| 研究課題/領域番号 |
19K09681
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分56030:泌尿器科学関連
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| 研究機関 | 兵庫医科大学 |
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研究代表者 |
後藤 章暢 兵庫医科大学, 医学部, 教授 (70283885)
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| 研究分担者 |
松永 渉 兵庫医科大学, 医学部, 助教 (20415300)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2021年度)
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| 配分額 *注記 |
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2021年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2020年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2019年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
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| キーワード | CRISPRA-Cas9 / Midkine / Adenovirus Vector / Lentiviral Vector / Crispr-Cas9 / 血管新生阻害療法 / 膀胱がん / ミドカイン / レンチウイルスベクター / アデノウイルスベクター / キメラ型ベクター / CRISPR-Cas9 / 膀胱癌 / キメラ型 / CRISPR-Cas9システム |
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| 研究開始時の研究の概要 |
制限増殖型アデノウイルスベクターAd5F35/MKp-E1は当研究室が難治性膀胱癌治療を目的に開発したキメラ型アデノウイルスベクターであり、がん細胞に特異的に感染増殖する性質を持つ。in vitro及び動物実験で本ベクターの膀胱癌に対する強い抗腫瘍作用が明らかになったが、臨床応用を考えると治療効果が早々に減衰する懸念がある。本研究は本ベクターに、血管内皮増殖因子の遺伝子を標的とするCRISPR-Cas9システムを組み込み治療能力を向上させると共に、このベクターのがん細胞に特異的に感染増殖する性質を利用し、安全な血管新生阻害療法が実現する革新的なバイオ抗がん剤の開発を目的としている。
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| 研究成果の概要 |
CRISPRA-Cas9技術はがん治療でも期待されるが、Cas9のオフターゲット効果は懸念材料である。そこで我々は、正常組織にオフターゲット効果が及ばないよう、腫瘍細胞の成長因子ミッドカインのプロモーターでCas9遺伝子を制御し、がん細胞特異的にCas9遺伝子を発現させる方法を考えた。
in vitro実験で、ミッドカインプロモーター下にCas9遺伝子を組み込んだアデノウイルスベクターによるがん細胞特異的なCas9発現を確認した。その一方、粒子に毒性があるアデノウイルスベクターの欠陥も問題となったため、同じくミドカインプロモーター下にCas9遺伝子を搭載したレンチウイルスベクターも開発した。
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| 研究成果の学術的意義や社会的意義 |
膀胱がんの症例の7割は筋層非浸潤性膀胱がんであり、難治性で再発を繰り返して悪性度を高める性質があるが、現行の治療法は副作用のため患者のQOL低下が著しいため、効果的で副作用の低い膀胱がん治療法開発は大きな意義がある。
本研究で開発したミドカインプロモーターとCas9遺伝子の組み合わせは、Cas9遺伝子の発現を悪性細胞に限定することを可能とするため、CRISPA-Cas9のオフターゲット効果による懸念を払しょくするとともに、血管内皮増殖因子を標的とするガイドRNAとの組み合わせによって、腫瘍に対する特異性を欠く現行の血管新生阻害療法の欠点を克服できるものと考える。
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