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微生物のエンドグリコシダーゼの変異酵素を活用した糖鎖医薬品の開発と調製法の確立

研究課題

研究課題/領域番号 20380052
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 応用微生物学
研究機関京都大学

研究代表者

山本 憲二  京都大学, 生物資源環境学部, 客員教授 (70109049)

研究分担者 芦田 久  京都大学, 大学院・生命科学研究科, 准教授 (40379087)
研究期間 (年度) 2008 – 2010
研究課題ステータス 完了 (2010年度)
配分額 *注記
19,110千円 (直接経費: 14,700千円、間接経費: 4,410千円)
2010年度: 4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円)
2009年度: 5,200千円 (直接経費: 4,000千円、間接経費: 1,200千円)
2008年度: 9,230千円 (直接経費: 7,100千円、間接経費: 2,130千円)
キーワードエンドグリコシダーゼ / 糖転移活性 / オキサゾリン化合物 / 部位特異的変異酵素 / 化学-酵素合成 / 糖鎖医薬品 / インフルエンザウィルス / 感染阻害剤 / substrate assisted catalysis / サブスタンスP / PAMP12 / リボヌクレアーゼB / シアロ糖鎖 / インフルエンザウイルス / 変異酵素
研究概要

土壌より単離したカビMucor hiemalisが生産する特異的な糖鎖分解酵素(エンド-β-N-アセチルグルコサミニダーゼ)はタンパク質より加水分解した糖鎖を化合物に付加する活性(糖転移活性)を持っている。この反応を効率良く行う変異酵素を取得して、機能性を持つ糖鎖複合体の合成に用いた。すなわち、反応中間体(オキサゾリン糖鎖誘導体)を合成し、それを基質として用いた変異酵素による効率的な合成方法を開発するとともに、インフルエンザウィルス感染阻害剤などの医薬品の調製に応用した。

報告書

(4件)
  • 2010 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2009 実績報告書
  • 2008 実績報告書
  • 研究成果

    (36件)

すべて 2010 2009 2008 その他

すべて 雑誌論文 (11件) (うち査読あり 11件) 学会発表 (19件) 図書 (4件) 備考 (2件)

  • [雑誌論文] Efficient Transfer of Sialo-oligosaccharides onto Proteins by Combined Use of a Glycosynthase-like Mutant of Mucor hiemalis Endoglycosidase and Synthetic Sialo-complex-type Sugar Oxazoline.2010

    • 著者名/発表者名
      M.Umekawa, T.Higashiyama, Y.Koga, T.Tanaka, M.Noguchi, A.Kobayashi, S.Shoda, W.Huang, L.-X.Wang, H.Ashida, K.Yamamoto
    • 雑誌名

      Biochim. Biophys. Acta 1800

      ページ: 1203-1209

    • NAID

      120002647341

    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Efficient Glycosynthase Mutant Derived from Mucor hiemalis Endo-β-N-acetylglucosaminidase Capable of Transferring Oligosaccharide from Both Sugar Oxazoline and Natural N-Glycan.2010

    • 著者名/発表者名
      M.Umekawa, C.Li, T.Higashiyama, W.Huang, H.Ashida, K.Yamamoto, L.-X.Wang
    • 雑誌名

      J. Biol. Chem 285(1)

      ページ: 511-521

    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Efficient transfer of sialo-oligosaccharide onto proteins by combined use of a glycosynthase-like mutant of Mucor hiemalis endoglycosidase and synthetic sialo-complex-type sugar oxazoline2010

    • 著者名/発表者名
      M.Umekawa, et al.
    • 雑誌名

      Biochimica et Biophysica Acta

      巻: 1800 ページ: 1203-1209

    • 関連する報告書
      2010 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Efficient Glycosynthase Mutant Derived from Mucor hiemalis Endo-β-Nacetylglucosaminidase Capable of Transferring Oligosaccharide from Both Sugar Oxazoline and N-Glycan2010

    • 著者名/発表者名
      M.Umekawa, et al.
    • 雑誌名

      The Journal of Biological Chemistry 285

      ページ: 511-521

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Glycosynthases Enable a Highly Efficient Chemoenzymatic Synthesis of N-Glycoproteins Carrying Intact Nature N-Glycans.2009

    • 著者名/発表者名
      W.Huang, C.Li, B.Li, M.Umekawa, K.Yamamoto, X.Zhang, L.-X.Wang
    • 雑誌名

      J. Am. Chem. Soc 131(6)

      ページ: 2214-2223

    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Glycosynthases Enable a Highly Efficient Chemoenzymatic Synthesis of N-Glycoproteins Carrying Intact Nature N-Glycans2009

    • 著者名/発表者名
      W.Huang, et al.
    • 雑誌名

      Journal of The American Chemical Society 131

      ページ: 2214-2223

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Glycosynthases Enable a Highly Efficient Chemoenzymatic Synthesis of N-Glycoproteins Carrying Intact Natural N-Glyeans2009

    • 著者名/発表者名
      W. Huang, et al.
    • 雑誌名

      Journal of The American Chemical Society 131

      ページ: 2214-2223

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Design of a Sialylglycopolymer with a Chitosan Backbone Having Efficient Inhibitory Activity against Influenza Virus Infection.2008

    • 著者名/発表者名
      M.Umemura, M.Itoh, Y.Makimura, K.Yamazaki, M.Umekawa, A.Masui, Y.Matahira, M.Shibata, H.Ashida, K.Yamamoto
    • 雑誌名

      J. Med. Chem 51

      ページ: 4496-4503

    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Mutants of Mucor hiemalis Endo-β-N-acetylglucosaminidase Show Enhanced Transglycosylation and Glycosynthase-like Activities.2008

    • 著者名/発表者名
      M.Umekawa, W.Huang, B.Li, K.Fujita, H.Ashida, L.-X Wang, K.Yamamoto
    • 雑誌名

      J. Biol. Chem 283(8)

      ページ: 4469-4479

    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Mutants of Mucor hiemlis Endo-β-N-acetylglucosaminidase Show Enhanced Transglycosylation and Glycosynthase-like Activities2008

    • 著者名/発表者名
      M. Umekawa, et al.
    • 雑誌名

      The Journal of Biological Chemistry 283

      ページ: 4469-4479

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Design of a Sialylglycopolymer with a Chitosan Backbone Having Efficient Inhibitory Activity agaainst Influenza Virus Infection2008

    • 著者名/発表者名
      M. Umemura, et al.
    • 雑誌名

      Journal of Medicinal Chemstry 51

      ページ: 4496-4503

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] Endo-M変異酵素を用いた機能性糖鎖複合体の効率的な合成2010

    • 著者名/発表者名
      山本憲二
    • 学会等名
      グライコバイオロジクス研究会
    • 発表場所
      大阪千里ライフサイエンスセンター
    • 年月日
      2010-12-11
    • 関連する報告書
      2010 実績報告書 2010 研究成果報告書
  • [学会発表] グライコシンターゼ様エンドグリコシダーゼ変異酵素を用いたシアロ糖ペプチドの合成2010

    • 著者名/発表者名
      東山貴幸, ら
    • 学会等名
      日本農芸化学会2010年度大会
    • 発表場所
      東京大学
    • 年月日
      2010-03-28
    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
  • [学会発表] グライコシンターゼ様エンドグリコシダーゼ変異酵素を用いたシアロ糖ペプチドの合成2010

    • 著者名/発表者名
      東山貴幸, ら
    • 学会等名
      日本農芸化学会2010年度大会
    • 発表場所
      東京大学、東京都
    • 年月日
      2010-03-28
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [学会発表] ひとつだけの酵素を用いた効率的な糖鎖の付加とリモデリング2009

    • 著者名/発表者名
      山本憲二
    • 学会等名
      第7回糖鎖科学コンソーシアムシンポジウム
    • 発表場所
      大阪千里ライフサイエンスセンター
    • 年月日
      2009-12-07
    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
  • [学会発表] ひとつだけの酵素を用いた効率的な糖鎖の付加とリモデリング2009

    • 著者名/発表者名
      山本憲二
    • 学会等名
      第7回糖鎖科学コンソーシアムシンポジウム
    • 発表場所
      千里ライフサイエンスセンター、大阪市
    • 年月日
      2009-12-07
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [学会発表] 糸状菌由来エンドグリコシダーゼの機能改変と糖鎖複合体合成への応用2009

    • 著者名/発表者名
      東山貴幸, ら
    • 学会等名
      日本生物工学会大会第61回大会
    • 発表場所
      名古屋大学
    • 年月日
      2009-09-24
    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
  • [学会発表] ノイラミニダーゼ阻害剤によるインフルエンザウイルス捕捉型感染阻害剤の効果促進2009

    • 著者名/発表者名
      三谷誠司, ら
    • 学会等名
      日本生物工学会大会第61回大会
    • 発表場所
      名古屋大学
    • 年月日
      2009-09-24
    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
  • [学会発表] 糸状菌由来エンドグリコシダーゼの機能改変と糖鎖複合体合成への応用2009

    • 著者名/発表者名
      東山貴幸, ら
    • 学会等名
      日本生物工学会大会第61回大会
    • 発表場所
      名古屋大学、名古屋市
    • 年月日
      2009-09-24
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [学会発表] ノイラミニダーゼ阻害剤によるインフルエンザウイルス捕捉型感染阻害剤の効果促進2009

    • 著者名/発表者名
      三谷誠司, ら
    • 学会等名
      日本生物工学会大会第61回大会
    • 発表場所
      名古屋大学、名古屋市
    • 年月日
      2009-09-24
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [学会発表] 微生物由来エンドグリコシダーゼの機能改変と機能性糖鎖複合体の合成への応用2009

    • 著者名/発表者名
      梅川碧里, ら
    • 学会等名
      第29回日本糖質学会
    • 発表場所
      高山飛騨生活文化センター
    • 年月日
      2009-09-11
    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
  • [学会発表] 微生物由来エンドグリコシダーゼの機能改変と機能性糖鎖複合体の合成への応用2009

    • 著者名/発表者名
      梅川碧里, ら
    • 学会等名
      第29回日本糖質学会
    • 発表場所
      高山飛騨生活文化センター、岐阜県
    • 年月日
      2009-09-11
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [学会発表] Improvement of a Novel Glycosynthase-like Mutant of Mucor hiemalis Endoglycosidase for Efficient Syntheses of Glycoconjugates2009

    • 著者名/発表者名
      梅川碧里, ら
    • 学会等名
      15th European Carbohydrate Symposium
    • 発表場所
      ウィーン大学、オーストリア国
    • 年月日
      2009-07-20
    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
  • [学会発表] Improvement of a Novel Glycosynthase-like Mutant of Mucor hiemalis Endoglycosidase for Efficient Syntheses of Glycoconjugates2009

    • 著者名/発表者名
      梅川碧里, et al.
    • 学会等名
      15^<th> European Carbohydrate Symposium
    • 発表場所
      ウィーン大学、オーストリア国
    • 年月日
      2009-07-20
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [学会発表] シアロ糖鎖を活用したインフルエンザウイルス捕捉型感染阻害剤のデザイン2009

    • 著者名/発表者名
      梅村舞子, ら
    • 学会等名
      日本農芸化学会関西支部講演会
    • 発表場所
      京都
    • 年月日
      2009-02-07
    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書 2008 実績報告書
  • [学会発表] 糸状菌由来endo-β-N-acetylglucosaminidaseが有する特異な糖転移機能の解析とグライコシンターゼ化2009

    • 著者名/発表者名
      梅川碧里, ら
    • 学会等名
      日本農芸化学会関西支部講演会
    • 発表場所
      京都
    • 年月日
      2009-02-07
    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書 2008 実績報告書
  • [学会発表] Development of a Novel Glycosynthase Mutant of Endo-β-N-acetylglucosaminidase from Mucor hiemalis2008

    • 著者名/発表者名
      梅川碧里, ら
    • 学会等名
      24th International Carbohydrate Symposium
    • 発表場所
      オスロ、ノルウェー国
    • 年月日
      2008-07-29
    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
  • [学会発表] Simple Synthesis of Influenza Virus Binding-Inhibitor Composed of Only Sugar Chains from Natural Compounds2008

    • 著者名/発表者名
      梅村舞子, ら
    • 学会等名
      24th International Carbohydrate Symposium
    • 発表場所
      オスロ、ノルウェー国
    • 年月日
      2008-07-29
    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
  • [学会発表] Simple Synthesis of Influenza Virus Binding-Inhibitor Composed of Only Sugar Chains from Natural Compounds2008

    • 著者名/発表者名
      M. Umemura, et al.
    • 学会等名
      24th International Carbohydrate Symposium
    • 発表場所
      Oslo, Norway
    • 年月日
      2008-07-29
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] Development of a Novel Glycosynthase Mutant of Endo-β-N-acetylglucosaminidase from Mucor hiemalis2008

    • 著者名/発表者名
      M. Umekawa, et al.
    • 学会等名
      24th International Carbohydrate Symposium
    • 発表場所
      Oslo, Norway
    • 年月日
      2008-07-29
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [図書] 糖鎖化学の基礎と実用化 エンド型グリコシダーゼを用いた糖ペプチドの化学-酵素合成2010

    • 著者名/発表者名
      山本憲二
    • 出版者
      シーエムシー出版
    • 関連する報告書
      2010 実績報告書 2010 研究成果報告書
  • [図書] 糖鎖を知る ひとつだけの微生物酵素を用いて糖鎖を付ける方法2010

    • 著者名/発表者名
      山本憲二
    • 出版者
      科学技術振興機構
    • 関連する報告書
      2010 実績報告書 2010 研究成果報告書
  • [図書] 複合糖質の化学と最新応用技術2009

    • 著者名/発表者名
      梅川碧里、山本憲二
    • 出版者
      シーエムシー出版
    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
  • [図書] 複合糖質の化学と最新応用技術2009

    • 著者名/発表者名
      梅川碧里, 山本憲二(分担執筆)
    • 総ページ数
      8
    • 出版者
      シーエムシー出版
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [備考] ホームページ

    • URL

      http://www.lif.kyoto-u.ac.jp/labs/molecule/ammbio/index.html

    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
  • [備考]

    • URL

      http://www.ishikawa-pu.ac.jp/index.html

    • 関連する報告書
      2010 実績報告書

URL: 

公開日: 2008-04-01   更新日: 2016-04-21  

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