生命に内在する蛋白質接着反応の多面的活用

• 研究課題/領域番号: 20200072
• 研究種目: 新学術領域研究(研究課題提案型)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 応用生物化学; 応用分子細胞生物学
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 人見 清隆 名古屋大学, 生命農学研究科, 准教授 (00202276)
• 連携研究者: 神谷 典穂 九州大学, 大学院・工学系研究科, 教授 (50302766) ; 松藤 千弥 東京慈恵会医科大学, 医学部, 教授 (50192753)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 33,800千円 (直接経費: 26,000千円、間接経費: 7,800千円); 2010年度: 11,050千円 (直接経費: 8,500千円、間接経費: 2,550千円); 2009年度: 11,050千円 (直接経費: 8,500千円、間接経費: 2,550千円); 2008年度: 11,700千円 (直接経費: 9,000千円、間接経費: 2,700千円)
• キーワード: 酵素 / 基質 / カルシウム / 蛋白質接着 / 基質配列 / トランスグルタミナーゼ / タンパク質架橋 / 翻訳後修飾 / 表皮

研究概要

私たちの体内では、必要に応じ、機能を持ったタンパク質が接着される反応がある。例えば血液凝固や皮膚表皮の形成である。これはトランスグルタミナーゼと言う酵素により為され、高等動物では8種類のアイソザイム(同一反応をするが役割や存在場所が異なる)がある。本研究ではこれらの酵素反応の生理機能の解明を高反応な基質ペプチドを探索して進め、このペプチド(配列)を用いた様々な技術への応用を試みた。

研究成果

• [雑誌論文] Knocking-in the R142C mutation in transglutaminase 1 disrupts the stratum comeum barrier and postnatal survival of mice (2012)
  • 著者名/発表者名: Nakagawa N, Yamamoto M., Hitomi K, (他 10名)Yamanishi K.
  • 雑誌名: J. Dermatol. Sci. 巻: 65 ページ: 192-206
  • 査読あり
• [雑誌論文] Knocking-in the R142C mutation in transglutaminase 1 disrupts the stratum corneum barrier and postnatal survival of mice (2012)
  • 著者名/発表者名: Nakazawa N, Yamamoto M., Hitomi K, Yamanishi K., 他10名
  • 雑誌名: Journal of Dermatological Science 巻: 65 号: 3 ページ: 196-206
  • DOI: 10.1016/j.jdermsci.2011.12.011
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hornerin is a component of the epidermal comified cell envelopes (2011)
  • 著者名/発表者名: Henry J, Hitomi K., Simon M., (他8名)
  • 雑誌名: FASEB J. 巻: 25(5) ページ: 1567-1576
  • 査読あり
• [雑誌論文] Screening of substrate peptide sequences for tissue-type transglutaminase (TGase 2) Using T7 Phage cDNA Library (2011)
  • 著者名/発表者名: Sugimura, Y. Yamashita H. Hitomi K.
  • 雑誌名: Cytotechnology 巻: 63(2) ページ: 111-118
  • 査読あり
• [雑誌論文] In situ detection of active transglutaminases for keratinocyte-type (TGase 1) and tissue-type (TGase 2) using fluorescence-labeled highly reactive substrate peptides (2011)
  • 著者名/発表者名: Itoh M., Kawamoto T., Tatsukawa H., Kojima S., Yamanishi, K., Hitomi. K.
  • 雑誌名: J. Histochem. Cytochem. 巻: 59 ページ: 180-187
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of a preferred substrate peptide for transglutaminase 3 and detection of in situ activity in skin and hair follicles (2011)
  • 著者名/発表者名: Yamane, A., Fukui, M., Sugimura, Y., Itoh, M., Alea, M. P, Said, El Alaoui, Akiyama, M., Hitomi, K.
  • 雑誌名: FEBS J. 巻: 277 ページ: 3564-3574
  • 査読あり
• [雑誌論文] In situ detection of active transglutaminases for keratinocyte-type (TGase 1) and tissue-type (TGase 2) using fluorescence-labeled highly reactive substrate peptides (2011)
  • 著者名/発表者名: Itoh, H, Kawamoto T., Hitomi K, 他3名
  • 雑誌名: Journal of Histochemistry and Cytochemistry 巻: 59 ページ: 180-187
  • 査読あり
• [雑誌論文] Screening of substrate peptide sequences for tissue-type transglutaminase (TGase 2) Using T7 Phage cDNA Library (2011)
  • 著者名/発表者名: Sugimura. Y, Yamashita, K., Hitomi K.
  • 雑誌名: Cytotechnology 巻: 59 ページ: 180-187
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hornerin is a component of the epidermal comified cell envelopes (2011)
  • 著者名/発表者名: Henry, J, Hitomi, K, Simon M, 他10名
  • 雑誌名: FASEB Journal 巻: 25 号: 5 ページ: 1567-1576
  • DOI: 10.1096/fj.10-168658
  • 査読あり
• [雑誌論文] The cystatin M/E-cathepsin L balance is essential for tissue homeostasis in epidermis, hair follicles, and cornea (2010)
  • 著者名/発表者名: Zeeuwen PM., van Vlijmen-Willems I., Rodijk-Olthuisl, D., Hitomi K., Schalkwijk J., (他5名)
  • 雑誌名: FASEB J. 巻: 24 ページ: 3744-3755
  • 査読あり
• [雑誌論文] Transglutaminase 1 Preferred Substrate Peptide K5 Is an Efficient Tool in Diagnosis of Lamellar Ichthyosis (2010)
  • 著者名/発表者名: Akiyama M., Hitomi K. and Shimizu, H., (他4名)
  • 雑誌名: Am. J. Pathol. 巻: 129 ページ: 2306-2309
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of a preferred substrate peptide for transglutaminase 3 and detection of in situ activity in skin and hair follicles (2010)
  • 著者名/発表者名: Yamane, A., Fukui M.Hitomi, et al.(他5名)
  • 雑誌名: FEBS Journal 巻: 277 ページ: 3564-3574
  • 査読あり
• [雑誌論文] Transglutaminase 1 preferred substrate peptide K5 is an efficient tool in diagnosis of lamellar ichthyosis. (2010)
  • 著者名/発表者名: Akiyama M, Sakai K, Teruki K, Yanagi T, Fukushima S, Ihn H, Hitomi K, Shimizu, H
  • 雑誌名: American Journal Pathology 129 ページ: 306-2309
  • 査読あり
• [雑誌論文] A Specific Colorimetric assay for measuring of transglutaminase 1 and factor XIII activities (2009)
  • 著者名/発表者名: Hitomi, K., Kitamura, M., Alea, M. P., Ismail, C., Thomas, V., Alaoui, S El.
  • 雑誌名: Anal. Biochem. 巻: 394 ページ: 281-283
  • 査読あり
• [雑誌論文] A biochemical pathway that controls skin barrier formation: expression of its key components in inflammatory skin diseases and in reconstructed skin (2009)
  • 著者名/発表者名: Cheng, T., Hitomi K., Schalkwijk, J. Zeeuwen, P.L.J.M., (他3名)
  • 雑誌名: Br J. Dermatol. 巻: 161 ページ: 253-264
  • 査読あり
• [雑誌論文] タンパク質架橋化酵素の高反応性基質配列の探索と活用 (2009)
  • 著者名/発表者名: 人見清隆
  • 雑誌名: 生化学 巻: vol81.No.8. ページ: 708-711
  • NAID: 10026298303
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of an isozyme-specific colorimetric assay for tissue transglutaminase 2 cross-linking assay (2009)
  • 著者名/発表者名: Alea, M. P., Kitamura, M., Martin, G., Thomas, V., Hitomi, K., Alaoui, S El.
  • 雑誌名: Anal. Biochem. 巻: 389 ページ: 150-156
  • 査読あり
• [雑誌論文] A Specific Colorimetric assay for measuring of transglutaminase 1 and factor XIII activities. (2009)
  • 著者名/発表者名: Hitomi, K., Kitamura, M., Alea, M.P., Ismail, Thomas, V., Alaoui. S El.
  • 雑誌名: Analytical Biochemistry 394 ページ: 281-284
  • 査読あり
• [雑誌論文] The cystatin M/E-controlled of skin barrier formation : expression of its key components in psoriasis and atopic dermatitis. (2009)
  • 著者名/発表者名: Cheng, T., Tiabringa GS, van-Vlijmen-Willems IM, Hitomi K, van Erp PE, Shalkwilk J, Zeeuwen, PM
  • 雑誌名: British Journal of Dermatology 161 ページ: 253-264
  • 査読あり
• [雑誌論文] Preferred substrate sequences for transglutaminase 2 : screening using a phage-displayed peptide library (2009)
  • 著者名/発表者名: Hitomi K., Kitamura Y.,Sugimura Y
  • 雑誌名: Amino Acids 36 ページ: 619-624
  • 査読あり
• [雑誌論文] タンパク質架橋化酵素の高反応性基質配列の探索と活用 (2009)
  • 著者名/発表者名: 人見清隆
  • 雑誌名: 生化学 8 ページ: 708-711
  • NAID: 10026298303
• [雑誌論文] Development of an isozyme-specific colorimetric assay for tissue transglutaminase 2 cross-linking assay. (2009)
  • 著者名/発表者名: Alea, M.P., Kitamura, M., Martin, G., Thomas, V., Hitomi, K., Alaoui, S El.
  • 雑誌名: Analytical Biochemistry 389 ページ: 150-156
  • 査読あり
• [学会発表] トランスグルタミナーゼが触媒するタンパク質のポリアミン修飾による生理機能の調節 (2012)
  • 著者名/発表者名: 人見清隆
  • 学会等名: 日本農芸化学会(大会シンポジウム)
  • 発表場所: 京都女子大学(招待講演)
  • 年月日: 2012-03-25
• [学会発表] ヒト前立腺型タンパク質架橋化酵素の発現と前立腺由来タンパク質の基質配列解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 樋口幾、福井美奈、伊藤みほ、人見清隆
  • 学会等名: 日本農芸化学会大会
  • 発表場所: 京都女子大学
  • 年月日: 2012-03-24
• [学会発表] モデル生物としてのメダカ(Oryzias latipes)におけるタンパク質架橋化酵素の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 斉藤麻衣、樋口幾、福井美奈、伊藤みほ、人見清隆
  • 学会等名: 日本農芸化学会大会
  • 発表場所: 京都女子大学
  • 年月日: 2012-03-24
• [学会発表] Characterization of medaka transglutaminases, a protein cross-linking enzyme family (2011)
  • 著者名/発表者名: 斉藤麻衣、伊藤みほ、人見清隆
  • 学会等名: Startegic Meeting for Medaka Reasearch
  • 発表場所: Okazaki Conference Center, Aichi(招待講演)
  • 年月日: 2011-11-23
• [学会発表] タンパク質架橋化酵素トランスグルタミナーゼの高反応性基質配列の探索と多面的活用 (2011)
  • 著者名/発表者名: 人見清隆
  • 学会等名: 酵素工学研究会
  • 発表場所: 東京大学山上会館(招待講演)
  • 年月日: 2011-09-29
• [学会発表] 蛋白質架橋化酵素ファミリーの新規アイソザイムの発現解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 清水由隆、福井美奈、伊藤みほ、人見清隆
  • 学会等名: 日本生化学会大会
  • 発表場所: 京都国際会議場(招待講演)
  • 年月日: 2011-09-23
• [学会発表] 新規なヒト蛋白質架橋化酵素アイソザイムの高反応性基質配列の解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 鞍本克真、福井美奈、伊藤みほ、人見清隆
  • 学会等名: 日本生化学会大会
  • 発表場所: 京都国際会議場
  • 年月日: 2011-09-23
• [学会発表] タンパク質架橋化酵素の蛍光標識高反応性基質ペプチドを用いたマウス胎児組織 (2011)
  • 著者名/発表者名: 伊藤みほ、川本忠文、人見清隆
  • 学会等名: 日本生化学会大会
  • 発表場所: 京都国際会議場
  • 年月日: 2011-09-23
• [学会発表] Identification of the preferred substrate sequences for transglutaminase and utility for detection of activity in an isozyme-specific manner (2011)
  • 著者名/発表者名: 人見清隆
  • 学会等名: 日本生化学会大会シンポジウム
  • 発表場所: 京都国際会議場(招待講演)
  • 年月日: 2011-09-21
• [学会発表] タンパク質架橋化酵素の高反応性基質配列の探索と活用 (2011)
  • 著者名/発表者名: 伊藤みほ、福井美奈、鞍本克真、清水由隆、人見清隆
  • 学会等名: 動物細胞工学会
  • 発表場所: 東京大学山上会館
  • 年月日: 2011-07-23
• [学会発表] 全マウス組織切片を用いたタンパク質架橋化酵素活性の可視化 (2011)
  • 著者名/発表者名: 伊藤みほ、川本忠文、柴田秀樹、牧正敏、人見清隆
  • 学会等名: 日本農芸化学会大会
  • 発表場所: (要旨集)
  • 年月日: 2011-03-27
• [学会発表] 新規タンパク質架橋化酵素Tgase 6の高反応性基質配列の探索 (2011)
  • 著者名/発表者名: 鞍本克真、福井美奈、清水由隆、柴田秀樹、牧正敏、人見清隆
  • 学会等名: 日本農芸化学会大会
  • 発表場所: (要旨集)
  • 年月日: 2011-03-27
• [学会発表] Characterization of medaka transg/Utamirlases, a protein cross-linking enzyme family (2011)
  • 著者名/発表者名: 斉藤麻衣、樋口幾、伊藤みほ、人見清隆
  • 学会等名: Medaka Strategic Research
  • 発表場所: 岡崎(愛知県)
• [学会発表] タンパク質架橋化酵素トランスグルタミナーゼの高反応性基質配列の探索と多面的活用 (2011)
  • 著者名/発表者名: 人見清隆
  • 学会等名: 酵素工学会
  • 発表場所: 東京(東京大学山上会館)
• [学会発表] Identification of the preferred substrate sequences for transglutaminase and utility for detection of activity in an isozyme-specific manner (2011)
  • 著者名/発表者名: 人見清隆
  • 学会等名: 日本生化学会大会シンポジウム
  • 発表場所: 京都国際会議場
• [学会発表] タンパク質架橋化酵素の高反応性基質配列の探索と活用 (2011)
  • 著者名/発表者名: 伊藤みほ、福井美奈、鞍本克真、清水由隆、人見清隆
  • 学会等名: 日本動物細胞工学会
  • 発表場所: 東京(東京大学山上会館)
• [学会発表] Identification of highly reactive substrate peptides for transglutaminases from random peptide library and their applications (2010)
  • 著者名/発表者名: Kiyotaka Hitomi
  • 学会等名: Gordon Research Conference
  • 発表場所: Davidson College(米国)
  • 年月日: 2010-07-19
• [学会発表] 高等動物トランスグルタミナーゼの高反応性基質配列の探索と活用 (2010)
  • 著者名/発表者名: 人見清隆
  • 学会等名: 日本農芸化学会2010年大会
  • 発表場所: 東京大学(東京都)
  • 年月日: 2010-03-30
• [学会発表] 機能未知なタンパク質架橋化酵素(TG6)の高反応性基質配列の探索 (2010)
  • 著者名/発表者名: 福井美奈、山根亜沙佳、伊藤みほ、人見清隆
  • 学会等名: 生化学会大会分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸国際会議場
• [学会発表] 表皮特異的タンパク質架橋化酵素(TG3)の高反応性基質配列の解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 山根亜沙佳、福井美奈、伊藤みほ、人見清隆
  • 学会等名: 生化学会大会分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸国際会議場
• [学会発表] 分化段階の骨芽細胞株におけるタンパク質架橋化酵素トランスグルタミナーゼの基質解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 渡邊一哉、人見清隆
  • 学会等名: 生化学会大会分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸国際会議場
• [学会発表] タンパク質架橋化酵素の高反応性基質ペプチドを活用したマウス全組織内酵素活性の可視化 (2010)
  • 著者名/発表者名: 伊藤みほ、川本忠文、人見清隆
  • 学会等名: 農芸化学会中部支部例会
  • 発表場所: 名古屋(名古屋大学)
• [学会発表] Screeninig and identification of the preferred substrate sequences for tranglutaminase 3 using phage-display peptide library (2010)
  • 著者名/発表者名: 山根亜沙佳、福井美奈、伊藤みほ、人見清隆
  • 学会等名: ゴードン国際会議
  • 発表場所: 米国
• [学会発表] Detection of in situ activities of transglutaminases using highly reactive substrate peptides (2010)
  • 著者名/発表者名: 伊藤みほ、川本忠文、人見清隆
  • 学会等名: ゴードン国際会議
  • 発表場所: 米国
• [学会発表] Identification of highly reactive substrate peptides for transglutaminases from random peptide library and its application (2010)
  • 著者名/発表者名: 人見清隆
  • 学会等名: ゴードン国際会議
  • 発表場所: 米国
• [学会発表] タンパク質架橋化酵素トランスグルタミナーゼの高反応性基質配列の解明と活用 (2010)
  • 著者名/発表者名: 人見清隆
  • 学会等名: 天野エンザイム応用酵素シンポジウム
  • 発表場所: 名古屋
• [学会発表] Establishment of a novel assay system for transglutaminase using highly reactive substrate peptide (2010)
  • 著者名/発表者名: 人見清隆
  • 学会等名: 国際ポリアミン学会
  • 発表場所: 静岡(御殿場)
• [学会発表] ヒト表皮型タンパク質架橋化酵素(TGase 3)の高反応性基質配列の探索と解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 福井美奈、山根亜沙佳、伊藤みほ、人見清隆, 他
  • 学会等名: 生化学会中部支部例会
  • 発表場所: 名古屋(名古屋大学)
• [学会発表] ヒト表皮型トランスグルタミナーゼに対する高反応性基質配列の探索と解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 福井美奈、山根亜沙佳、柴田秀樹、牧正敏、人見清隆
  • 学会等名: 日本農芸化学会大会
  • 発表場所: 東京・東京大学
• [学会発表] 高等動物トランスグルタミナーゼの高反応性基質配列の探索と活用 (2010)
  • 著者名/発表者名: 人見清隆
  • 学会等名: 日本農芸化学会大会シンポジウム
  • 発表場所: 東京・東京大学
• [学会発表] タンパク質を架橋接着する酵素(トランスグルタミナーゼ)の高反応性基質配列の探索と多面的活用 (2009)
  • 著者名/発表者名: 人見清隆
  • 学会等名: 山形バイオカフェ
  • 発表場所: 山形県鶴岡市先端研究産業センター(山形県)
  • 年月日: 2009-12-16
• [学会発表] タンパク質架橋酵素の高反応性基質ペプチドの探索とその有効活用 (2009)
  • 著者名/発表者名: 人見清隆
  • 学会等名: 日本生化学会第82回大会
  • 発表場所: 神戸国際会議場(神戸市)
  • 年月日: 2009-10-23
• [学会発表] 生体内タンパク質接着酵素反応における高反応性基質ペプチドの探索とその多面的活用 (2009)
  • 著者名/発表者名: 人見清隆
  • 学会等名: 東京慈恵会医科大学セミナー
  • 発表場所: 慈恵会医科大学(東京都)
  • 年月日: 2009-09-11
• [学会発表] Characterization of the preferred substrate sequence for transglut aminase, an enzyme for protein cross-linking and polyamine-conjugation (2009)
  • 著者名/発表者名: Kiyotaka Hitomi
  • 学会等名: Gordon Research Conference : Polyamines
  • 発表場所: Waterville Valley (NJ, USA)
  • 年月日: 2009-06-23
• [学会発表] トランスグルタミナーゼの骨芽細胞株における発現と架橋化酵素活性の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 渡辺一哉、角田佳奈子、柴田秀樹、牧正敏、人見清隆
  • 学会等名: 第82回日本生化学会大会
  • 発表場所: 神戸国際展示場
• [学会発表] タンパク質架橋酵素の高反応性基質ペプチドの探索とその有効活用 (2009)
  • 著者名/発表者名: 人見清隆
  • 学会等名: 第82回日本生化学会大会シンポジウム
  • 発表場所: 神戸国際会議場
• [学会発表] 生体内タンパク質接着反応における高反応性基質と多面的活用 (2009)
  • 著者名/発表者名: 人見清隆
  • 学会等名: 慈恵会医科大学分子生物セミナー
  • 発表場所: 東京・慈恵会医科大学
• [学会発表] (2009)
  • 著者名/発表者名: Kiyotaka HITOMI
  • 学会等名: ゴードン国際会議「ポリアミン」
  • 発表場所: アメリカニューハンプシャー州
• [学会発表] トランスグルタミナーゼに対する高反応性基質ペプチドを活用した活性検出法の確立
  • 著者名/発表者名: 伊藤みほ、柴田秀樹、牧正敏、人見清隆
  • 学会等名: 日本農芸化学会大会
  • 発表場所: 東京・東京大学