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線虫の低温耐性を改善する不凍タンパク質の生体内作用機序の解明

研究課題

研究課題/領域番号 19K15787
研究種目

若手研究

配分区分基金
審査区分 小区分38050:食品科学関連
研究機関東京大学

研究代表者

倉持 昌弘  東京大学, 大学院新領域創成科学研究科, 助教 (60805810)

研究期間 (年度) 2019-04-01 – 2021-03-31
研究課題ステータス 完了 (2020年度)
配分額 *注記
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2020年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
2019年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
キーワード不凍タンパク質 / 線虫 / 低温耐性 / 熱ヒステリシス / 氷晶結合面 / 蛍光イメージング / 細胞保護
研究開始時の研究の概要

不凍タンパク質(Antifreeze Protein: AFP)は、氷結晶の成長阻害というユニークな性質をもつ一方、非凍結温度でも個体生物の低温耐性改善や細胞保護のために働くことがわかってきました。本課題では、非凍結温度におけるAFPの分子メカニズム解明を目指します。種々の変異AFPを発現する線虫を用いて、低温耐性の観察や、AFPの細胞内局在パターン、細胞内作用を蛍光イメージングにより可視化解析します。そして、AFP結晶構造や物理的特性に起因するAFP機能を分子レベルで明らかにします。

研究成果の概要

不凍タンパク質(Antifreeze Protein: AFP)は、氷結晶成長阻害というユニークな機能をもちます。様々なAFPを線虫C.エレガンスに遺伝子導入したところ、氷の発生しない非凍結温度域でも低温耐性の改善が見られ、氷とAFPの作用ではない新たな機能が働く可能性が出てきました。このメカニズムを探るため、変異AFPを線虫に遺伝子導入し、非凍結温度における線虫低温耐性を観察しました。さらに、蛍光イメージングにより、AFP発現量、細胞レベルの観察も実施した結果、非凍結温度においても、AFPの構造的特徴と線虫低温耐性の間に一定の関係性があることを見出しました。

研究成果の学術的意義や社会的意義

不凍タンパク質(AFP)を利用した生体組織の低温保存法が期待されています。一方、その機能を生体レベルで検証する取り組みは少ないです。本研究では、非凍結温度における線虫低温耐性を調べることで、低温保存に有効なAFPの特徴を探索しました。複数のAFP変異体を用いた解析から、線虫低温耐性とAFP機能の関係性を示すことができ、生体組織の低温保存に有益なAFP性能の基礎科学知見を得ることができました。

報告書

(3件)
  • 2020 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2019 実施状況報告書
  • 研究成果

    (28件)

すべて 2021 2020 2019 その他

すべて 雑誌論文 (8件) (うち国際共著 2件、 査読あり 6件、 オープンアクセス 5件) 学会発表 (18件) (うち国際学会 3件) 備考 (1件) 産業財産権 (1件)

  • [雑誌論文] 線虫の凍結・低温耐性を改善する氷結合タンパク質の生体内作用機序の解明2021

    • 著者名/発表者名
      倉持 昌弘、三尾 和弘、津田 栄、佐々木 裕次
    • 雑誌名

      月刊「細胞」

      巻: 53 ページ: 66-69

    • NAID

      40022573722

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [雑誌論文] 個体生物の凍結・低温耐性を改善する不凍タンパク質の生体内効果2021

    • 著者名/発表者名
      倉持 昌弘、三尾 和弘、津田 栄、佐々木 裕次
    • 雑誌名

      月刊「アグリバイオ」

      巻: 5 ページ: 93-98

    • NAID

      40022590457

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [雑誌論文] Tilting and rotational motions of silver halide crystal with diffracted X-ray blinking2021

    • 著者名/発表者名
      Kuramochi Masahiro、Omata Hiroki、Ishihara Masaki、Hanslin Sander ?.、Mizumaki Masaichiro、Kawamura Naomi、Osawa Hitoshi、Suzuki Motohiro、Mio Kazuhiro、Sekiguchi Hiroshi、Sasaki Yuji C.
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 11 号: 1 ページ: 4097-4097

    • DOI

      10.1038/s41598-021-83320-y

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Diffracted X-ray blinking measurements of interleukin 15 receptors in the inner/outer membrane of living NK cells2021

    • 著者名/発表者名
      Chang Jaewon、Baek Yonugseok、Lee Injee、Sekiguchi Hiroshi、Ichiyanagi Kouhei、Mio Kazuhiro、Nozawa Shunsuke、Fukaya Ryo、Adachi Shin-ichi、Kuramochi Masahiro、Sasaki Yuji C.
    • 雑誌名

      Biochemical and Biophysical Research Communications

      巻: 556 ページ: 53-58

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2021.03.144

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] X-ray-based living-cell motion analysis of individual serotonin receptors2020

    • 著者名/発表者名
      Mio Kazuhiro、Ishihara Masaki、Fujimura Shoko、Sasaki Daisuke、Nozawa Shunsuke、Ichiyanagi Kohei、Fukaya Ryo、Adachi Shin-ichi、Kuramochi Masahiro、Sekiguchi Hiroshi、Kubo Tai、Sasaki Yuji C.
    • 雑誌名

      Biochemical and Biophysical Research Communications

      巻: 529 号: 2 ページ: 306-313

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2020.05.200

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Agonist and Antagonist-Diverted Twisting Motions of a Single TRPV1 Channel2020

    • 著者名/発表者名
      Fujimura Shoko、Mio Kazuhiro、Kuramochi Masahiro、Sekiguchi Hiroshi、Ikezaki Keigo、Mio Muneyo、Hengphasatporn Kowit、Shigeta Yasuteru、Kubo Tai、Sasaki Yuji C.
    • 雑誌名

      The Journal of Physical Chemistry B

      巻: 124 号: 51 ページ: 11617-11624

    • DOI

      10.1021/acs.jpcb.0c08250

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Expression of Ice-Binding Proteins in Caenorhabditis elegans Improves the Survival Rate upon Cold Shock and during Freezing2019

    • 著者名/発表者名
      Masahiro Kuramochi, Chiaki takanashi, Akari Yamauchi, Motomichi Doi, Kazuhiro Mio, Sakae tsuda, Yuji C. Sasaki
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: - 号: 1 ページ: 6246-6246

    • DOI

      10.1038/s41598-019-42650-8

    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] 線虫C.エレンガンスを用いた不凍タンパク質のin vivo 解析2019

    • 著者名/発表者名
      倉持 昌弘, 高梨 千晶, 山内 彩加林, 戸井 基道, 三尾 和弘, 津田 栄, 佐々木 裕次
    • 雑誌名

      低温生物工学会誌

      巻: 65 ページ: 23-26

    • NAID

      130007700254

    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 生きた細胞上の GPCR のミリ秒-マイクロ秒タイナミクスMilli- to microsecond dynamics of Single GPCR in Living Cells2021

    • 著者名/発表者名
      藤村章子、石原正輝、一柳光平、野澤俊介、足立伸一、深谷亮、倉持昌弘、関口博史、三尾和弘、佐々木裕次
    • 学会等名
      2020年度 量子ビームサイエンスフェスタ
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] 回折X線フリンキンクによるタイヤコムの動的構造解析 Dynamic Structure Analysis for Tire Rubbers by Diffracted X-ray Blinking2021

    • 著者名/発表者名
      倉持昌弘、増井友美、間下亮、引田理英、新井達也、 三尾和弘、関口博史、岸本浩通、佐々木裕次
    • 学会等名
      2020年度 量子ビームサイエンスフェスタ
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] 結晶性/非晶性 PEEK 高分子膜の時分割動態計測 Time-resolved observations of crystal / non-crystal PEEK film2021

    • 著者名/発表者名
      下村峻矢、倉持昌弘、佐々木大輔、新井達也、 引田理英、佐々木裕次
    • 学会等名
      2020年度 量子ビームサイエンスフェスタ
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] DXB 法を用いた不凍タンハク質結晶の内部分子動態計測 Molecular motion of antifreeze protein in crystal measured by Diffracted X-ray Blinking2021

    • 著者名/発表者名
      新井達也、倉持昌弘、三尾和弘、佐々木裕次
    • 学会等名
      2020年度 量子ビームサイエンスフェスタ
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] 固体高分子結晶性電解質内部のオヘラント分子動態計測 Operand-Measurement of molecular dynamics inside Solid Polymer Crystalline Electrolytes2021

    • 著者名/発表者名
      佐々木大輔、橘川莉子、中山美沙恵、倉持昌弘、一柳光平、深谷亮、関口博史、佐藤文菜、野澤俊介、足立伸一、三尾和弘、 田所誠、佐々木裕次
    • 学会等名
      2020年度 量子ビームサイエンスフェスタ
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] 時分割回折X線ブリンキングによるソフトクリスタル動的特性観測2020

    • 著者名/発表者名
      倉持昌弘
    • 学会等名
      新学術領域研究「ソフトクリスタル」第7回領域全体会議
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] In vivo X-ray single-molecule observation of ice-binding proteins for Caenorhabditis elegans freezing tolerance2020

    • 著者名/発表者名
      M Kuramochi
    • 学会等名
      第20回日本蛋白質科学会年会
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] 線虫C. エレガンスにおける凝集タンパク質および分子夾雑場のX線1分子観察2020

    • 著者名/発表者名
      倉持昌弘
    • 学会等名
      新学術領域研究「分子夾雑化学」第8回オンラインセミナー
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] 時分割回折X線ブリンキングによるソフトクリスタル動的特性観測2020

    • 著者名/発表者名
      倉持昌弘
    • 学会等名
      新学術領域研究「ソフトクリスタル」共同研究推進会議2
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] 時分割回折X線法による線虫C.エレガンスの不凍タンパク質と氷の1分子動態観察2020

    • 著者名/発表者名
      董芸格、倉持昌弘、高梨千晶、三尾和弘、戸井基道、青山光輝、関口博史、津田栄、佐々木裕次
    • 学会等名
      第33回日本放射光学会年会・放射光科学合同シンポジウム
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
  • [学会発表] THE OBSERVATION OF THE ICE-BINDING PROTEIN FOR FREEZING AND COLD TOLERANCE OF TRANSGENIC CAENORHABDITIS ELEGANS2020

    • 著者名/発表者名
      Masahiro Kuramochi, Yoichi Shinkai, Motomichi Doi, Kazuhiro Mio, Sakae Tsuda, Yuji C. Sasaki
    • 学会等名
      米国生物物理学会
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] SINGLE MOLECULAR OBSERVATION OF AFP AND ICE-CRYSTAL DYNAMICS IN CAENORHABDITIS ELEGANS BY TIME-RESOLVED X-RAY DIFFRACTION MEASUREMENTS2020

    • 著者名/発表者名
      Yige Dong, Masahiro Kuramochi, Chiaki Takanashi, Kazuhiro Mio, Motomichi Doi, Kouki Aoyama, Hiroshi Sekiguchi, Sakae Tsuda, Yuji C. Sasaki
    • 学会等名
      米国生物物理学会
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] 凍結・非凍結環境における氷結合タンパク質の生体内作用機序解明にむけて 線虫C.エレガンスの低温耐性観察およびX線1分子動態測定 In vivo effect of Ice-Binding Protein Cold tolerance observation and X-ray single molecular measurement using living C. elegans2019

    • 著者名/発表者名
      倉持 昌弘、董 芸格、高梨 千晶、山内 彩加林、戸井 基道、青山 光輝、関口 博史、三尾 和弘、津田 栄、佐々木 裕次
    • 学会等名
      第19回日本蛋白質科学会年会
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
  • [学会発表] Structure, Dynamics, Function and in vivo effects of Antifreeze protein2019

    • 著者名/発表者名
      倉持昌弘
    • 学会等名
      線虫研究の未来を創る会 2019
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
  • [学会発表] 非凍結温度において氷結合タンパク質は線虫の低温耐性を改善する Ice-Binding Proteins Improves the Survival Rate of Caenorhabditis elegans at Non-freezing Temperature2019

    • 著者名/発表者名
      Masahiro Kuramochi, Geikaku Tou, Chiaki Takanashi, Motomichi Doi, Kazuhiro Mio, Sakae Tsuda, C. Yuji Sasaki
    • 学会等名
      第57回日本生物物理学会年会
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
  • [学会発表] 氷結合タンパク質変異導入による線虫C.エレガンスの低温耐性への影響 The in vivo effects of the ice-binding protein mutations for the cold tolerance in C. elegans2019

    • 著者名/発表者名
      倉持 昌弘、董 芸格、高梨 千晶、山内 彩加林、戸井 基道、三尾 和弘、津田 栄、佐々木 裕次
    • 学会等名
      第42回日本分子生物学会年会
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
  • [学会発表] 時分割回折X線計測による線虫C.エレガンスの不凍タンパク質1分子動態観察2019

    • 著者名/発表者名
      董 芸格、倉持 昌弘、高梨 千晶、三尾 和弘、戸井 基道、青山 光輝、関口 博史、津田 栄、佐々木 裕次
    • 学会等名
      第42回日本分子生物学会年会
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
  • [学会発表] Dynamics And Functions of Antifreeze Proteins In Transgenic Caenorhabditis Elegans At Freezing Environments2019

    • 著者名/発表者名
      M. Kuramochi, G. Tou, C. Takanashi, A. Yamauchi, M. Doi, K. Mio, S. Tsuda, H. Sekiguchi, Y. C. Sasaki
    • 学会等名
      ASCB-EMBO2019
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [備考] 低温環境に弱い線虫が氷点下で生き延びた!-新しい低温保存技術と長期常温保存への期待-

    • URL

      https://www.aist.go.jp/aist_j/press_release/pr2019/pr20190515/pr20190515.html

    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
  • [産業財産権] X線を用いた物質評価方法及び物質評価装置2020

    • 発明者名
      倉持昌弘、佐々木裕次、三尾和弘
    • 権利者名
      倉持昌弘、佐々木裕次、三尾和弘
    • 産業財産権種類
      特許
    • 出願年月日
      2020
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書

URL: 

公開日: 2019-04-18   更新日: 2022-01-27  

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