松本知拓、平松良浩、神谷欣志、森田剛文、 今野弘之、竹内裕也
  • 学会等名: 第121回日本外科学会定期学術集会
• [学会発表] 定量位相顕微鏡技術を用いた新規循環腫瘍細胞検出技術 (2021)
  • 著者名/発表者名: 菊池寛利、廣津周、羽田綾馬、山田秀直、山下大輔、岡崎茂俊、曽根田亘、川田三四郎、村上智洋、松本知拓、平松良浩、神谷欣志、森田剛文、今野弘之、竹内裕也
  • 学会等名: 第29回日本がん転移学会学術集会
• [学会発表] 細胞内構造の深層学習とレディオミクスに基づく癌細胞のラベルフリー分類 (2021)
  • 著者名/発表者名: 大手希望，橋本二三生，山田秀直，山内豊彦，羽田綾馬，廣津周，菊池寛利，岡崎茂俊，竹内裕也，上田之雄
  • 学会等名: 日本医用画像工学会大会
• [学会発表] 三次元像フローサイトメトリーを用いた非標識下CTC 検出法 (2020)
  • 著者名/発表者名: 廣津周、菊池寛利、山田秀直、山下大輔、 岡崎茂俊、関本晃、曽根田亘、川田三四郎、 松本知拓、平松良浩、神谷欣志、森田剛文、 坂口孝宣、今野弘之、竹内裕也
  • 学会等名: 第120回日本外科学会定期学術集会
• [学会発表] 定量位相顕微鏡を用いた血中循環腫瘍細胞のAI検出技術 (2020)
  • 著者名/発表者名: 廣津周、菊池寛利、羽田綾馬、曽根田亘、川田三四郎、 松本知拓、平松良浩、神谷欣志、森田剛文、山田秀直、山下大輔、 岡崎茂俊、今野弘之、竹内裕也
  • 学会等名: 第58回日本癌治療学会学術集会
• [学会発表] 定量位相顕微鏡を用いた非標識下CTC検出技術の臨床応用 (2020)
  • 著者名/発表者名: 廣津周、菊池寛利、山田秀直、山下大輔、 岡崎茂俊、平松良浩、神谷欣志、坂口孝宣、今野弘之、竹内裕也
  • 学会等名: 第75回日本消化器外科学会総会
• [学会発表] 定量位相顕微鏡と画像認証システムを用いた非標識下CTC 検出法 (2019)
  • 著者名/発表者名: 廣津周、菊池寛利、尾﨑裕介、川田三四郎、松本知拓、平松良浩、神谷欣志、坂口孝宣、山田秀直、山下大輔、岡崎茂俊、今野弘之、竹内裕也
  • 学会等名: 第119回日本外科学会定期学術集会
• [学会発表] 細胞内構造の機械学習に基づいた非標識による血中循環腫瘍細胞検手法 (2019)
  • 著者名/発表者名: 尾﨑裕介、菊池寛利、廣津周、山田秀直、川田三四郎、羽田稜馬、松本知拓、平松良浩、神谷欣志、岡崎茂俊、森田剛文、坂口孝宣、今野弘之、竹内裕也
  • 学会等名: 第28回日本がん転移学会学術集会
• [学会発表] 定量位相顕微鏡を用いた新たな血中循環腫瘍細胞の検出法 (2019)
  • 著者名/発表者名: 廣津周、菊池寛利、曽根田亘、川田三四郎、松本知拓、平松良浩、神谷欣志、森田剛文、坂口孝宣、山田秀直、山下大輔、岡崎茂俊、今野弘之、竹内裕也
  • 学会等名: 第57回日本癌治療学会学術集会
• [学会発表] 定量位相顕微鏡を用いた新たな非標識下CTC検出法 (2019)
  • 著者名/発表者名: 廣津周、菊池寛利、尾崎裕介、山田秀直、山下大輔、岡崎茂俊、川田三四郎、松本知拓、平松良浩、神谷欣志、森田剛文、坂口孝宣、今野弘之、竹内裕也
  • 学会等名: JDDW 2019
• [学会発表] Label-free classification of live cells using quantitative phase microscopy images for negative selection of circulating tumor cells (2019)
  • 著者名/発表者名: Hirotoshi Kikuchi, Amane Hirotsu, Hidenao Yamada, Daisuke Yamashita, Shigetoshi Okazaki, Yukio Ueda, Ryoma Haneda, Yoshihiro Hiramatsu, Kinji Kamiya, Hiroyuki Konno, Hiroya Takauchi
  • 学会等名: The 8th International Congress on Cancer Metastasis
  • 国際学会