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超安定化・変性ストレス耐性酵素への道-通常酵素の好塩性化と高機能化細胞への具体策

研究課題

研究課題/領域番号 20580372
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 応用分子細胞生物学
研究機関鹿児島大学

研究代表者

徳永 正雄  鹿児島大学, 農学部, 教授 (20112782)

研究分担者 石橋 松二郎  鹿児島大学, 農学部, 准教授 (20305163)
徳永 廣子  鹿児島大学, 農学部, 技能補佐員 (60381191)
研究期間 (年度) 2008 – 2010
研究課題ステータス 完了 (2010年度)
配分額 *注記
4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円)
2010年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2009年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2008年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
キーワード蛋白質・糖鎖工学 / 極限環境微生物 / 蛋白質発現 / 高機能化 / 好塩性酵素 / 酸性アミノ酸 / 構造可逆性 / 好塩性α-アミラーゼ / 融合蛋白質 / 可溶性 / 封入体 / 大腸菌発現系
研究概要

好塩性細菌が生産する好塩性酵素は、酸性アミノ酸に富み、net chargeがマイナス荷電に偏っており(等電点が低い酸性タンパク質)、この性質が高い可溶性と、変性しても凝集しないで巻き戻る高い構造可逆性を保証している。通常生物由来酵素に酸性アミノ酸の導入、もしくは好塩性蛋白質と融合蛋白質を作ることによって、好塩性を付与し、高い可溶性を持たせ、安定性を高めた蛋白質の分子育種に成功した。

報告書

(4件)
  • 2010 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2009 実績報告書
  • 2008 実績報告書
  • 研究成果

    (13件)

すべて 2011 2010 2009 2008 その他

すべて 雑誌論文 (7件) (うち査読あり 7件) 学会発表 (5件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] Halophilic beta-lactamase as a new solubilityand folding-enhancing tag protein : production of native human interleukin 1alpha and human neutrophil alpha-defensin2010

    • 著者名/発表者名
      Tokunaga H, Saito S, Sakai K, Yamaguchi R, Katsuyama I, Arakawa T, Onozaki K, Arakawa T, Tokunaga M
    • 雑誌名

      Appl Microbiol Biotechnol

      巻: 86(2) ページ: 649-658

    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Dimer-tetramer assembly of nucleoside diphosphate kinase from moderately halophilic bacterium Chromohalobacter salexigens DSM3043 : both residues 134 and 146 are critical for the tetrameric assembly2010

    • 著者名/発表者名
      H. Tokunaga, K. Izutsu, S. Arai, Y. Yonezawa, R. Kuroki, T. Arakwa, and M. Tokunaga.
    • 雑誌名

      Enz. Microbial Technol

      巻: 46 ページ: 129-135

    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Salt-dependent thermo-reversible α-amylase : cloning and characterization of halophilic α-amylase from moderately halophilic bacterium, Kocuria varians.2010

    • 著者名/発表者名
      Yamaguchi R, Tokunaga H, Ishibashi M, Arakawa T, Tokunaga M.
    • 雑誌名

      Appl Microbiol Biotechnol.

      巻: 89 ページ: 673-684

    • 関連する報告書
      2010 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] High solubility supports efficient refolding of thermally unfolded β-lactamase2010

    • 著者名/発表者名
      Arakawa T, Tokunaga H, Yamaguchi R, Tokunaga M.
    • 雑誌名

      Int J Biol Macromol.

      巻: 47 ページ: 706-709

    • 関連する報告書
      2010 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Halophilic β-lactamase as a new solubility-and folding-enhancing tag protein : Production of native human interleukin 1α and human neutrophil α-defensin2010

    • 著者名/発表者名
      H.Tokunaga, S.Saito, K.Sakai, R.Yamaguchi, I.Katsuyama, T.Arakawa, K.Onozaki, T.Arakawa, M.Tokunaga
    • 雑誌名

      Applied Microbiology and Biotechnology 86

      ページ: 649-658

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Engineering of halophilic enzymes : two acidic amino acid residues at the carboxy-terminal region confer halophilic characterstics to Halomonas and Pseudomonas nucleoside diphosphate kinases2008

    • 著者名/発表者名
      Tokunaga, H., Arakawa, T., Tokunaga, M.
    • 雑誌名

      Protein Sciences

      巻: 17 ページ: 1603-1610

    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Engineering of halophilic enzymes : two acidic amino acid residues at the carboxy-terminal region confer halophilic characterstics to Halomonas and Pseudomonas nucleoside diphosphate kinases.2008

    • 著者名/発表者名
      Tokunaga, H., Arakawa, T., Tokunaga, M.
    • 雑誌名

      Protein Sciences 17

      ページ: 1603-1610

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 塩依存的にrefoldingする中度好塩菌Kocuria varians由来α-amylaseの性質検討とcloning及び発現2011

    • 著者名/発表者名
      山口類、石橋松二郎、徳永廣子、荒川力、徳永正雄
    • 学会等名
      日本農芸化学会2011年大会
    • 発表場所
      京都女子大学
    • 年月日
      2011-03-26
    • 関連する報告書
      2010 実績報告書
  • [学会発表] 好塩性β-ラクタマーゼを可溶性タグとした融合蛋白質発現系の開発2010

    • 著者名/発表者名
      山口類、徳永廣子、斎藤尚子、逆井一樹、勝山巌、荒川友博、小野崎菊夫、荒川力、徳永正雄
    • 学会等名
      2010日本農芸化学会大会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2010-03-29
    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
  • [学会発表] 高度好塩菌由来nucleoside diphosphate kinase変異体G114Rの解析2010

    • 著者名/発表者名
      石橋松二郎、岩佐達也、徳永正雄
    • 学会等名
      2010日本農芸化学会大会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2010-03-28
    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
  • [学会発表] 好塩性付与蛋白質の分子育種2009

    • 著者名/発表者名
      徳永廣子、荒川力、山口類、徳永正雄
    • 学会等名
      2009年日本農芸化学会大会
    • 発表場所
      福岡
    • 年月日
      2009-03-28
    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
  • [学会発表] 1アミノ酸(134th)置換による好塩性nueleoside diphosphate kinaseの2量体-4量体変換2008

    • 著者名/発表者名
      徳永廣子, 石橋松二郎, 有坂文雄, 新井栄揮, 黒木良太, 山口類, 荒川力, 徳永正雄
    • 学会等名
      2008年日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      東京タワーホール船堀
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [備考] 鹿児島大学農学部生物資源化学科応用分子微生物学研究室

    • URL

      http://chem.agri.kagoshima-u.ac.jp/Oyoseika/oubi/HP060703/top-040621.html

    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書

URL: 

公開日: 2008-04-01   更新日: 2016-04-21  

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