膜貫通型蛋白質マイクロゾーマルプロスタグランジンE2合成酵素1のX線結晶構造解析

• 研究課題/領域番号: 20370042
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 構造生物化学
• 研究機関: 独立行政法人理化学研究所
• 研究代表者: 吾郷 日出夫 独立行政法人理化学研究所, 宮野構造生物物理研究室, 専任研究員 (70360477)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 14,300千円 (直接経費: 11,000千円、間接経費: 3,300千円); 2010年度: 2,730千円 (直接経費: 2,100千円、間接経費: 630千円); 2009年度: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2008年度: 7,020千円 (直接経費: 5,400千円、間接経費: 1,620千円)
• キーワード: アラキドン酸カスケード / 膜タンパク質 / X線結晶構造解析 / プロスタグランジンE2 / 膜蛋白質 / 結晶化 / 膜蛋白 / X線結晶構造 / 蛋白質改変 / 酵素活性 / モノクローナル抗体

研究概要

ヒト由来膜タンパク質であるマイクロゾーマルプロスタグランジンE2合成酵素1(mPGES1)を、X線結晶構造解析に供しうる質と量を満足するレベルで、分裂酵母Schizosaccharomyces pombeを使い組換え体として、生産精製することが可能になった。組換えヒト由来mPGES1は、二種類の結晶化条件で結晶を与えた。

研究成果

• [雑誌論文] The catalytic architecture of Leukotriene C4 synthase with two arginine residues (2011)
  • 著者名/発表者名: Saino H., Ago H., et al.
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. (In press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] システインロイコトリエン研究の新知見 (2010)
  • 著者名/発表者名: 吾郷日出夫、宮野雅司
  • 雑誌名: 日本結晶学会誌 52 ページ: 69-75
  • NAID: 10026107914
• [学会発表] プロスタグランジンE_2合成酵素1の結晶化-結晶の改善 (2010)
  • 著者名/発表者名: 齊野廣道
  • 学会等名: 日本結晶学会平成22年度年会
  • 発表場所: 吹田市
  • 年月日: 2010-12-05
• [学会発表] プロスタグランジンE_2合成酵素1の結晶化法の改良 (2010)
  • 著者名/発表者名: 齊野廣道
  • 学会等名: 平成22年度日本結晶学会年会
  • 発表場所: 吹田市
  • 年月日: 2010-12-05
• [学会発表] Synchrotron radiation structural biology of proteins functioning at biological memebrane (2010)
  • 著者名/発表者名: 吾郷日出夫
  • 学会等名: 第27回内藤コンファレンス 生体膜ダイナミクスと脂質生物学[I]
  • 発表場所: 札幌市
  • 年月日: 2010-06-30
• [学会発表] Synchrotron radiation structural biology of proteins functioning at biological membrane (2010)
  • 著者名/発表者名: 吾郷日出夫
  • 学会等名: 第27回内藤コンファレンス生体膜ダイナミクスと脂質生物学[I]
  • 発表場所: 札幌市
  • 年月日: 2010-06-30
• [学会発表] The distinct role of two arginine residues in the leukotriene A4-specific glutathione S-transferase activity of LTC4 synthase (2010)
  • 著者名/発表者名: 齊野廣道
  • 学会等名: Keystone symposia on molecular and cellular biology bioactive lipids biochemistry and diseases
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 2010-06-07
• [学会発表] The distinct role of two arginine residues in the leukotriene A_4-specific glutathione S-transferase activity of LTC_4 synthase (2010)
  • 著者名/発表者名: 齊野廣道
  • 学会等名: Keystone Symposia on Molecular and Cellular Biology, Bioactive Lipids : Biochemistry and Diseases
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 2010-06-07
• [学会発表] プロスタグランジンE_2合成酵素1の大量発現精製と結晶化 (2009)
  • 著者名/発表者名: 吾郷日出夫
  • 学会等名: 日本結晶学会平成21年度年会
  • 発表場所: 西宮市
• [学会発表] プロスタグランジンE_2合成酵素1の大量発現精製と結晶化 (2009)
  • 著者名/発表者名: 吾郷日出夫
  • 学会等名: 日本結晶学会年会
  • 発表場所: 関西学院大学上ヶ原キャンパス(兵庫県西宮市)
• [学会発表] ロイコトリエンC_4合成酵素の変異体による酵素触媒機構の解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 吾郷, 日出夫
  • 学会等名: BMB2008
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2008-12-12