血管内皮細胞の保護による抗血栓作用についての検討

• 研究課題/領域番号: 20590888
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 循環器内科学
• 研究機関: 東海大学
• 研究代表者: 石田 英之 東海大学, 医学部, 教授 (20222424)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2010年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2009年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2008年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
• キーワード: 血栓 / 血管内皮細胞 / 活性酸素種 / in vivo / 活性酸素 / ミトコンドリア

研究概要

塩化鉄処理in vivo血栓モデルにおいてnicorandilの抗血栓作用が観察されたが、血小板などの血球成分へのnicorandilの抗凝固作用はなかった。このため本研究では、血管内皮細胞の保護による抗血栓作用についてnicorandilを用いて検討した。
対照群、nicorandil群、nicorandil+5-HD群、nicorandil+L-NAME (NOS阻害剤)群を対象として、マウス動脈での塩化鉄処理による血栓形成時間を比較した。また、培養血管内皮細胞を用いeNOSおよびNOX生成へのnicorandilの影響を測定した。in vivo血栓モデルでの活性酸素種(ROS)産生は、dihydrorhodamine123で測定した。塩化鉄処理により動脈内に処理後12±3分で大血栓が形成された。nicorandil群では、大血栓形成までの時間が55±11分と延長した。Nicorandil+5-HD群では、19±5分とnicorandilの作用は抑制されたが、nicorandil+L-NAME群では、28±8分と有意な抑制はなかった。培養血管内皮細胞においてnicorandil 添加によるeNOSのmRNAやリン酸化状態およびNOx産生に変化はなかった。in vivo血栓モデルにおいて塩化鉄処理によるROSの産生は、nicorandil群で有意に抑制された。Nicorandilの抗血栓作用は、抗血小板作用や硝酸薬作用ではなく内皮細胞の機能障害を改善するためと考えられた。本作用の機序としては、ミトコンドリアATP sensitive K+channel開口作用を介してミトコンドリアからのROS漏出を抑制する可能性が示唆された。Nicorandilは、ミトコンドリアのROS産生抑制を介する内皮細胞保護作用に伴う抗血栓作用の可能性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Contribution of SR Ca^<2+> release and Ca^<2+> transporters on sarcolemmal channels to Ca^<2+> transient in fetal mouse heart. (2011)
  • 著者名/発表者名: Takizawa M, Ishiwata T, Kawamura Y, Kanai T, Kurokawa T, Nishiyama M, Ishida H, Asano Y, Nonoyama S
  • 雑誌名: Pediatric Research 巻: 69 ページ: 306-11
  • 査読あり
• [雑誌論文] Possible Mechanism of Preventive Effects of Coffee Intake on the Formation of Arterial Occlusive Thrombosis. (2010)
  • 著者名/発表者名: Toda E, Ishida H, T. Aoki T, Urano T, Y. Takahari Y, Tamura N, Goto S
  • 雑誌名: Tokai J Exp Clin Med 35(4) ページ: 133-6
• [雑誌論文] Fetal and neonatal development of Ca^<2+> transients and functional sarcoplasmic reticulum in beating mouse hearts (2010)
  • 著者名/発表者名: Kawamura Y, Ishiwata.T, Takizawa M, Ishida H, Asano Y, Nonoyama S
  • 雑誌名: Circulation J 巻: 74 ページ: 1442-50
  • NAID: 10030695829
  • 査読あり
• [雑誌論文] Possible Mechanism of Preventive Effects of Coffee Intake on the Formation of Arterial Occlusive Thrombosis (2010)
  • 著者名/発表者名: Toda E, Ishida H, T.Aoki T, Urano T, Y.Takahari Y, Tamura N, Goto S
  • 雑誌名: Tokai J Exp Clin Med 巻: 35 ページ: 133-6
  • 査読あり
• [雑誌論文] Imaging of structural changes in endothelial cells and thrombus formation at the site of FeCl(3)-induced injuries in mice cremasteric arteries. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kawamura Y, Takahari Y, Tamura N, Eguchi Y, Urano T, Ishida H, Goto S
  • 雑誌名: J Atheroscler Thromb 16(6) ページ: 807-14
  • NAID: 130004444350
• [雑誌論文] Nicorandil attenuates FeCl_3-induced thrombus formation through the inhibition of reactive oxygen species production. (2009)
  • 著者名/発表者名: Eguchi Y, Takahari Y, Higashijima N, Ishizuka N, Tamura N, Kawamura Y, Ishida H
  • 雑誌名: Circulation J 73(3) ページ: 554-561
• [雑誌論文] The important regulatory role of activated platelet-derived procoagulant activity in the propagation of thrombi formed under arterial blood flow conditions. (2009)
  • 著者名/発表者名: Tamura N, Kitajima Isao, Kawamura Y, Toda E, Eguchi Y, Ishida H, Goto, S
  • 雑誌名: Circulation J 73(3) ページ: 554-561
  • NAID: 110007126721
• [雑誌論文] Nicorandil attenuates FeCl_3-induced thrombus formation through the inhibition of reactive oxygen species production. (2009)
  • 著者名/発表者名: Eguchi Y, Takahari Y, Higashijima N, Ishizuka N, Tamura N, Kawamura Y, Ishida H
  • 雑誌名: Circulation J 73 ページ: 554-561
  • 査読あり
• [雑誌論文] The Important Regulatory Role of Activated Platelet-derived Procoagulant Activity in the Propagation of Thrombi Formed under Arterial Blood Flow Conditions. (2009)
  • 著者名/発表者名: Tamura N, Kitajima Isao, Kawamura Y, Toda E, Eguchi Y, Ishida H, Goto, S
  • 雑誌名: Circulation J 73 ページ: 540-548
  • NAID: 110007126721
  • 査読あり
• [雑誌論文] Imaging of structural changes in endothelial cells and thrombus formation at the site of FeCl(3)-induced injuries in mice cremasteric arteries (2009)
  • 著者名/発表者名: Kawamura Y, Takahari Y, Tamura N, Eguchi Y, Urano T, Ishida H, Goto S
  • 雑誌名: J Atheroscler Thromb 16 ページ: 807-814
  • NAID: 130004444350
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inhibition of plasminogen activator inhibitor-1 : its mechanism and effectiveness on coagulation and fibrosis. (2008)
  • 著者名/発表者名: Izuhara Y, Takahashi S, Nangaku M, Takizawa S, Ishida H, Kurokawa K, Strihou CY, Hirayama N, Miyata T
  • 雑誌名: Arterioscler Thromb Vasc Biol 28(3) ページ: 672-677
• [雑誌論文] Nicorandilの心筋保護作用のメカニズム (2008)
  • 著者名/発表者名: 江口夕,雫石正明,石田英之
  • 雑誌名: 日本臨床麻酔学会誌 28(7) ページ: 900-6
• [雑誌論文] Infarct size limitation by erythropoietin is associated with translocation of Akt to the mitochondria、after reperfusion. (2008)
  • 著者名/発表者名: Kdbayashi H, Miura T, Ishida H, Miki T, Tanno M, Yano T, Sato T, Hotta H, Shimamoto K
  • 雑誌名: Clin Exp Pharmacol Physiol 35 ページ: 812-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inhibition of plasminogen activator inhibitor-1 : its mechanism and effectiveness on coagulation and fibrosis. (2008)
  • 著者名/発表者名: Izuhara Y, Takahashi S, Nangaku M, Takizawa S, Ishida H, Kurokawa K, Strihou CY, Hirayama N, Miyata T.
  • 雑誌名: Arterioscler Thromb Vasc Biol 28 ページ: 672-677
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nicorandilの心筋保護作用のメカニズム (2008)
  • 著者名/発表者名: 江口夕, 雫石正明, 石田英之
  • 雑誌名: 日本臨床麻酔学会誌 28 ページ: 900-6
  • 査読あり
• [学会発表] In vivo血栓モデルによるトシル酸スプラタストの血栓形成抑制作用の検討 (2010)
  • 著者名/発表者名: 高張洋子, 東島直子, 仲地義憲, 木庭守, 石田英之
  • 学会等名: 第11回Pharmaco-Hematologyシンポジウム
  • 発表場所: 日本薬学会長井記念ホール
  • 年月日: 2010-06-19
• [学会発表] In vivo塩化鉄血栓モデルの血栓形成における血管内皮細胞の関与 (2010)
  • 著者名/発表者名: 石田英之、高張洋子、東島直子
  • 学会等名: 日本顕微鏡学会
  • 発表場所: 板橋 帝京大学
  • 年月日: 2010-01-18
• [学会発表] トシル酸スプラタストのFe誘発ROS産生抑制作用 (2010)
  • 著者名/発表者名: 仲地義憲, 高張洋子, 石渡隆寛, 東島直子, 南里真人, 木庭守, 石田英之
  • 学会等名: 第83回日本薬理学会
  • 発表場所: 大阪国際会議場
• [学会発表] Local distribution of cytosolic calcium ion in platelet forming thrombi on collagen fibrils and von Willebrand factor under controlled blood flow condition (2009)
  • 著者名/発表者名: N.TAMURA, H.ISHIDA, S.GOTO
  • 学会等名: 第22回国際血栓止血学会
• [学会発表] Local distribution of cytosolic calcium ion in platelet forming thrombi on collagen fibrils and von Willebrand factor under controlled blood flow condition (2009)
  • 著者名/発表者名: N.TAMURA, H.ISHIDA, S.GOTO
  • 学会等名: XXII International Society on Thrombosis and Haemostasis
  • 発表場所: Boston, USA
• [学会発表] ニコランジルによる抗血栓作用-in vivo血栓モデルによる検討- (2008)
  • 著者名/発表者名: 石田 英之
  • 学会等名: 第56回日本心臓病学会
  • 発表場所: 東京国際フォーラム
  • 年月日: 2008-09-09
• [備考] ホームページ等
• [備考]
  • URL: http://www.med.u-tokai.ac.jp/daigakuin/pdf/ishida.pdf
• [備考]
  • URL: http://www.med.u-tokai.ac.jp/daigakuin/pdf/ishida.pdf