研究課題
基盤研究(B)
oriCプラスミドを用いた試験管内DNA複製系での生化学的解析により、複製フォーク進行阻害の回復について大きな進展が見られた。損傷乗り越え型DNAポリメラーゼであるDNA Pol IV (DinB)はLeading鎖およびLagging鎖上のDNA損傷部位でバイパスDNA合成を極めて効率良く行い、Leading鎖上の損傷で停止していた複製フォークが再開することが観察された。また、精製した酵素を用いた生化学的な解析により、Pol III HEのDNA鎖伸長がPol IVによって強く阻害されることを発見し、阻害の仕組みとして、Pol IVがPol Vを積極的に鋳型DNAから解離させること明らかにした。その後の解析により、DNA上でβクランプと安定に結合しているPol IIIがDinBの働きによりDNAから解離することが見いだされた。この発見は、世界ではじめてDNA損傷による複製フォークの阻害が損傷乗り越え型DNAポリメラーゼの働きにより解消されて再開することを示したことになる。
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