光アフィニティーキャプチャーによるナノモルタンパク質の機能部位解析法開発

• 研究課題/領域番号: 20390032
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 創薬化学
• 研究機関: 富山大学
• 研究代表者: 畑中 保丸 富山大学, 大学院・医学薬学研究部, 教授 (30111181)
• 研究分担者: 友廣 岳則 富山大学, 大学院・医学薬学研究部(薬学), 准教授 (70357581)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 19,370千円 (直接経費: 14,900千円、間接経費: 4,470千円); 2010年度: 5,590千円 (直接経費: 4,300千円、間接経費: 1,290千円); 2009年度: 6,500千円 (直接経費: 5,000千円、間接経費: 1,500千円); 2008年度: 7,280千円 (直接経費: 5,600千円、間接経費: 1,680千円)
• キーワード: 創薬基礎技術 / 薬物結合部位 / 質量分析 / 光アフィニティー / 光プローブ / 膜タンパク質 / 機能部位 / 構造解析 / ペルオキシソーム / β-酸化酵素 / ATP / 固相技術

研究概要

創薬技術の進歩により、現在ではコンピューター画像でタンパク質の構造を描き出し、その中枢部にうまくフィットするように設計した薬物(分子標的治療薬)を合理的に開発することが可能となっている。本研究では、この薬物設計のポイントとなる鋳型タンパク質の構造を明らかにする上で、化学的方法ではこれまで困難とされていた痕跡量の試料に適用できる新光反応性試薬を開発し、その適用により代謝系酵素の解析に成功した。

研究成果

• [雑誌論文] Rapidly photoactivatable ATP probes for specific labeling of tropomyosin within the actomyosin protein complex (2011)
  • 著者名/発表者名: Souta Masuda, Takenori Tomohiro, Yasumaru Hatanaka
  • 雑誌名: Bioorg.Med.Chem.Lett. vol.21 ページ: 2252-2254
  • 査読あり
• [雑誌論文] Rapidly photoactivatable ATP probes for specific labeling of tropomyosin within the actomvosin protein complex (2011)
  • 著者名/発表者名: Souta Masuda, Takenori Tomohiro, Yasumaru Hatanaka
  • 雑誌名: Bioorg.Med.Chem.Lett. 巻: 21(印刷中, in press (2011))
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of a substrate-binding site in a peroxisomal β-oxidation enzyme by photoaffinity labeling with a novel palmitoyl derivative (2010)
  • 著者名/発表者名: Yoshinori Kashiwayama, Takenori Tomohiro, Kotomi Narita, Miyuki Suzumura, Tuomo Glumoff, J.Kalervo Hiltunen, Paul P.Van Veldhoven, Yasumaru Hatanaka, Tsuneo Imanaka
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. vol.285 ページ: 26315-26325
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficient approach for profiling photoaffinity labeled peptides with a cleavable biotinyl photoprobe (2010)
  • 著者名/発表者名: Nlandu B.Bongo, Takenori Tomohiro, Yasumaru Hatanaka
  • 雑誌名: Bioorg.Med.Chem.Lett. vol.20 ページ: 1834-1836
  • 査読あり
• [雑誌論文] Photoactive ligands probing the sweet taste receptor. Design and synthesis of highly potent diazirinyl D-phenylalanine derivatives (2010)
  • 著者名/発表者名: Katsuyoshi Masuda, Ayako Koizumi, Takumi Misaka, Yasumaru Hatanaka, Keiko Abe, Takaharu Tanaka, Masaji Ishiguro, Makoto Hashimoto
  • 雑誌名: Bioorg.Med.Chem.Lett. vol.20 ページ: 1081-1083
  • NAID: 120001875431
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of a substrate-binding site in a peroxisomal β-oxidation enzyme by photoaffinity labeling with a novel palmitoyl derivative (2010)
  • 著者名/発表者名: Yoshinori Kashiwayama, Takenori Tomohiro, Kotomi Narita, Miyuki Suzumura, Tuomo Glumoff, J.Kalervo Hiltunen, Paul P.Van Veldhoven, Yasumaru Hatanaka, Tsuneo Imanaka
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. 巻: 285 ページ: 26315-26325
  • 査読あり
• [雑誌論文] Design and synthesis of highly potent diazirinyl D-phenylalanine derivatives (2010)
  • 著者名/発表者名: Katsuyoshi Masuda
  • 雑誌名: Bioorg.Med.Chem.Lett. 20 ページ: 1834-1836
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficient approach for profiling photoaffinity labeled peptides with a cleavable biotinyl photoprobe (2010)
  • 著者名/発表者名: Nlandu B.Bongo
  • 雑誌名: Bioorg.Med.Chem.Lett. 20 ページ: 1834-1836
  • 査読あり
• [雑誌論文] Synthesis and Evaluation of Novel Photoreactive α-Amino Acid Analog Carrying Acidic and Cleavable Functions (2009)
  • 著者名/発表者名: Nlandu B.Bongo, Takenori Tomohiro, Yasumaru Hatanaka
  • 雑誌名: Bioorg.Med.Chem.Lett. vol.19 ページ: 80-82
  • 査読あり
• [雑誌論文] Synthesis and Evaluation of Novel Photoreactive α-Amino Acid Analog Carrying Acidic and Cleavable Functions (2009)
  • 著者名/発表者名: Nlandu B.Bongo
  • 雑誌名: Bioorg.Med.Chem.Lett. 19 ページ: 80-82
  • 査読あり
• [雑誌論文] Recent Progress in Diazirine-Based Photoaffinity Labeling (2008)
  • 著者名/発表者名: Makoto Hahimoto, Yasumaru Hatanaka
  • 雑誌名: Eur.J.Org.Chem. vol.2008 ページ: 2513-2523
  • NAID: 120006390329
  • 査読あり
• [雑誌論文] Recent Progress in Diazirine-Based Photoaffinity Labeling(総説) (2008)
  • 著者名/発表者名: Makoto Hashimoto
  • 雑誌名: Eur.J.Org.Chem. 2008 ページ: 2513-2523
  • 査読あり
• [学会発表] Chemical Approach for Identifying Drug Binding Site within Proteins (2010)
  • 著者名/発表者名: 畑中保丸
  • 学会等名: Kongres Ilmiah XVIII dan Rakernas 2010 Ikatan Apoteker Indonesia (Scientific Congress XVIII and Annual Meeting of Indonesian Pharmacist Association)
  • 発表場所: Makassar, Indonesia.
  • 年月日: 2010-12-12
• [学会発表] Chemical Approach for Identifying Drug Binding Site within Proteins基調講演(招待) (2010)
  • 著者名/発表者名: Yasumaru Hatanaka
  • 学会等名: Kongres Ilmiah XVIII dan Rakernas 2010 Ikatan Apoteker Indonesia (Scientific Congress XVIII and Annual Meeting of Indonesian Pharmacist Association)
  • 発表場所: Makassar, Indonesia
  • 年月日: 2010-12-12
• [学会発表] A Rapid and Efficient Method for Identifying Photoaffinity Labeled Sites within Proteins, Symposium for Medicinal Chemistry Division : Direct Approaches for Identifying All of the Cellular Targets of Small Molecule Drugs, and Mapping their Binding Cavities (2010)
  • 著者名/発表者名: 畑中保丸
  • 学会等名: the 239th National ACS Meeting
  • 発表場所: San Francisco, California, USA.
  • 年月日: 2010-03-22
• [学会発表] A Rapid and Efficient Method for Identifying Photoaffinity Labeled Sites within Proteins (2010)
  • 著者名/発表者名: Yasumaru Hatanaka
  • 学会等名: the 239th National ACS Meeting (招待講演)
  • 発表場所: San Francisco, USA
  • 年月日: 2010-03-22
• [学会発表] Photoaffinity Labeling with Novel Cleavable Biotinyl Probe (2010)
  • 著者名/発表者名: Tomohiro T., Bongo N.B., Hatanaka Y.
  • 学会等名: 21st French-Japanese Symposium on Medicinal and Fine Chemistry
  • 発表場所: Kyoto
• [学会発表] 新規ジアジリン導入シグナルペプチドプローブの開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 森本正大, 友廣岳則, 丸山伸之, 畑中保丸
  • 学会等名: 日本薬学会第130年会
  • 発表場所: 岡山
• [学会発表] 発蛍光性ジアジリンとこれを導入した新規ATPプローブの開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 猪ノ口裕二, 増田宗太, 友廣岳則, 畑中保丸
  • 学会等名: 日本薬学会第130年会
  • 発表場所: 岡山
• [学会発表] 味覚関連アミノ酸およびペプチド用光アフィニティーラベル試薬合成 (2010)
  • 著者名/発表者名: 橋本誠, 畑中保丸
  • 学会等名: 日本薬学会第130年会
  • 発表場所: 岡山
• [学会発表] 芳香族アミノ酸側鎖構造活性相関解析用光アフィニティーラベル試薬の立体選択的合成 (2009)
  • 著者名/発表者名: 橋本誠, 村重諒, 村井勇太, 畑中保丸
  • 学会等名: 日本薬学会第129年会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] 新ATP/ADPプローブによるアクトミオシン複合体の光アフィニティー解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 増田宗太, 友廣岳則, 畑中保丸
  • 学会等名: 日本薬学会第129年会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] Bouvier M., βアドレナリン受容体に特異的なジアジリン型新規光プローブの開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 吉田幸司, 友廣岳則, 畑中保丸, 小林弘幸
  • 学会等名: 日本薬学会第129年会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] 脂質、糖鎖、核酸等を一段階で光反応性プローブに誘導する効率的方法の開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 谷下充佳, 友廣岳則, 畑中保丸
  • 学会等名: 日本薬学会第129年会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] βアドレナリン受容体に特異的なジアジリン型新規光プローブの開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 吉田幸司
  • 学会等名: 日本薬学会第129年会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] Photoaffinity-Based Binding Analysis of Pt-DamagedD DNA and Nclear Protein (2008)
  • 著者名/発表者名: Tomohiro, T., Sugai, A., Hatanaka, Y.
  • 学会等名: the 4th Asian Biological Inorganic Chemistry Conference
  • 発表場所: Jeju, Korea.
• [学会発表] Photoaffinity-Based Binding Analysis of Pt-Damaged DNA and Nuclear Protein (2008)
  • 著者名/発表者名: Takenori Tomohiro
  • 学会等名: The 4^<th> Asian Biological Inorganic Chemistry Conference
  • 発表場所: Jeju, Korea
• [備考] ホームページ等
  • URL: http://www.pha.u-toyama.ac.jp/anachem/index-j.html
• [備考]
  • URL: http://www.pha.u-toyama.ac.jp/anachem/index-j.html
• [備考]
  • URL: http://www.pha.u-toyama.ac.jp/anachem/index-j.html
• [備考]
  • URL: http://www.pha.u-toyama.ac.jp/anachem/index-j.html