DYRKファミリーキナーゼと特異的に相互作用する細胞内タンパク質の同定と機能解析

• 研究課題/領域番号: 20570129
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 機能生物化学
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 宮田 愛彦 京都大学, 大学院・生命科学研究科, 助教 (70209914)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円); 2010年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円); 2009年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2008年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
• キーワード: DYRK1A / WDR68 / WD40-repeat / ダウン症候群 / 核移行 / 細胞情報伝達 / DYRK / WD40リピート / キナーゼ / シグナル伝達 / DYRK1B / 分子シャペロン / WD40 / Hsp90 / Cdc37 / DYRK-BP / リン酸化 / プロテオーム解析

研究概要

ダウン症の発症に関与するタンパク質リン酸化酵素DYRK1Aと細胞内で結合するタンパク質を探索し、WDR68を同定した。WDR68は植物からヒトまで広く存在する機能未知のタンパク質である。ヒトの5種類のDYRK ファミリーのうちDYRK1AおよびDYRK1BのみがWDR68と結合し、DYRK2, DYRK3, DYRK4は結合しなかった。WDR68の細胞内量を減らすと培養細胞は増殖も生存もできなかった。WDR68は細胞質及び核に存在するが、DYRK1Aが存在するとDYRK1Aと結合して核に集積するようになった。DYRK1AはWDR68と結合してその存在様式を変化させることでWDR68の細胞内機能に影響を及ぼすと考えられる。

研究成果

• [雑誌論文] Efficient soluble protein production on transgenic silkworms expressing cytoplasmic chaperones. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hong S.M., Yamashita J., Mitsunobu H., Uchino K., Kobayashi I., Sezutsu H., Tamura T., Nakajima H., Miyagawa Y., Lee, J.M., Mon H., Miyata Y., Kawaguchi Y., Kusakabe T.
  • 雑誌名: Appl.Microbiol. Biotechnol. 87 ページ: 2147-2156
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficient soluble protein production on transgenic silkworms expressing cytoplasmic chaperones (2010)
  • 著者名/発表者名: Hong, S.M., Yamashita, J., Mitsunobu, H., Uchino, K., Kobayashi, I., Sezutsu, H., Tamura, T., Nakajima, H., Miyagawa, Y., Lee, J.M., Mon, H., Miyata.Y., Kawaguchi, Y., Kusakabe, T.
  • 雑誌名: Appl.Microbiol.Biotechnol 巻: 87 ページ: 2147-2156
  • 査読あり
• [雑誌論文] Involvement of the protein kinase CK2 in the regulation of mammalian circadian rhythms. (2009)
  • 著者名/発表者名: Tsuchiya Y., Akashi M., Matsuda M., Goto K., Miyata Y., Node K., Nishida E.
  • 雑誌名: Science Signaling 2
  • 査読あり
• [雑誌論文] CK2 : The kinase controlling the Hsp90 chaperone machinery. (2009)
  • 著者名/発表者名: 宮田愛彦
  • 雑誌名: Cell. Mol. Life Sci. 66(総説) ページ: 1840-1849
  • 査読あり
• [雑誌論文] Involvement of the protein kinase CK2 in the regulation of mammalian circadian rhythms. (2009)
  • 著者名/発表者名: Tsuchiya, Y., Akashi, M., Matsuda, M., Goto, K., Miyata, Y., Node, K., Nishida, E.
  • 雑誌名: Science Signaling 2
  • 査読あり
• [雑誌論文] CK2 : The kinase controlling the Hap90 chaperone machinery. (2009)
  • 著者名/発表者名: Miyata, Y.
  • 雑誌名: Cellular and Molecular Life Sciences 66 ページ: 1840-1849
• [雑誌論文] Involvement of the protein kinase CK2 in the regulation of mammalian circadian rhythms. (2009)
  • 著者名/発表者名: Tsuchiya, Y., Akashi, M., Matsuda, M., Goto, K., Miyata, Y., Node, K., Nishida, E.
  • 雑誌名: Science Signaling (印刷中)
  • 査読あり
• [雑誌論文] CK2 : The kinase controlling the Hsp90 chaperone machinery. (2009)
  • 著者名/発表者名: Miyata, Y.
  • 雑誌名: Cellular and Molecular Life Sciences (印刷中)
• [雑誌論文] Evaluating CK2 activity with the antibody specific for the CK2-phosphorylated form of a kinase-targeting cochaperone Cdc37. (2008)
  • 著者名/発表者名: Miyata Y., Nishida E.
  • 雑誌名: Mol. Cell. Biochem. 316 ページ: 127-134
  • 査読あり
• [雑誌論文] Evaluating CK2 activity with the antibody specific for the CK2-phosphorylated form of a kinase-targeting cochaperone Cdc37. (2008)
  • 著者名/発表者名: Miyata, Y., Nishida, E.
  • 雑誌名: Molecular and Cellular Biochemistry 316 ページ: 127-134
  • 査読あり
• [学会発表] ダウン症候群に関連するDYRK1Aキナーゼは高度に保存されたWD40タンパク質WDR68と特異的に結合してその核移行を促進する (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮田愛彦、西田栄介
  • 学会等名: BMB2010 第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸(ポスター発表)
  • 年月日: 2010-12-10
• [学会発表] ダウン症候群に関連するDYRK1Aキナーゼは高度に保存されたWD40タンパク質WDR68と特異的に結合してその核移行を促進する (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮田愛彦、西田栄介
  • 学会等名: BMB2010第33回日本分子生物学会年会第83回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(兵庫県)
  • 年月日: 2010-12-10
• [学会発表] A possible role of CK2 in protein nuclear translocation signalling (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮田愛彦, 西田栄介
  • 学会等名: 6th International Conference on Protein Kinase CK2
  • 発表場所: Cologne, Germany(招待口演)
  • 年月日: 2010-09-10
• [学会発表] A possible role of CK2 in protein nuclear translocation signalling (2010)
  • 著者名/発表者名: Miyata.Y., Nishida, E.
  • 学会等名: 6th International Conference on Protein Kinase CK2
  • 発表場所: Wahn Castle, Cologne, Germany(招待講演)
  • 年月日: 2010-09-10
• [学会発表] Hsp90のキナーゼ特異的コシャペロンCdc37に対するリン酸化認識抗体を用いたCK2活性変動の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 宮田愛彦、西田栄介
  • 学会等名: 第82回日本生化学会大会
  • 発表場所: 神戸(ポスター発表及び口頭発表)
  • 年月日: 2009-10-24
• [学会発表] Hsp90のキナーゼ特異的コシャペロンCdc37に対するリン酸化認識抗体を用いたCK2活性変動の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 宮田愛彦、西田栄介
  • 学会等名: 第82回日本生化学会大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2009-10-24
• [学会発表] CK2によるCdc37のリン酸化を介したkinome制御 (2009)
  • 著者名/発表者名: 宮田愛彦, 西田栄介
  • 学会等名: キナーゼシグナル研究会
  • 発表場所: 北里大学薬学部(東京)
  • 年月日: 2009-03-21
• [学会発表] An authentic molecular chaperone activity of Hsp90 and Cdc37 for the signaling protein kinases DYRKs (2009)
  • 著者名/発表者名: 宮田愛彦, 西田栄介
  • 学会等名: The 4th International Congress on Stress Responses in Biology and Medicine
  • 発表場所: Sapporo, Japan(ワークショップ口頭発表及びポスター発表)
• [学会発表] An authentic molecular chaperone activity of Hsp90 and Cdc37 for the signaling protein kinases DYRKS. (2009)
  • 著者名/発表者名: Miyata, Y., Nishida, E.
  • 学会等名: The 4th International Congress on Stress Responses in Biology and Medicine
  • 発表場所: Sapporo, Japan
• [学会発表] マス・スペクトルによるシグナル伝達キナーゼ複合体の網羅的リン酸化プロテオーム解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 宮田愛彦
  • 学会等名: BMB2008第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同年会テクニカルセミナー「網羅的リン酸化解析を可能にする"最先端"質量分析テクノロジー」
  • 発表場所: 神戸(招待講演)
  • 年月日: 2008-12-10
• [学会発表] マス・スペクトルによるシグナル伝達キナーゼ複合体の網羅的リン酸化プロテオーム解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 宮田愛彦
  • 学会等名: 第31回 日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会合同大会(BMB2008)バイオテクノロジーセミナー
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸)
  • 年月日: 2008-12-10
• [学会発表] キナーゼ特異的Hsp90コシャペロンCdc37のCK2によるリン酸化-リン酸化特異的抗体及びリン酸基アフィニティーゲル電気泳動による解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 宮田愛彦、西田栄介
  • 学会等名: BMB2008第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同年会
  • 発表場所: 神戸(ポスター発表)
• [学会発表] キナーゼ特異的Hsp90コシャペロンCdc37のCK2によるリン酸化-リン酸化特異的抗体及びリン酸基アフィニティーゲル電気泳動による解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 宮田愛彦, 西田栄介
  • 学会等名: 第31回 日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会合同大会(BMB2008)
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸)
• [図書] 医学のための細胞生物学(永田和宏・塩田浩平編)(南山堂) (2009)
  • 著者名/発表者名: 宮田愛彦
  • 出版者: シグナル伝達の原理と多様性
• [図書] シグナル伝達の原理と多様性「医学のための細胞生物学」 (2009)
  • 著者名/発表者名: 宮田愛彦
  • 総ページ数: 315
  • 出版者: 南山堂
• [図書] シグナル伝達の原理と多様性「医学のための細胞生物学」(永田和宏・塩田浩平 編) (2009)
  • 著者名/発表者名: 宮田愛彦
  • 出版者: 南山堂(印刷中)
• [図書] キーワード:蛋白質の一生(遠藤斗志也・小椋光・永田和宏・森和俊・田口英樹・吉田賢右編) (2008)
  • 著者名/発表者名: 宮田愛彦
  • 出版者: Hsp90.蛋白質・核酸・酵素増刊号
• [図書] 「Hsp90」蛋白質・核酸・酵素 増刊号「キーワード : 蛋白質の一生」(遠藤斗志也・小椋光・永田和宏・森和俊・田口英樹・吉田賢右 編) (2008)
  • 著者名/発表者名: 宮田愛彦
  • 総ページ数: 1114
  • 出版者: 共立出版