凍結乾燥ウシ精子の同種および異種顕微授精系による評価

• 研究課題/領域番号: 20580305
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 応用動物科学
• 研究機関: 信州大学
• 研究代表者: 保地 眞一 信州大学, 繊維学部, 教授 (10283243)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2011
• 研究課題ステータス: 完了 (2011年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2011年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円); 2010年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円); 2009年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2008年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
• キーワード: ウシ精子 / 顕微授精 / 凍結乾燥 / カルシウムオシレーション / DNA脱メチル化 / ROCK阻害剤 / ガラス化保存 / 微小管形成中心 / 精子中心体 / コメットアッセイ / 胚盤胞 / 共焦点レーザー顕微鏡 / 超急速ガラス化保存 / 卵子活性化

研究概要

凍結乾燥(FD)ウシ精子を長期間冷蔵保存した後、受精シグナルを発する各種能力がどの程度正常に維持されているのかを調べた。排卵マウス卵子を用いた異種顕微授精系において、FD区では対照区よりも精子由来卵活性化因子の活性が劣る傾向があったが、致命的とまでは言えなかった。同種顕微授精系で作製した前核期卵の解析では、FD行程が精子に加わることは雄ゲノムに能動的脱メチル化が誘起される時期や脱メチル化のレベルに問題を引き起こさなかった。精子中心体の微小管形成中心機能についてもFD行程による問題は認められず、FD精子のDNA断片化もコメットアッセイでは観察されなかった。

研究成果

• [雑誌論文] Procedure for bovine ICSI, not spermfreeze-drying, impairs the function of the microtubule-organizing center. (2011)
  • 著者名/発表者名: H. Hara, H. Abdalla, H. Morita, M. Kuwayama, M. Hirabayashi, S. Hochi.
  • 雑誌名: J Reprod Dev誌 巻: 57巻 ページ: 428-432
  • NAID: 10029050914
  • 査読あり
• [雑誌論文] Challenging endeavourfor preservation of freeze-dried mammalian spermatozoa (2011)
  • 著者名/発表者名: S. Hochi, H. Abdalla, H. Hara, M. Hirabayashi
  • 雑誌名: J Reprod Dev誌 巻: 57巻 ページ: 557-563
  • NAID: 10029878056
  • 査読あり
• [雑誌論文] Procedure for Bovine ICSI, not Sperm Freeze-drying, Impairs the Function of the Microtubule-organizing Center (2011)
  • 著者名/発表者名: Hiromasa Hara
  • 雑誌名: Journal of Reproduction and Development 巻: 57 号: 3 ページ: 428-432
  • DOI: 10.1262/jrd.10-167N
  • NAID: 10029050914
  • ISSN: 0916-8818, 1348-4400
  • 査読あり
• [雑誌論文] Challenging Endeavour for Preservation of Freeze-Dried Mammalian Spermatozoa (2011)
  • 著者名/発表者名: Shinichi Hochi
  • 雑誌名: Journal of Reproduction and Development 巻: 57 号: 5 ページ: 557-563
  • DOI: 10.1262/jrd.11-061O
  • NAID: 10029878056
  • ISSN: 0916-8818, 1348-4400
  • 査読あり
• [雑誌論文] Vitrification of ICSI-and IVF-derived bovine blastocysts by minmum volume cooling procedure : effect of developmental stage and age (2010)
  • 著者名/発表者名: H. Abdalla, M. Shimoda, H. Hara, H. Morita, M. Kuwayama, M. Hirabayashi, S. Hochi
  • 雑誌名: Theriogenology誌 巻: 74巻 ページ: 1028-1035
  • 査読あり
• [雑誌論文] Stimulatory effect of Rhoassociated coiled-coil kinase(ROCK) inhibitor on revivability of in vitroproduced bovine blastocysts after vitrification (2010)
  • 著者名/発表者名: S. Hochi, H. Abdalla, H. Hara, M. Shimoda, H. Morita, M. Kuwayama, M. Hirabayashi
  • 雑誌名: Theriogenology誌 巻: 73巻 ページ: 1139-1145
  • 査読あり
• [雑誌論文] Vitrification of ICSI-and IVF-derived bovine blastocysts by minmum volume cooling procedure : effect of developmental stage and age. (2010)
  • 著者名/発表者名: H.AbdaRa, M.Shimoda, H.Hara, H.Morita, M.Kuwayama, M.Hirabayashi, S.Hochi.
  • 雑誌名: Theriogenology誌 74巻 ページ: 1028-1035
  • 査読あり
• [雑誌論文] Stimulatory effect of Rho-associated coiled-coil kinase (ROCK) inhibitor on revivability of in vitro-produced bovine blastocysts after vitrification. (2010)
  • 著者名/発表者名: S.Hochi, H.Abdalla, H, Hara, M。Shimoda, H.Morita, M.Kuwayama, M.Hirabayashi.
  • 雑誌名: Theriogenology誌 73巻 ページ: 1139-1145
  • 査読あり
• [雑誌論文] Stimulatory effect of Rho-associated coiled-coil kinase(ROCK)inhibitor on revivabilitv of in vitro-produced bovine blastocysts after vitrification (2010)
  • 著者名/発表者名: Shinichi Hochi
  • 雑誌名: Theriogenology 巻: 73 ページ: 1139-1145
  • 査読あり
• [雑誌論文] Vitrification of ICSI-and IVF-derived bovine blastocysts by minimum volume cooling procedure: effect of developmental stage and age (2010)
  • 著者名/発表者名: Hany Abdalla
  • 雑誌名: Theriogenology 巻: 74 ページ: 1028-1035
  • 査読あり
• [雑誌論文] A combined treatment of ionomycin with ethanol improve sblastocyst development of bovineoocytes harvested from stored ovaries and microinjected with sperma-tozoa (2009)
  • 著者名/発表者名: H. Abdalla, M. Shimoda, M. Hirabayashi, S. Hochi
  • 雑誌名: Theriogenology誌 巻: 72巻 ページ: 453-460
  • 査読あり
• [雑誌論文] Demethylation dynamics of thepaternal genome in pronuclear-stagebovine zygotes produced by in vitrofertilization and ooplasmic injection offreeze-thawed or freeze-dried spermatozoa (2009)
  • 著者名/発表者名: H. Abdalla, M. Hirabayashi, S. Hochi
  • 雑誌名: J Reprod Dev誌 巻: 55巻 ページ: 433-439
  • 査読あり
• [雑誌論文] The ability of freeze-dried bull spermatozoa to induce calcium oscillations and resumption of meiosis (2009)
  • 著者名/発表者名: H. Abdalla, M. Hirabayashi, S. Hochi
  • 雑誌名: Theriogenology誌 巻: 71巻 ページ: 543-552
  • 査読あり
• [雑誌論文] A combined treatment of ionomycin with ethanol improves blastocyst development of bovine oocytes harvested from stored ovaries and microinjected with sperma-tozoa. (2009)
  • 著者名/発表者名: H.Abdalla, M.Shimoda, M.Hirabayashi, S.Hochi.
  • 雑誌名: Theriogenology誌 72巻 ページ: 453-460
  • 査読あり
• [雑誌論文] Demethylation dynamics of the paternal genome in pronuclear-stage bovine zygotes produced by in vitro fertilization and ooplasmic injection of freeze-thawed or freeze-dried spermatozoa. (2009)
  • 著者名/発表者名: H.Abdalla, M.Hirabayashi, S.Hochi
  • 雑誌名: J Reprod Dev誌 55巻 ページ: 433-439
  • NAID: 10025194467
  • 査読あり
• [雑誌論文] The ability of freeze-dried bull sperma-tozoa to induce calcium oscillations and resumption of meiosis. (2009)
  • 著者名/発表者名: H.Abdalla, M.Hirabayashi, S.Hochi.
  • 雑誌名: Theriogenology誌 71巻 ページ: 543-552
  • 査読あり
• [雑誌論文] Demethylation dynamics of the paternal genome in pronuclear-stage bovine zygotes produced by in vitro fertilization and ooplasmic injection of freeze-thawed or freeze-dried spermatozoa (2009)
  • 著者名/発表者名: Hany ABDALLA
  • 雑誌名: Journal of Reproduction and Development 55 ページ: 433-439
  • 査読あり
• [雑誌論文] A combined treatment of ionomycin with ethanol improves blastocyst development of bovine oocytes harvested from stored ovaries and microinjected with spermatozoa (2009)
  • 著者名/発表者名: Hany ABDALLA
  • 雑誌名: Theriogenology 72 ページ: 453-460
  • 査読あり
• [雑誌論文] The ability of freeze-dried bull spermatozoa to induce calcium oscillations and resumption of meiosis (2009)
  • 著者名/発表者名: Hany ABDALLA
  • 雑誌名: Theriogenology 71 ページ: 543-552
  • 査読あり
• [学会発表] 顕微授精、精子凍結乾燥、卵子ガラス化の各行程がウシ微小管形成中心の機能発現に及ぼす影響 (2011)
  • 著者名/発表者名: 原弘真
  • 学会等名: 第52回日本哺乳動物卵子学会
  • 発表場所: 栃木/大田原
  • 年月日: 2011-05-22
• [学会発表] 顕微授精、精子凍結乾燥、卵子ガラス化の各行程がウシ微小管形成中心の機能発現に及ぼす影響 (2011)
  • 著者名/発表者名: 原弘真
  • 学会等名: 第52回日本哺乳動物卵子学会
  • 発表場所: 栃木
• [学会発表] IVFまたはICSIに由来するウシ前核期卵におけるDNAメチル化量とH3ヒストンアセチル化量との関係 (2010)
  • 著者名/発表者名: 原弘真
  • 学会等名: 第103回日本繁殖生物学会
  • 発表場所: 青森
• [学会発表] ICSIとIVFに由来するウシ胚盤胞の超急速ガラス化保存:発生速度と発育ステージの影響 (2010)
  • 著者名/発表者名: 下田美怜
  • 学会等名: 第51回日本哺乳動物卵子学会
  • 発表場所: 新潟
• [学会発表] ROCKの活性阻害はガラス化保存した体外受精由来ウシ胚盤胞の蘇生率を改善する (2010)
  • 著者名/発表者名: 原弘真
  • 学会等名: 第112回日本畜産学会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] ICSIとIVFにより作出した拡張度が異なる7日目ウシ胚盤胞におけるガラス化耐性の比較 (2010)
  • 著者名/発表者名: 下田美怜
  • 学会等名: 第112回日本畜産学会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] IVFまたはICSIに由来するウシ前核期卵におけるDNAメチル化量とH3ヒストンアセチル化量との関係 (2010)
  • 著者名/発表者名: 原弘真
  • 学会等名: 第103回日本繁殖生物学会
  • 発表場所: 十和田
• [学会発表] ウシ卵細胞質内精子注入法の効率改善と凍結乾燥精子を用いた胚盤胞作製の試み (2009)
  • 著者名/発表者名: 下田美怜
  • 学会等名: 第102回日本繁殖生物学会
  • 発表場所: 奈良
• [学会発表] ウシ顕微授精胚の胚盤胞発生率を改善する卵子活性化補填法について (2009)
  • 著者名/発表者名: 保地眞一
  • 学会等名: 第110回日本畜産学会
  • 発表場所: 神奈川
• [学会発表] Demethylation dynamics ofpaternal genomes in pronuclear bovinezygotes produced by IVF and ICSI withnon-dried or freeze-dried spermatozoa (2009)
  • 著者名/発表者名: Abdalla H
  • 学会等名: 第35回国際胚移植学会
  • 発表場所: カリフォルニア州
• [学会発表] Demethylation dynamics of paternal genomes in pronuclear bovine zygotes produced by IVF and ICSI with non-dried or freeze-dried spermatozoa (2009)
  • 著者名/発表者名: Abdalla H
  • 学会等名: 第35回国際胚移植学会
  • 発表場所: カリフォルニア州
• [学会発表] ウシ卵細胞質内精子注入法の効率改善と凍結乾燥精子を用いた胚盤胞作製の試み (2009)
  • 著者名/発表者名: 下田美怜
  • 学会等名: 第102回日本繁殖生物学会
  • 発表場所: 近畿大学農学部(奈良)
• [学会発表] Demethylation dynamics of paternal genomes in pronuclear bovine zygotes produced by IVF and ICSI with non-dried or freeze-dried spermatozoa (2009)
  • 著者名/発表者名: ハニー アブダツラ
  • 学会等名: 第35回国際胚移植学会
  • 発表場所: アメリカ、カリフォルニア州
• [学会発表] Demethylation dynamics ofpaternal genomes in pronuclear bovinezygotes produced by IVF and ICSI withnon-dried or freeze-dried spermatozoa (2008)
  • 著者名/発表者名: Abdalla H
  • 学会等名: 第101回日本繁殖生物学会
  • 発表場所: 福岡
• [学会発表] Ability of freeze-dried bullspermatozoa to induce calcium oscillations and meiosis resumption (2008)
  • 著者名/発表者名: Abdalla H
  • 学会等名: 第1回世界生殖生物工学会議
  • 発表場所: ハワイ州
• [学会発表] Ability of freeze-dried bull spermatozoa to induce calcium oscillations and meiosis resumption (2008)
  • 著者名/発表者名: Abdalla H
  • 学会等名: 第1回世界生殖生物工学会議
  • 発表場所: ハワイ州
• [学会発表] Ability of freeze-dried bull spermatozoa to induce calcium oscillations and meiosis resumption (2008)
  • 著者名/発表者名: ハニー アブダツラ
  • 学会等名: 第1回世界生殖生物工学会議
  • 発表場所: アメリカ、ハワイ州
• [学会発表] Demethylation dynamics of paternal genomes in pronuclear bovine zygotes produced by IVF and ICSI with non-dried or freeze-dried spermatozoa (2008)
  • 著者名/発表者名: ハニー アブダツラ
  • 学会等名: 第101回日本繁殖生物学会
  • 発表場所: 福岡
• [図書] Vitro Fertilization (2011)
  • 著者名/発表者名: S. Hochi, H. Abdalla, M. Hirabayashi
  • 出版者: Nova Science Publishers
• [図書] In Vitro Fertilization/Intracytoplasmic sperm injection in cattle (2011)
  • 著者名/発表者名: Shinichi Hochi
  • 出版者: Nova Science Publishers