唾液中の可溶性マーカーに着目したIgG4関連疾患の新たな診断方法の開発

• 研究課題/領域番号: 19K22723
• 研究種目: 挑戦的研究(萌芽)
• 配分区分: 基金
• 審査区分: 中区分57:口腔科学およびその関連分野
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 中村 誠司 九州大学, 歯学研究院, 特任教授 (60189040)
• 研究分担者: 前原 隆 九州大学, 歯学研究院, 助教 (10637333) ; 森山 雅文 九州大学, 歯学研究院, 教授 (20452774)
• 研究期間 (年度): 2019-06-28 – 2025-03-31
• 研究課題ステータス: 交付 (2023年度)
• 配分額: 6,500千円 (直接経費: 5,000千円、間接経費: 1,500千円); 2021年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円); 2020年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円); 2019年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
• キーワード: IgG4関連疾患 / バイオマーカー / 診断 / 唾液

研究開始時の研究の概要

我々のこれまでの研究ではIgG4 の過剰産生には特異なT 細胞とそれらが産生するサイトカインが関与していることを明らかにしており、それらの疾患関連分子をマーカーとして検索することは病因・病態の本質により迫ることになり、特異的で精度が高い新たな診断法の開発に繋がると期待できる。
本研究では、非侵襲性で繰り返して実施できることも検査の重要な要件であると考え、最も罹患頻度が高いのが唾液腺であること、さらには唾液腺内で産生される可溶性分子は唾液中にも検出可能であることに着目し、唾液中の可溶性マーカーを用いた新たなIgG4-RDの診断法の確立を目指す。

研究実績の概要

IgG4関連疾患（IgG4-RD）は、唾液腺を始めとした多臓器に線維化を伴った腫瘤形成とそれに伴う機能障害を来す全身性疾患であり、本邦から提唱された新しい疾患概念である。診断には「IgG4関連疾患包括的診断基準」および「臓器特異的診断基準」が用いられており、類似疾患との鑑別のために罹患臓器の生検を推奨している。しかし、唾液腺以外の臓器では生検の実施が困難であり、診断および治療方針の決定に苦慮することが少なくない。また、再発しやすいので長期に経過を診る必要があり、そのために非侵襲性で繰り返して実施できる検査が求められている。しかし、血清IgG4値のみでは、IgG4-RD以外の多くの疾患でも高値を示すことがあり、また再発時には指標とならないことが示唆されている。現在、IgG4-RDの疾患特異的自己抗原の同定については、これまでに本邦と米国から2 つの報告がある。1 つは京都大学消化器内科の研究グループがIgG4-RD の1 つである自己免疫膵炎の患者の末梢血から免疫沈降法を用いて、ラミニン511を自己抗原として同定しており（Sci Transl Med 2018）、もう1つハーバード大学のRagon研究所が末梢血からレクチンファミリーに属するガレクチン3 を自己抗原として同定している（J Allergy Clin Immunol 2019）。しかし実際には罹患臓器別で陽性率に大きなバラツキがあり、IgG4-RD に共通もしくは高率で陽性となる自己抗原は同定されていない。そこで本研究では、最も罹患頻度が高い唾液腺からそのバイオマーカーを抽出し、新たなIgG4関連疾患の診断法の確立を目指す。
今年度は病変局所における疾患特異的なバイオマーカーを見いだすために、IgG4-RDの顎下腺病変および末梢血からB細胞（CD19陽性細胞）をセルソーターにてソーティングし、シングルセルBCR レパトア解析を行った。その結果、B 細胞のオリゴクローナルな増殖を認めたことから、自己抗原の存在が推察された。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

臓器特異的抗体の抽出でき、新たなバイオマーカーに繋がる可能性が高いたため

今後の研究の推進方策

自己抗原同定の精度と信頼性を向上させるためには、さらに複数のアプローチや手法を組み合わせることが必要と考えており、次年度の研究ではさらに唾液腺病変および末梢血からPierceTM Protein Concentratorsを用いて抗体を抽出し、 HuProtTMプロテオームマイクロアレイにて自己抗原の候補分子を抽出する予定である

研究成果

• [雑誌論文] Expansion of CD4+ cytotoxic T lymphocytes with specific gene expression patterns may contribute to suppression of tumor immunity in oral squamous cell carcinoma: single-cell analysis and in vitro experiments (2023)
  • 著者名/発表者名: Chen Hu、Sameshima Junsei、Yokomizo Shiho、Sueyoshi Tomoki、Nagano Haruki、Miyahara Yuka、Sakamoto Taiki、Fujii Shinsuke、Kiyoshima Tamotsu、Guy Thomas、Nakamura Seiji、Moriyama Masafumi、Kaneko Naoki、Kawano Shintaro
  • 雑誌名: Frontiers in Immunology 巻: 14 ページ: 1305783-1305783
  • DOI: 10.3389/fimmu.2023.1305783
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Extrafollicular IgD?CD27?CXCR5?CD11c? DN3 B cells infiltrate inflamed tissues in autoimmune fibrosis and in severe COVID-19 (2023)
  • 著者名/発表者名: Allard-Chamard H、Kaneko N、Bertocchi A、Sun N、Boucau J、Kuo H、Farmer JR.、Perugino C、Mahajan VS.、Murphy SJ.H.、Premo K、Diefenbach T、Ghebremichael M、Yuen G、Kotta A、Akman Z、Lichterfeld M、Walker BD.、Yu XG.、Moriyama M、Maehara T、Nakamura S、Stone JH.、Padera RF.、Pillai S
  • 雑誌名: Cell Reports 巻: 42 号: 6 ページ: 112630-112630
  • DOI: 10.1016/j.celrep.2023.112630
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Id4 modulates salivary gland homeostasis and its expression is downregulated in IgG4-related disease via miR-486-5p (2023)
  • 著者名/発表者名: 1.Hayashi Y, Kimura S, Yano E, Yoshimoto S, Saeki A, Yasukochi A, Hatakeyama Y, Moriyama M, Nakamura S, Jimi E, Kawakubo-Yasukochi T.
  • 雑誌名: Biochim Biophys Acta Mol Cell Res 巻: 1870(2) 号: 2 ページ: 119404-119404
  • DOI: 10.1016/j.bbamcr.2022.119404
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] The Therapeutic Potential of Secreted Factors from Dental Pulp Stem Cells for Various Diseases (2022)
  • 著者名/発表者名: Ogata Kenichi、Moriyama Masafumi、Matsumura-Kawashima Mayu、Kawado Tatsuya、Yano Aiko、Nakamura Seiji
  • 雑誌名: Biomedicines 巻: 10 号: 5 ページ: 1049-1049
  • DOI: 10.3390/biomedicines10051049
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Orchestration of Immune Cells Contributes to Fibrosis in IgG4-Related Disease (2022)
  • 著者名/発表者名: Kaneko Naoki、Moriyama Masafumi、Maehara Takashi、Chen Hu、Miyahara Yuka、Nakamura Seiji
  • 雑誌名: Immuno 巻: 2 号: 1 ページ: 170-184
  • DOI: 10.3390/immuno2010013
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] CD163+ M2 Macrophages Promote Fibrosis in IgG4-Related Disease Via Toll-like Receptor 7/Interleukin-1 Receptor-Associated Kinase 4/NF-κB Signaling (2022)
  • 著者名/発表者名: Chinju Akira、Moriyama Masafumi、Kakizoe‐Ishiguro Noriko、Chen Hu、Miyahara Yuka、Haque A. S. M. Rafiul、Furusho Katsuhiro、Sakamoto Mizuki、Kai Kazuki、Kibe Kotono、Hatakeyama‐Furukawa Sachiko、Ito‐Ohta Miho、Maehara Takashi、Nakamura Seiji
  • 雑誌名: Arthritis & Rheumatology 巻: in press 号: 5 ページ: 1-10
  • DOI: 10.1002/art.42043
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Investigation of IgG4‐positive cells in idiopathic multicentric Castleman disease and validation of the 2020 exclusion criteria for IgG4‐related disease (2021)
  • 著者名/発表者名: Nishikori Asami、Nishimura Midori Filiz、Nishimura Yoshito、Notohara Kenji、Satou Akira、Moriyama Masafumi、Nakamura Seiji、Sato Yasuharu
  • 雑誌名: Pathology International 巻: 72 号: 1 ページ: 43-52
  • DOI: 10.1111/pin.13185
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Dental pulp-derived stem cell-conditioned media attenuates secondary Sj?gren's syndrome via suppression of inflammatory cytokines in the submandibular glands (2021)
  • 著者名/発表者名: Ogata Kenichi、Matsumura-Kawashima Mayu、Moriyama Masafumi、Kawado Tatsuya、Nakamura Seiji
  • 雑誌名: Regenerative Therapy 巻: 16 ページ: 73-80
  • DOI: 10.1016/j.reth.2021.01.006
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Secreted factors from dental pulp stem cells improve sjogre’s syndrome via regulatory T cell-mediated immunosuppression (2021)
  • 著者名/発表者名: Matsumura-Kawashima et al.
  • 雑誌名: Stem Cell Research & Therapy 巻: 2021 号: 1 ページ: 1-16
  • DOI: 10.1186/s13287-021-02236-6
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] CD4+ and CD8+ cytotoxic T lymphocytes may induce mesenchymal cell apoptosis in IgG4-related disease (2021)
  • 著者名/発表者名: Perugino Cory A., Moriyama Masafumi（28名中24番目）, et al.
  • 雑誌名: Journal of Allergy and Clinical Immunology 巻: 147 号: 1 ページ: 368-382
  • DOI: 10.1016/j.jaci.2020.05.022
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Association of circulating SLAMF7+Tfh1 cells with IgG4 levels in patients with IgG4-related disease. (2020)
  • 著者名/発表者名: Higashioka K, Ota Y, Maehara T, et. al.
  • 雑誌名: BMC Immunol. 巻: 21 号: 1 ページ: 31-31
  • DOI: 10.1186/s12865-020-00361-0
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Review of a novel disease entity, immunoglobulin G4-related disease (2020)
  • 著者名/発表者名: Maehara Takashi、Moriyama Masafumi、Nakamura Seiji
  • 雑誌名: Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons 巻: 46 号: 1 ページ: 3-3
  • DOI: 10.5125/jkaoms.2020.46.1.3
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] RORγt antagonist improves Sj?gren's syndrome‐like sialadenitis through downregulation of CD25 (2020)
  • 著者名/発表者名: Ono Yuko、Tsuboi Hiroto、Moriyama Masafumi、Asashima Hiromitsu、Kudo Hanae、Takahashi Hiroyuki、Honda Fumika、Abe Saori、Kondo Yuya、Takahashi Satoru、Matsumoto Isao、Nakamura Seiji、Sumida Takayuki
  • 雑誌名: Oral Diseases 巻: - 号: 4 ページ: 766-777
  • DOI: 10.1111/odi.13255
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Activated M2 macrophage contributes to the pathogenesis of IgG4-related disease via TLR7/IL-33 signalin. (2019)
  • 著者名/発表者名: Ishiguro N, Moriyama M, Furusho K, Furukawa S, Shibata T, Murakami Y, Chinju A, Haque ASMR, Gion Y, Ohta M, Maehara T, Tanaka A, Yamauchi M, Sakamoto M, Mochizuki K, Ono Y, Hayashida JN, Sato Y, Kiyoshima T, Yamamoto H, Miyake K, Nakamura S
  • 雑誌名: Arthritis Rheumatol. 巻: Jan;72(1) 号: 1 ページ: 166-178
  • DOI: 10.1002/art.41052
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] The diagnostic utility of submandibular gland sonography and labial salivary gland biopsy in IgG4-related dacryoadenitis and sialadenitis: Its potential application to the diagnostic criteria (2019)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto Mizuki、Moriyama Masafumi、Shimizu Mayumi、Chinju Akira、Mochizuki Keita、Munemura Ryusuke、Ohyama Keiko、Maehara Takashi、Ogata Kenichi、Ohta Miho、Yamauchi Masaki、Ishiguro Noriko、Matsumura Mayu、Ohyama Yukiko、Kiyoshima Tamotsu、Nakamura Seiji
  • 雑誌名: Modern Rheumatology 巻: - 号: 2 ページ: 1-6
  • DOI: 10.1080/14397595.2019.1576271
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 2.Tissue-infiltrating immune cells contribute to understanding the pathogenesis of Kimura disease: A case report (2019)
  • 著者名/発表者名: Maehara T, Munemura R, Shimizu M, Kakizoe N, Kaneko N, Murakami Y, Moriyama M, Kiyoshima T, Kawano S, Nakamura S.
  • 雑誌名: Medicine 巻: in press 号: 50 ページ: e18300-e18300
  • DOI: 10.1097/md.0000000000018300
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] CD206+ tumor-associated macrophages promote proliferation and invasion in oral squamous cell carcinoma via EGF production. (2019)
  • 著者名/発表者名: Haque ASMR, Moriyama M, Kubota K, Ishiguro N, Sakamoto M, Chinju A, Mochizuki K, Sakamoto T, Kaneko N, Munemura R, Maehara T, Tanaka A, Hayashida JN, Kawano S, Kiyoshima T, Nakamura S.
  • 雑誌名: Sci Rep. 巻: Oct 10;9(1) 号: 1 ページ: 14611-14611
  • DOI: 10.1038/s41598-019-51149-1
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Cytidine deaminase enables Toll-like receptor 8 activation by cytidine or its analogs. (2019)
  • 著者名/発表者名: Furusho K, Shibata T, Sato R, Fukui R, Motoi Y, Zhang Y, Saitoh SI, Ichinohe T, Moriyama M, Nakamura S, Miyake, K.
  • 雑誌名: International immunology. 巻: 31 号: 3 ページ: 167-173
  • DOI: 10.1093/intimm/dxy075
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Pathogenesis of IgG4-related disease: a critical review (2018)
  • 著者名/発表者名: Maehara Takashi、Moriyama Masafumi、Nakamura Seiji
  • 雑誌名: Odontology 巻: 107 号: 2 ページ: 127-132
  • DOI: 10.1007/s10266-018-0377-y
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] IgG4関連涙腺・唾液腺炎の診断およびモニタリングにおける顎下腺超音波検査の可能性を考える (2023)
  • 著者名/発表者名: 森山 雅文、坂本 瑞樹、亀倉 隆太、坪井 洋人、折口 智樹、土橋 浩章、佐藤 康晴、高橋 裕樹、井上 大、高木 幸則、清水 真弓、川野 真太郎、中村 誠司
  • 学会等名: 第31回 日本シェーグレン症候群学会・学術集会
  • 招待講演
• [学会発表] IgG4関連疾患の病因・病態と治療 「自然免疫からみたIgG4関連疾患の病因・病態」 (2021)
  • 著者名/発表者名: 森山 雅文、石黒乃 理子、鎮守 晃、坂本 瑞樹、木部 琴乃、前原 隆、中村 誠司
  • 学会等名: 日本シェーグレン症候群学会
  • 招待講演
• [学会発表] IL-1 inducing inflammation by CD163+ M2 macrophages contributes to the fibrosis of IgG4-related disease via TLR7/IRAK4/NFkB signaling. (2021)
  • 著者名/発表者名: Akira Chinju, Masafumi Moriyama, Noriko Ishiguro, Miho Ohta, Takashi Maehara, Akihiko Tanaka, Mizuki Sakamoto, Haque A.S.M. Rafiul, Keita Mochizuki, Yuko Ono, Ryusuke Munemura, Jun-Nosuke Hayashida, and Seiji Nakamura
  • 学会等名: Oral Bioscience & OBT Research Center Joint International Symposium 2021
• [学会発表] Toll様受容体7（TLR7）に着目したIgG4関連疾患モデルマウスの樹立 (2020)
  • 著者名/発表者名: 森山雅文、石黒乃理子、鎮守晃、坂本瑞樹、古庄克宏、太田美穂、望月敬太、宗村龍祐、中村誠司
  • 学会等名: 第65回 （公社）日本口腔外科学会総会・学術大会
• [学会発表] IgG4関連疾患においてTLR7はIRAK4/NFκBシグナルを介して線維化を惹起する (2020)
  • 著者名/発表者名: 鎮守晃、森山雅文、柿添乃理子、古庄克宏、前原隆、伊東美穂、坂本瑞樹、望月敬太、宗村龍祐、中村誠司
  • 学会等名: 第65回 （公社）日本口腔外科学会総会・学術大会
• [学会発表] ヒト歯髄幹細胞培養上清を用いたシェーグレン症候群に対する免疫抑制能の検討 (2020)
  • 著者名/発表者名: 川島（松村） 万由、緒方謙一、森山雅文、川戸達也、中村誠司
  • 学会等名: 第65回 （公社）日本口腔外科学会総会・学術大会
• [学会発表] Recent topics of my researches in the field of oral and maxillofacial surgery ～A novel salivary gland disease entity and oral potentially malignant disorders～ (2019)
  • 著者名/発表者名: Nakamura Seiji
  • 学会等名: Research Symposium in Taipei Medical University（
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] シェーグレン症候群とIgG4関連疾患の新しい理解 (2019)
  • 著者名/発表者名: 中村誠司
  • 学会等名: 第29回日本口腔内科学会・第３２回日本口腔診断学会・第２８回日本口腔検査学会・第３０回日本臨床口腔病理学会合同シンポジウム
  • 招待講演
• [学会発表] IgG4 関連涙腺・唾液腺炎の診断における口唇腺生検および超音波検査の有用性 (2019)
  • 著者名/発表者名: 坂本瑞樹、森山雅文、中村誠司
  • 学会等名: 第１2回IgG4研究会
• [学会発表] M2マクロファージはToll様受容体7-IRF8シグナルを介してIgG4関連疾患におけるIL-1誘導型炎症を惹起する (2019)
  • 著者名/発表者名: 鎮守晃、森山雅文、中村誠司
  • 学会等名: 第73回 日本口腔科学会 学術集会
• [図書] リウマチ科 第68巻第3号 12月号 IgG4関連疾患における自然免疫応答の役割 (2022)
  • 著者名/発表者名: 森山 雅文、中村 誠司
  • 総ページ数: 7
  • 出版者: 科学評論社
• [図書] 臨床医必読 最新IgG4関連疾患 改訂第2版 (2019)
  • 著者名/発表者名: 岡崎 和一
  • 総ページ数: 240
  • 出版者: 診断と治療社
  • ISBN: 9784787824394