阻害剤分子プローブの創製に基づくミトコンドリア複合体ーIの膜ドメイン機能の解明

• 研究課題/領域番号: 20380068
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 生物生産化学・生物有機化学
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 三芳 秀人 京都大学, 大学院・農学研究科, 教授 (20190829)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 19,110千円 (直接経費: 14,700千円、間接経費: 4,410千円); 2010年度: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2009年度: 4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円); 2008年度: 9,620千円 (直接経費: 7,400千円、間接経費: 2,220千円)
• キーワード: 細胞機能調節物質 / ミトコンドリア / 複合体-I / 光親和性標識 / 阻害剤 / アセトゲニン / ND1サブユニット / 呼吸鎖酵素 / ペプチド化学 / 生体エネルギー

研究概要

ウシ心筋ミトコンドリア複合体-I(NADH-ユビキノン酸化還元酵素)の強力な阻害剤であるキナゾリンおよびΔlac-アセトゲニンの結合部位を光親和性標識法で明らかにするために、光反応性プローブをそれぞれ合成した([^<125>I]AzQおよび[^<125>I]DAA)。[^<125>I]AzQは、49kDaサブユニットとND1サブユニットの境界に結合することがわかった。^<125>I]DAAはND1サブユニットのマトリックス側に位置する第3ループ領域に結合することを明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Exploring the binding site of Δlac-acetogenin in bovine heart mitochondrial (2010)
  • 著者名/発表者名: Kakutani, N., Murai, M., Sakiyama, N., Miyoshi, H.
  • 雑誌名: NADH-ubiquinone oxidoreductase, Biochemistry 49 ページ: 4794-4803
  • 査読あり
• [雑誌論文] Characterization of the ubiquinone binding site in alternative NADH-quinone oxidoreductase of Saccharomyces cerevisiae by photoaffinity labeling (2010)
  • 著者名/発表者名: Murai, M., Yamashita, T., Senoh, M., Mashimo, Y., Kataoka, M., Kosaka, H., Matsuno-Yagi, A., Yagi, T., Miyoshi, H.
  • 雑誌名: Biochemistry 49 ページ: 2973-2980
  • 査読あり
• [雑誌論文] Exploring the Binding Site of Δlac-Acetogenin in Bovine Heart Mitochondrial NADH-Ubiquinone Oxidoreductase. (2010)
  • 著者名/発表者名: 角谷伸行、村井正俊、崎山直人、三芳秀人
  • 雑誌名: Biochemistry 巻: 49 ページ: 4794-4803
  • 査読あり
• [雑誌論文] Characterization of the ubiquinone binding site in the alternative NADH-quinone oxidoreductase of Saccharomyces cerevisiae by photoaffinity labeling (2010)
  • 著者名/発表者名: 村井正俊, ら (以下8名)
  • 雑誌名: Biochemistry 49 ページ: 2973-2980
  • 査読あり
• [雑誌論文] Exploring the binding site of acetogenin in the NDI subunit of bovine mitochondrial complex (2009)
  • 著者名/発表者名: Sekiguchi, K., Murai, M.,Mivoshi, H.
  • 雑誌名: I, Biochim. Biophys. Acta(Bioenergetice) 1787 ページ: 1106-1111
  • 査読あり
• [雑誌論文] Characterization of the inhibitor binding site in mitochondrial NADH-ubiquinone oxidoreductase by photoaffinity labeling using a quinazoline-type inhibitor (2009)
  • 著者名/発表者名: Murai, M., Sekiguchi, K., Nishioka, T., Miyoshi,H.
  • 雑誌名: Biochemistry 48 ページ: 688-698
  • 査読あり
• [雑誌論文] Characterization of the inhibitor binding site in maitochondrial NADH-ubiauinone oxidoreductase by (2009)
  • 著者名/発表者名: Masatoshi Murai, Koji Sekiguchi, Takaaki Nishioka, Hideto Miyoshi
  • 雑誌名: Biochemistry 48 ページ: 688-698
  • 査読あり
• [雑誌論文] Synthesis and characterization of new piperazine-type inhibitors for mitochondrial NADH-ubiquinone oxidoreductase(complex I) (2008)
  • 著者名/発表者名: Ichimaru, N., Murai, M., Kakutani, N, Kako, J., Ishihara, A., Nakagawa, Y., Nishioka, T., Yagi, T., Miyoshi
  • 雑誌名: Biochemitsry 47 ページ: 10816-10826
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dynamic fhnction of the spacer region of acetogen ins in the inhibition of bovine mitochondrial NADH-ubiquinone oxidoreductase (complex I) (2008)
  • 著者名/発表者名: Abe, M., Kubo, A., Yamamoto, S., Hatoh, Y., Murai, M., Hattori, Y., Makabe, H., Nishioka, T., Miyoshi, H.
  • 雑誌名: Biochemistry 47 ページ: 6260-6266
  • 査読あり
• [学会発表] ミトコンドリア複合体-Iに作用する光反応性フェンピロキシメートの結合部位の同定 (2011)
  • 著者名/発表者名: 村井正俊、崎山直人、白石、祐輔、安部真人、三芳秀人
  • 学会等名: 日本農芸化学会・平成23年度大会
  • 発表場所: 京都女子大学
  • 年月日: 2011-03-27
• [学会発表] ミトコンドリア複合体-Iにおけるアセトゲニンの結合部位の同定 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中西佐予、安部真人、山本修平、村井正俊、三芳秀人
  • 学会等名: 日本農芸化学会・平成23年度大会
  • 発表場所: 京都女子大学
  • 年月日: 2011-03-27
• [学会発表] ミトコンドリア複合体-Iに作用する光反応性フェンピロキシメートの結合部位の同定(1) (2011)
  • 著者名/発表者名: 村井正俊、崎山直人、白石、祐輔、安部真人、三芳秀人
  • 学会等名: 日本農薬学会・平成23年度大会
  • 発表場所: 玉川大学
  • 年月日: 2011-03-17
• [学会発表] ミトコンドリア複合体-Iに作用する光反応性フェンピロキシメートの結合部位の同定(2) (2011)
  • 著者名/発表者名: 崎山直人、村井正俊、白石、祐輔、安部真人、三芳秀人
  • 学会等名: 日本農薬学会・平成23年度大会
  • 発表場所: 玉川大学
  • 年月日: 2011-03-17
• [学会発表] ミトコンドリア複合体-I阻害剤Δlac-アセトゲニンの結合部位の解明 (2010)
  • 著者名/発表者名: 村井正俊、角谷信至、崎山直人、三芳秀人
  • 学会等名: 生体エネルギー研究会・平成22年討論会
  • 発表場所: 大阪大学銀杏会館
  • 年月日: 2010-11-19
• [学会発表] ミトコンドリア複合体-I阻害剤Δlac-アセトゲニンの結合部位の同定 (2010)
  • 著者名/発表者名: 村井正俊、角谷信至、崎山直人、三芳秀人
  • 学会等名: 日本農薬学会・平成22年度大会
  • 発表場所: 北海道大学学術交流会館
  • 年月日: 2010-05-29
• [学会発表] ミトコンドリア複合体-l阻害剤△lac-アセトゲニンの結合部位の同定 (2010)
  • 著者名/発表者名: 村井正俊, ら
  • 学会等名: 日本農芸化学会2010年度大会
  • 発表場所: 東京大学駒場キャンパス
  • 年月日: 2010-03-29
• [学会発表] 光親和性標識法によるキナゾリン型阻害剤のミトコンドリア複合体-Iにおける結合部位の解明 (2009)
  • 著者名/発表者名: 村井正俊、関口孝治、三芳秀人
  • 学会等名: 生体エネルギー研究会・平成20年討論会
  • 発表場所: 東京医科歯科大学5号館講堂
  • 年月日: 2009-11-06
• [学会発表] ミトコンドリア複合体-Iに作用するアセトゲニンの結合部位の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 村井正俊、関口孝治、三芳秀人
  • 学会等名: 日本農薬学会・平成21年度大会
  • 発表場所: 東京大学弥生講堂
  • 年月日: 2009-03-18
• [学会発表] 光親和性標識法によるミトコンドリア複合体-I阻害剤キナゾリンの結合部位の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 関口孝治、村井正俊、三芳秀人
  • 学会等名: 日本農薬学会・平成21年度大会
  • 発表場所: 東京大学弥生講堂
  • 年月日: 2009-03-18
• [図書] 月刊誌『化学』最近のトピックス「呼吸鎖酵素最後の秘境:複合体-Iの構造と機能」 (2011)
  • 著者名/発表者名: 村井正俊、三芳秀人
  • 総ページ数: 2
  • 出版者: 化学同人
• [備考] ホームページ等
  • URL: http://www.biofunc-chem.kais.kyoto-u.acjp/
• [備考]
  • URL: http://www.biofunc-chem.kais.kyoto-u.ac.jp/
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  • URL: http://www.biofunc-chem.kais.kyoto-u.ac.jp/
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