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有効な腫瘍マーカーのない婦人科悪性腫瘍に対する新しい腫瘍マーカーの確立

研究課題

研究課題/領域番号 20014024
研究種目

特定領域研究

配分区分補助金
審査区分 生物系
研究機関慶應義塾大学

研究代表者

津田 浩史  慶應義塾大学, 医学部, 講師 (00423880)

研究分担者 片桐 豊雅  徳島大学, 疾患ゲノム研究センター, 教授 (60291895)
青木 大輔  , 医学部, 教授 (30167788)
研究期間 (年度) 2008 – 2009
研究課題ステータス 完了 (2009年度)
配分額 *注記
5,000千円 (直接経費: 5,000千円)
2009年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
2008年度: 2,800千円 (直接経費: 2,800千円)
キーワード癌 / トランスレーショナルリサーチ / 蛋白質 / 上皮性卵巣癌 / 子宮体癌 / 明細胞腺癌 / HIG2蛋白
研究概要

【目的】我々が新しく発見した蛋白につき、卵巣癌および子宮体癌に対して腫瘍マーカーとしての有効性を検証し、血中での測定システムを確立する。
【方法】(1)臨床検体での解析:対象:婦人科悪性腫瘍604例(卵巣癌254例、体癌163例、頸癌187例)。作製したポリクローナル抗体でHIG2蛋白の発現を検証した』(2)HIG2モノクローナル抗体の作製とHIG2-ELISA系の開発:HIG2全長(63アミノ酸)のリコンビナント蛋白質を大腸菌His融合発現系にて発現し、HPLC-His-Trapによりアフィニティ精製を行った。さらに上述の精製を繰り返し、銀染色にて大腸菌夾雑蛋白質の完全な除去を確認した。この高純度HIG2リコンビナント蛋白質を抗原としてマウスモノクローナル抗体(mAb)およびウサギポリクローナル抗体(pAb)を作製した。
【成績】(1)卵巣癌、体癌、頸癌でのHIG2蛋白発現率は80%、71%、65%であり、特に有効な腫瘍マーカーのない卵巣明細胞腺癌、子宮体部腺癌および頸部腺癌それぞれ83%、75%、67%と高発現していた。(2)作製したmAbおよびpAbの特異性を検証したが、これまでHIG2高発現の報告のある腎細胞癌培養細胞株で、両抗体は特異的に免疫沈降が可能で、さらに淡明腎細胞癌組織を特異的に強く染色した。次に、両抗体でサンドウィッチELISA法によるHIG2蛋白質検出系の樹立を行い、75ng/mLのHIG2リコンビナント蛋白質の検出に成功した。しかし、腎細胞癌患者の血漿では検出できなかった。
【結論】HIG2蛋白は卵巣癌、体癌および頸癌で有効な腫瘍マーカーになりうる可能性が示唆された。現在、作製した両抗体を用いて、血漿中HIG2を免疫沈降後の質量分析による検出系の開発を試みている。

報告書

(2件)
  • 2009 実績報告書
  • 2008 実績報告書
  • 研究成果

    (4件)

すべて 2010 2008

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (1件)

  • [雑誌論文] Differential expression of hypoxia-inducible 2 (HIG2) protein among different histologic types of epithelial ovarian cancer and in clear cell adnocarcinoma2010

    • 著者名/発表者名
      Sadako Nishimura
    • 雑誌名

      Int J Gynecol Cancer 20

      ページ: 220-226

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] The seneitivity and specificity of new formula to distinguish endometrioid type endometrial carcinoma from ovarian endometrial carcinoma2010

    • 著者名/発表者名
      Sadako Nishimura
    • 雑誌名

      Eur J Obstet Gynecol 14

      ページ: 67-72

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Relationship between ABCF2 expression and response to chemotherapyor prognosis in clear cell adenocarcinoma of the ovary2010

    • 著者名/発表者名
      Hiroshi Tsuda
    • 雑誌名

      Int J Gynecol Cancer (In press)

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 子宮体癌におけるhypoxia-inducibleprotein2(HIG2)蛋白発現2008

    • 著者名/発表者名
      津田浩史, 他
    • 学会等名
      第44回日本婦人科腫瘍学会
    • 発表場所
      名古屋
    • 年月日
      2008-07-18
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書

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公開日: 2008-04-01   更新日: 2018-03-28  

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