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バクテリオファージMuを構成するサブユニットの構造解析

研究課題

研究課題/領域番号 20051004
研究種目

特定領域研究

配分区分補助金
審査区分 生物系
研究機関群馬大学

研究代表者

武田 茂樹  群馬大学, 大学院・工学研究科, 教授 (80282854)

研究期間 (年度) 2008 – 2009
研究課題ステータス 完了 (2009年度)
配分額 *注記
6,600千円 (直接経費: 6,600千円)
2009年度: 3,300千円 (直接経費: 3,300千円)
2008年度: 3,300千円 (直接経費: 3,300千円)
キーワード蛋白質超分子 / Muファージ / ベースプレート / 自己組織化 / バクテリオファージ / 分子間相互作用 / 分子集合 / 感染
研究概要

Muファージの尾部基盤の分子集合・自己組織化による自律的な形態形成の過程を解明するために、基盤を構成するgp41、gp45、gp46の組み換え体蛋白質の精製と解析を行った。それぞれの蛋白質は効率よく大腸菌で発現し、容易に精製することができた。gp46は発現時に沈殿してしまう画分も見られたが、その沈殿を懸濁し500気圧で8時間放置することにより、容易に可溶化できることがわかった。
それぞれの蛋白質のX線結晶解析のための結晶化を試みたが、よい結晶は得られなかった。そこでMuファージgp45とアミノ酸配列で相同性をもち、機能が同じと考えられているP2ファージのgpVについてそのC端ドメインの発現と結晶化を行ったところ、よい回折を示す結晶が得られた。その格子定数はa=71.0Å、b=67.4Å、c=72.1 α=90°Å、β=99.8°、γ=90°であった。回折像はおよそ2.1オングストロームの分解能を示した。現在、同型重原子置換体の作製を行っている。

報告書

(2件)
  • 2009 実績報告書
  • 2008 実績報告書
  • 研究成果

    (15件)

すべて 2010 2009 2008 その他

すべて 雑誌論文 (8件) (うち査読あり 8件) 学会発表 (3件) 図書 (1件) 備考 (2件) 産業財産権 (1件)

  • [雑誌論文] The N-terminal domain of GPR61, an orphan G protein-coupled receptor, is essential for its constitutive activity2009

    • 著者名/発表者名
      M.Toyooka, et al.
    • 雑誌名

      J.Neurosci.Res. 87

      ページ: 1329-1333

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Production and characterization of the recombinant human μ-opioid receptor from transgenic silkworms2009

    • 著者名/発表者名
      M.Tateno, et al.
    • 雑誌名

      J.Biochem.(Tokyo) 145

      ページ: 37-42

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Efficient Silkworm Expression of Human GPCR(Nociceptin Receptor)by a Bombyx mori Bacmid DNA System2009

    • 著者名/発表者名
      M.Kajikawa, et al.
    • 雑誌名

      Biochem.Biophys.Res.Commun.Biochem. 386

      ページ: 375-379

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Observation of the membrane binding activity and domain structure of gpV, which comprises the tail spike of bacteriophage P22009

    • 著者名/発表者名
      Y.Kageyama, et al.
    • 雑誌名

      Biochemistry 48

      ページ: 10129-10135

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Morphine is an exogenous ligand for MrgX2, a G proteincoupled rec eptor for cortistatin2008

    • 著者名/発表者名
      Akuzawa N., et.al.
    • 雑誌名

      J. Cell Animal Biol. 2

      ページ: 4-9

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Identification of novel peptide agonists from a random peptide library for a 5oxo-ETE receptor, a receptor for bioactive lipids2008

    • 著者名/発表者名
      Sasaki Y., et.al.
    • 雑誌名

      J. Peptide Sci. 14

      ページ: 1251-125

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Production and characterization of the recombinant human μ-opioid receptor from transgenic silkworms2008

    • 著者名/発表者名
      Tateno M., et.al.
    • 雑誌名

      J. Biochem. (Tokyo) 145

      ページ: 37-42

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] The Nterminal domain of GPR61, an orphan G proteincoupled receptor, is essential for its constitutive activity2008

    • 著者名/発表者名
      Toyooka M., et.al.
    • 雑誌名

      J. Neurosci. Res. 87

      ページ: 1329-1333

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] G protein-coupled receptors and insulin secretion ; Drug screening for type 2 diabetes2010

    • 著者名/発表者名
      武田茂樹
    • 学会等名
      国際内分泌学会大会
    • 発表場所
      京都
    • 年月日
      2010-03-30
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [学会発表] 糸状菌培養液からのGタンパク質共役受容体のリガンド検索2008

    • 著者名/発表者名
      遠山和也他
    • 学会等名
      日本生化学会年会
    • 発表場所
      神戸
    • 年月日
      2008-12-12
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] 糸状菌培養液からの機能不明G蛋白質共役受容体(GPCR)の新規リガンド検索2008

    • 著者名/発表者名
      遠山和也他
    • 学会等名
      日本生化学会年会関東支部例会
    • 発表場所
      群馬
    • 年月日
      2008-06-21
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [図書] 4u(フオーユー)2009

    • 著者名/発表者名
      武田茂樹
    • 総ページ数
      2
    • 出版者
      首都圏北部4大学連合
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [備考]

    • URL

      http://takedalab.bce.gunma-u.ac.jp

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [備考]

    • URL

      http://takedalab.bce.gunma-u.ac.jp

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [産業財産権] GPR119アゴニスト2009

    • 発明者名
      武田茂樹他
    • 権利者名
      群馬大学
    • 産業財産権番号
      2009-034072
    • 出願年月日
      2009-02-17
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書

URL: 

公開日: 2008-04-01   更新日: 2018-03-28  

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