自己免疫疾患におけるMEFV遺伝子変異の病態修飾に関する研究

• 研究課題/領域番号: 19K17888
• 研究種目: 若手研究
• 配分区分: 基金
• 審査区分: 小区分54020:膠原病およびアレルギー内科学関連
• 研究機関: 長崎大学
• 研究代表者: 遠藤 友志郎 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 客員研究員 (10831571)
• 研究期間 (年度): 2019-04-01 – 2024-03-31
• 研究課題ステータス: 交付 (2022年度)
• 配分額: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2021年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円); 2020年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2019年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
• キーワード: 家族性地中海熱 / 遺伝性自己炎症性疾患 / 全身性エリテマトーデス / 自己免疫疾患 / 関節リウマチ

研究開始時の研究の概要

本研究では、家族性地中海熱の原因遺伝子であるMEFV遺伝子の本邦のパターンとして多いExon 2多型の病的意義や自己免疫疾患への影響を動物実験により解明を試み、また臨床研究としてSLE患者にMEFV遺伝子解析を実施することで、その変異/多型がSLEの臨床病態に与える影響を解明する。また本研究では、自己炎症性疾患に関連する遺伝子に注目することで、自己免疫疾患の病態解明につながる可能性を秘めており、革新的な治療シーズを提供する可能性がある。

研究実績の概要

CRISPER-Cas9を用いて遺伝設計を行い、全身性エリテマトーデス(SLE)のモデルマウスとして知られるMRL/lprマウスへのMEFV exon 2 E148Q hetero多型のKnock In(KI)の作製に成功、さらに同マウスの継代を重ねることでE148Q KIマウス(MEFV E148Q KI MRL/lpr mice)の作製に成功した。また、コントロールとしてpoint mutationを伴わない同部位のMEFV exon 2をKIさせたMRL/lprマウスも作製し、体重変動や生存率、蛋白尿や自己抗体価の推移といった臨床評価、腎臓や皮膚などの組織学的評価、フローサイトメトリーによるB細胞やT細胞、単球等の細胞発現の評価、培養実験によるインフラマソーム活性化の評価を実行した。腎炎の組織学的な重症度判定では、5匹ずつの比較で明らかな有意差はないものの、MEFV E148Q KI MRL/lpr miceで腎炎が軽減する傾向が見られたため、今後数を増やし、さらに検討を行う予定である。また、自己抗体価やメモリーBcellの割合も有意にMEFV E148Q KI MRL/lpr miceで低下しており、この点は腎炎の軽減との一貫性が見られる。また、マウスモデルと一致して、SLE患者検体を用いたMEFVの解析に関しては、MEFV多型が存在することで、SLEにおける腎炎の発症が抑制される結果であり、モデルマウスの結果と矛盾なく、MEFV多型はループス腎炎発症には保護的に働くことが示唆された。これらの結果は今後更なる解析を行った後に報告予定である。ただし、MEFV多型の存在による臨床像の違いにおけるその機序の解明のため更なる研究が必要である。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

MEFV E148Q KI MRL/lpr マウスと野生型との間でその表現型が異なる傾向がみられ、その結果はSLE患者の遺伝子解析の結果とも一致していることから、MEFV多型の有無により、腎炎発症が有意に抑制されることが示唆され、今後報告予定である。しかしながら、新型コロナウイルスの影響により追加実験の一部が実施できなかったため、進捗状況としてやや遅れていると判断した。

今後の研究の推進方策

臨床研究において、SLE患者では、MEFV多型の有無やその多型の数により、腎炎発症が有意に抑制されることが示唆され、マウス実験においてもこれを反映する結果が得られている。以上の研究結果をまとめ、原稿を作成し英文誌への投稿準備を進めるが、それと並行してMEFV多型の存在による臨床像の違いにおけるその機序の解明のため更なる研究が必要である。

研究成果

• [雑誌論文] Inhibition of calcium/calmodulin-dependent protein kinase IV in arthritis: dual effect on Th17 cell activation and osteoclastogenesis (2023)
  • 著者名/発表者名: Tomohiro Koga, Masataka Umeda, Nobuya Yoshida, Yushiro Endo, Atsushi Kawakami, George C Tsokos
  • 雑誌名: Rheumatology (Oxford) 巻: 62 号: 2 ページ: 861-871
  • DOI: 10.1093/rheumatology/keac381
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Abnormalities of T cells in systemic lupus erythematosus: new insights in pathogenesis and therapeutic strategies (2022)
  • 著者名/発表者名: Hao Li, Afroditi Boulougoura, Yushiro Endo, George C Tsokos
  • 雑誌名: J Autoimmun 巻: 132 ページ: 102870-102870
  • DOI: 10.1016/j.jaut.2022.102870
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Autoinflammatory disease: clinical perspectives and therapeutic strategies (2022)
  • 著者名/発表者名: Kawakami Atsushi、Endo Yushiro、Koga Tomohiro、Yoshiura Koh-ichiro、Migita Kiyoshi
  • 雑誌名: Inflammation and Regeneration 巻: 42 号: 1 ページ: 37-37
  • DOI: 10.1186/s41232-022-00217-7
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Large deletion in 6q containing the TNFAIP3 gene associated with autoimmune lymphoproliferative syndrome (2022)
  • 著者名/発表者名: Endo Yushiro、Funakoshi Yasutomo、Koga Tomohiro、Ohashi Hirofumi、Takao Mami、Miura Kiyonori、Yoshiura Koh-ichiro、Matsumoto Tadashi、Moriuchi Hiroyuki、Kawakami Atsushi
  • 雑誌名: Clinical Immunology 巻: 235 ページ: 108853-108853
  • DOI: 10.1016/j.clim.2021.108853
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Tocilizumab has no direct effect on cell lines infected with human T-cell leukemia virus type 1. (2021)
  • 著者名/発表者名: Endo Y, Fukui S, Koga T, Sasaki D, Hasegawa H, Yanagihara K, Okayama A, Nakamura T, Kawakami A, Nakamura H. Tocilizumab has no direct effect on cell lines infected with human T-cell leukemia virus type 1.
  • 雑誌名: J Int Med Res. 巻: 49 号: 3 ページ: 1-10
  • DOI: 10.1177/03000605211002083
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Discrepancy between clinical and ultrasound remissions in rheumatoid arthritis: a multicentre ultrasound cohort study in Japan (2021)
  • 著者名/発表者名: Endo Y、Kawashiri S-Y、Nishino A、Okamoto M、Tsuji S、Shimizu T、Sumiyoshi R、Igawa T、Koga T、Iwamoto N、Ichinose K、Tamai M、Nakamura H、Origuchi T、Ueki Y、Yoshitama T、Eiraku N、Matsuoka N、Okada A、Fujikawa K、Otsubo H、Takaoka H、Hamada H、Tsuru T、Nagano S、Arinobu Y、Hidaka T、Tada Y、Kawakami A
  • 雑誌名: Scandinavian Journal of Rheumatology 巻: 50 号: 6 ページ: 436-441
  • DOI: 10.1080/03009742.2021.1876914
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Utility of a simplified ultrasonography scoring system among patients with rheumatoid arthritis (2021)
  • 著者名/発表者名: Endo Yushiro、Kawashiri Shin-ya、Morimoto Shimpei、Nishino Ayako、Okamoto Momoko、Tsuji Sosuke、Takatani Ayuko、Shimizu Toshimasa、Sumiyoshi Remi、Igawa Takashi、Koga Tomohiro、Iwamoto Naoki、
  • 雑誌名: Medicine 巻: 100 号: 1 ページ: e23254-e23254
  • DOI: 10.1097/md.0000000000023254
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Systemic lupus erythematosus overlapping dermatomyositis owing to a heterozygous TREX1 Asp130Asn missense mutation (2021)
  • 著者名/発表者名: Endo Yushiro、Koga Tomohiro、Otaki Hiroki、Furukawa Kaori、Kawakami Atsushi
  • 雑誌名: Clinical Immunology 巻: 227 ページ: 108732-108732
  • DOI: 10.1016/j.clim.2021.108732
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Effectiveness and safety of non-tumor necrosis factor inhibitor therapy for anti-human T-cell leukemia virus type 1 antibody-positive rheumatoid arthritis (2020)
  • 著者名/発表者名: Endo Yushiro、Fukui Shoichi、Umekita Kunihiko、Kawakami Atsushi、Nakamura Hideki、et al
  • 雑誌名: Modern Rheumatology 巻: － 号: 5 ページ: 972-978
  • DOI: 10.1080/14397595.2020.1847802
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Anti-citrullinated protein antibody titre as a predictor of abatacept treatment persistence in patients with rheumatoid arthritis: a prospective cohort study in Japan (2020)
  • 著者名/発表者名: Endo Y, Koga T, Kawashiri S, Morimoto S, Nishino A, Umeda M, Fukui S, Iwamoto N, Ichinose K, Tamai M, Nakamura H, Origuchi T, Ueki Y, Yoshitama T, Eiraku N, Matsuoka N, Okada A, Fujikawa K, Hamada H, Tsuru T, Nagano S, Arinobu Y, Hidaka T, Tada Y, Kawakami A
  • 雑誌名: Scand J Rheumatol 巻: 49 ページ: 13-17
  • 査読あり
• [雑誌論文] Successful hydroxychloroquine treatment for familial Mediterranean fever in a Japanese patient with concurrent systemic lupus erythematosus (2020)
  • 著者名/発表者名: Endo Y, Koga T, Furukawa K, Umeda M, Sasaki D, Yanagihara K, Kawakami A
  • 雑誌名: Rheumatology 巻: 59 ページ: 903-905
• [雑誌論文] Lung consolidation and mediastinal lymphadenopathy in patients with early anti-citrullinated protein antibody-positive rheumatoid arthritis. (2019)
  • 著者名/発表者名: Endo Y, Koga T, Tsutsui S, Ashizawa K, Kawashiri S, Kawakami A
  • 雑誌名: Clinical and Experimental Rheumatology 巻: 37 ページ: 517-518
  • 査読あり
• [雑誌論文] Atypical phenotype without fever in a Japanese family with an autosomal dominant transmission of familial Mediterranean fever due to heterozygous MEFV Thr577Asn mutations (2019)
  • 著者名/発表者名: Endo Y, Koga T, Nakashima M, Mishima H, Yoshiura K, Kawakami A
  • 雑誌名: Clinical and Experimental Rheumatology 巻: 37 ページ: 161-162
  • 査読あり
• [雑誌論文] Late-onset protracted febrile myalgia syndrome successfully treated with colchicine owing to heterozygous MEFV exon 2 variants (2019)
  • 著者名/発表者名: Endo Y, Koga T, Furukawa K, Sumiyoshi R, Ichinose K, Kawakami A
  • 雑誌名: Clinical and Experimental Rheumatology 巻: 37 ページ: 166-166
• [学会発表] 抗HTLV-1抗体陽性関節リウマチにおける 非TNF阻害薬の臨床効果と安全性 (2020)
  • 著者名/発表者名: 遠藤 友志郎、中村 英樹、梅北 邦彦、岡田 覚丈、藤川 敬太、荒牧 俊幸、松岡 直樹、植木 幸孝、日髙 利彦、岡山 昭彦、川上 純
  • 学会等名: 第117回日本内科学会
• [学会発表] Consolidations in the lung and mediastinal lymphadenopathy occur predominantly in early anti-citrullinated protein antibody-positive patients with rheumatoid arthritis (2019)
  • 著者名/発表者名: 遠藤友志郎、古賀智裕、筒井伸、芦澤和人、江口瑞奈、岡本百々子、辻創介、高谷亜由子、清水俊匡、住吉玲美、井川敬、川尻真也、岩本直樹、一瀬邦弘、玉井慎美、中村英樹、折口智樹、川上純
  • 学会等名: アジア太平洋リウマチ学会2019
  • 国際学会
• [学会発表] Lung consolidation and mediastinal lymphadenopathy in patients with early anti-citrullinated protein antibody-positive rheumatoid arthritis (2019)
  • 著者名/発表者名: 遠藤友志郎、古賀智裕、筒井伸、芦澤和人、江口瑞奈、岡本百々子、辻創介、高谷亜由子、清水俊匡、住吉玲美、井川敬、川尻真也、岩本直樹、一瀬邦弘、玉井慎美、中村英樹、折口智樹、川上純
  • 学会等名: 第63回 日本リウマチ学会総会・学術集会 国際ワークショップ
  • 国際学会
• [学会発表] 抗HTLV-1抗体陽性関節リウマチにおける非TNF阻害薬の臨床効果 (2019)
  • 著者名/発表者名: 遠藤友志郎、中村英樹、梅北邦彦、宮本潤哉、岡田覚丈、古賀智裕、藤川敬太、荒牧俊幸、溝上明成、松岡直樹、植木幸孝、仮屋裕美、橋場弥生、日髙利彦、岡山昭彦、川上純
  • 学会等名: 第6回 日本HTLV-1学会学術集会
• [学会発表] Positivity of Anti-Ro/SSA Antibody Confer Poor Response and Persistence with Abatacept Therapy (2019)
  • 著者名/発表者名: 遠藤友志郎、古賀智裕、川尻真也、西野文子、岩本直樹、一瀬邦弘、玉井慎美、中村英樹、折口智樹、吉玉珠美、榮樂信隆、植木幸孝、松岡直樹、岡田覚丈、都留智己、日髙利彦、藤川敬太、濱田浩朗、永野修司、有信洋二郎、多田芳文、川上純
  • 学会等名: アメリカリウマチ学会2019
  • 国際学会
• [学会発表] Efficacy and Safety of Tocilizumab Treatment for Anti-human T Lymphotropic Virus Type I Antibody-positive Rheumatoid Arthritis (2019)
  • 著者名/発表者名: 遠藤友志郎、中村英樹、梅北邦彦、福井翔一、鈴木貴久、宮本潤哉、岡田覚丈、古賀智裕、藤川敬太、荒牧俊幸、溝上明成、松岡直樹、植木幸孝、仮屋裕美、橋場弥生、日髙利彦、岡山昭彦、川上純
  • 学会等名: アメリカリウマチ学会2019
  • 国際学会