筋ジストロフィーのアンチセンス治療におけるシグナル伝達因子の動態に関する研究

• 研究課題/領域番号: 20591223
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 小児科学
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 竹島 泰弘 神戸大学, 大学院・医学研究科, 特命教授 (40281141)
• 研究分担者: 松尾 雅文 神戸大学, 医学研究科, 教授 (10157266) ; 八木 麻理子 神戸大学, 医学研究科, 助教 (60362787)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円); 2010年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2009年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2008年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
• キーワード: アンチセンスオリゴヌクレオチド / 筋ジストロフィー / シグナル伝達因子 / エクソンスキッピング / 筋ジストロフー / NF-κB

研究概要

私達は、Duchenne型筋ジストロフィー(以下DMD)に対する根治治療として、アンチセンスオリゴヌクレオチド(以下AS-oligo)によってエクソンスキッピングを誘導し、out-of-frame欠失をin-frame欠失に変えて遺伝情報を修正する治療法の有効性を、世界で初めて臨床的に明らかにした。本研究では、その治療法の有効性をさらに高めるために、日本人でみられる遺伝子異常を明らかにし、それに基づきAS-oligo治療のモデルシステムを構築した。さらにそのシステムにおいて、シグナル伝達因子などを解析した。AS-oligo治療の有効性を検討するうえで、個々の症例における解析が重要であることを明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Molecular characterization of the 5'-UTR of retinal dystrophin reveals a cryptic intron that regulates translational activity. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kubokawa I, Takeshima Y, Ota M, Enomoto M, Okizuka Y, Mori T, Nishimura N, Awano H, Yagi M, Matsuo M.
  • 雑誌名: Mol Vis. 16 ページ: 2590-2597
• [雑誌論文] Contemporary retrotransposition of a novel non-coding gene induces exon-skipping in dystrophin mRNA. (2010)
  • 著者名/発表者名: Awano H, Malueka RG, Yagi M, Okizuka Y, Takeshima Y, Matsuo M.
  • 雑誌名: J Hum Genet. 55 ページ: 785-790
  • NAID: 10030737817
• [雑誌論文] Mutation spectrum of the dystrophin gene in 442 Duchenne/Becker muscular dystrophy cases from one Japanese referral center. (2010)
  • 著者名/発表者名: Takeshima Y, Yagi M, Okizuka Y, Awano H, Zhang Z, Yamauchi Y, Nishio H, Matsuo M.
  • 雑誌名: J Hum Genet. 55 ページ: 379-388
  • NAID: 10030735518
• [雑誌論文] Low incidence of limb-girdle muscular dystrophy type 2C revealed by a mutation study in Japanese patients clinically diagnosed with DMD. (2010)
  • 著者名/発表者名: Okizuka Y, Takeshima Y, Itoh K, Zhang Z, Awano H, MarMarrar, Mar, Marma K, Kumagai T, Yagi M, Matsuo M.
  • 雑誌名: BMC Med Genet. 30
• [雑誌論文] Mutation spectrum of the dystrophin gene in 442 Duchenne/Becker muscular dystrophy cases from one Japanese referral center. (2010)
  • 著者名/発表者名: Takeshima Y
  • 雑誌名: Journal of Human Genetics. 巻: 55 ページ: 379-388
  • NAID: 10030735518
  • 査読あり
• [雑誌論文] Low incidence of limb-girdle muscular dystrophy type 2C revealed by a mutation study in Japanese patients clinically diagnosed with DMD. (2010)
  • 著者名/発表者名: Okizuka Y
  • 雑誌名: BMC Medical Genetics. 巻: 11 ページ: 49-49
  • 査読あり
• [雑誌論文] A Japanese child with asymptomatic elevation of serum creatine kinase shows PTRF-CAVIN mutation matching with congenital generalized lipodystrophy type 4. (2010)
  • 著者名/発表者名: Dwianingsih EK
  • 雑誌名: Molecular Genetics and Metabolism. 巻: 101 ページ: 233-237
  • 査読あり
• [雑誌論文] Insertion of the IL1RAPL1 gene into the duplication junction of the dystrophin gene. (2009)
  • 著者名/発表者名: Zhang Z, Yagi M, Okizuka Y, Awano H, Takeshima Y, Matsuo M.
  • 雑誌名: J Hum Genet. 54 ページ: 466-473
  • NAID: 10030731391
• [雑誌論文] Small mutations detected by multiplex ligation-dependent probe amplification of the dystrophin gene. (2009)
  • 著者名/発表者名: Okizuka Y, Takeshima Y, Awano H, Zhang Z, Yagi M, Matsuo M.
  • 雑誌名: Genet Test Mol Biomarkers. 13 ページ: 427-431
• [雑誌論文] In vitro splicing analysis showed that availability of a cryptic splice site is not a determinant for alternative splicing patterns caused by +1G-->A mutations in introns of the dystrophin gene. (2009)
  • 著者名/発表者名: Habara Y, Takeshima Y, Awano H, Okizuka Y, Zhang Z, Saiki K, Yagi M, Matsuo M.
  • 雑誌名: J Med Genet. 46 ページ: 542-547
• [雑誌論文] In vitro splicing analysis showed that availability of a cryptic splice site is not a determinant for alternative splicing patterns caused by +1G→A mutations in introns of the dystronhin gene (2009)
  • 著者名/発表者名: Habara Y
  • 雑誌名: Journal of Medical Genetics 46 ページ: 542-547
  • 査読あり
• [雑誌論文] Small mutations detected by multiplex ligation-dependent probe amplification of the dystrophin gene (2009)
  • 著者名/発表者名: Okizuka Y
  • 雑誌名: Genetic Testing and Molecular Biomarkers 13 ページ: 427-431
  • 査読あり
• [雑誌論文] Insertion of the IL1RAPL1 gene into the duplication junction of the dystrophin gene (2009)
  • 著者名/発表者名: Zhang Z
  • 雑誌名: Journal of Human Genetics 54 ページ: 466-473
  • 査読あり
• [雑誌論文] High incidence of electrocardiogram abnormalities in young patients with duchenne muscular dystrophy. (2008)
  • 著者名/発表者名: Takami Y, Takeshima Y, Awano H, Okizuka Y, Yagi M, Matsuo M.
  • 雑誌名: Pediatr Neurol. 39 ページ: 399-403
• [雑誌論文] Dystrophin nonsense mutations can generate alternative rescue transcripts in lymphocytes. (2008)
  • 著者名/発表者名: Nishiyama A, Takeshima Y, Zhang Z, Habara Y, Tran TH, Yagi M, Matsuo M.
  • 雑誌名: Ann Hum Genet. 72 ページ: 717-724
• [雑誌論文] Tandem duplications of two separate fragments of the dystrophin gene in a patient with Duchenne muscular dystrophy. (2008)
  • 著者名/発表者名: Zhang Z, Takeshima Y, Awano H, Nishiyama A, Okizuka Y, Yagi M, Matsuo M.
  • 雑誌名: J Hum Genet. 53 ページ: 215-219
  • NAID: 10021248166
• [雑誌論文] A strong exonic splicing enhancer in dystrophin exon 19 achieve proper splicing without an upstream polypyrimidine tract. (2008)
  • 著者名/発表者名: Habara Y, Doshita M, Hirozawa S, Yokono Y, Yagi M, Takeshima Y, Matsuo M.
  • 雑誌名: J Biochem. 143 ページ: 303-310
  • NAID: 10024908594
• [雑誌論文] High incidence of electrocardiogram abnormalities in young patients with duchenne muscular dystrophy. (2008)
  • 著者名/発表者名: Takami Y
  • 雑誌名: Pediatr Neurol. 39 ページ: 399-403
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dystrophin nonsense mutations can generate alternative rescue transcripts in lymphocytes. (2008)
  • 著者名/発表者名: Nishiyama A
  • 雑誌名: Ann Hum Genet 72 ページ: 717-724
  • 査読あり
• [雑誌論文] Tandem duplications of two separate fragments of the dystrophingene in a patient with Duchenne muscular dystrophy. (2008)
  • 著者名/発表者名: Zhang Z
  • 雑誌名: J Hum Genet. 53 ページ: 215-219
  • 査読あり
• [学会発表] Chemical treatment of muscular dystrophy that enhances skipping of the mutated exon in the dystrophin gene. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nishida A, Kataoka N, Takeshima Y, Yagi M, Awano H, Ota M, Itoh K, Hagiwara M, Matsuo M.
  • 学会等名: The American Society of Human Genetics 60th Annual Meeting.
  • 発表場所: Washigton, DC.
• [学会発表] Mutation spectrum of the dystrophin gene in 456 Duchienne/Becker muscular dystrophy cases from one Japanese referral center. (2010)
  • 著者名/発表者名: Takeshima Y, Yagi M, Ota M, Awano H, Yamauchi Y, Malueka RG, Dwianingsih EK, Nishio H, Matsuo M.
  • 学会等名: 15th International Congress of The World Muscle Society.
  • 発表場所: Kumamoto.
• [学会発表] Antisense RNA/ethylene-bridged nucleic acids chimera induces exon 45 skipping and restores dystrophin expression in myocytes of Duchenne muscular dystrophy. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yagi M, Ota M, Awano H, Takeshima Y, Matsuo M.
  • 学会等名: 15th International Congress of The World Muscle Society.
  • 発表場所: Kumamoto
• [学会発表] Antisense RNA/ENA chimera against dystrophin exon 45 leads exon 45 skipping followed by dystrophin expression in cells from duchenne muscular dystrophy. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yagi M, Takeshima Y, Awano H, Ota M, Malueka RG, Dwianingsih EK, Nishida A, Lee T, Matsuo M.
  • 学会等名: 6th Annual Meeting of the Oligonucleotide Therapeutics Society.
  • 発表場所: Southern California
• [学会発表] Long-term administration of antisense oligonucleotide against dystrophin exon 19 for the treatment of Duchenne muscular dystrophy with exon 20 deletion. (2010)
  • 著者名/発表者名: Matsuo M, Takeshima Y, Yagi M, Awano H.
  • 学会等名: XII International Congress on Neuromusular Diseases.
  • 発表場所: Naples.
• [学会発表] Antisense RNA/ethylene- bridged nucleic acid chimera induces exon 45 skipping and restores dystrophin expression in DMD muscle cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yagi M, Ota M, Awano H, Takeshima Y, Matsuo M.
  • 学会等名: XII International Congress on Neuromusular Diseases.
  • 発表場所: Naples.
• [学会発表] Genotype-phenotype correlation of the dystrophinopathy cases with small mutations in the dystrophin gene. (2010)
  • 著者名/発表者名: Awano H, Takeshima Y, Yagi M, Yamauchi Y, Malueka RG, Dwianingsih EK, Matsuo M.
  • 学会等名: Pediatric Academic Societies' 2010 Annual Meeting.
  • 発表場所: Vancouver.
• [学会発表] 培養筋細胞におけるアンチセンスオリゴヌクレオチドによるエクソン45のスキッピング誘導率は変異によって異なる (2010)
  • 著者名/発表者名: 八木麻理子
  • 学会等名: 第52回日本小児神経学会総会
  • 発表場所: 福岡国際会議場(福岡県)
• [学会発表] Duchenne 型筋ジストロフィー分子治療の適応に関する検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 竹島泰弘
  • 学会等名: 第51回日本小児神経学会総会
  • 発表場所: 米子コンベンションセンター(鳥取県)
  • 年月日: 2009-05-29
• [学会発表] Antisense RNA/ethylene-bridged nucleic acids chimera induces exon skipping and restores dystrophin expression in myocytes of Duchenne muscular dystrophy. (2009)
  • 著者名/発表者名: Yagi M, Yamauchi Y, Awano H, Takeshima Y, Matsuo M.
  • 学会等名: The American Society of Human Genetics 59th Annual Meeting.
  • 発表場所: Hawaii.
• [学会発表] In vitro splicing analysis reveals that availability of a cryptic splice site is not a determinant for alternative splicing patterns caused by +1G>A mutations in introns of the dystrophin gene. (2009)
  • 著者名/発表者名: Matsuo M, Habara Y, Takeshima Y, Awano H, Okizuka Y, Zhang Z, Yagi M.
  • 学会等名: 14th International Congress of The World Muscle Society.
  • 発表場所: Geneva.
• [学会発表] High incidence of outlier from the reading-frame rule in dystrophinopathy patients with duplication mutations in the dystrophin gene. (2009)
  • 著者名/発表者名: Yagi M, Awano H, Okizuka Y, Takeshima Y, Matsuo M.
  • 学会等名: Pediatric Academic Societies' 2009 Annual Meeting.
  • 発表場所: Baltimore.
• [学会発表] Mutation spectrum of the dystrophin gene in 433 Japanese dystrophinopathy cases. (2008)
  • 著者名/発表者名: Takeshima Y, Yagi M, Okizuka Y, Awano H, Zang Z, Saiki K, Matsuo M.
  • 学会等名: The American Society of Human Genetics 58th Annual Meeting.
  • 発表場所: Philadelphia.
• [学会発表] Splicing errors casued by small mutations in the dystrophin gene are different between lymphocytes and muscle tissues. (2008)
  • 著者名/発表者名: Okizuka Y, Awano H, Yagi M, Takeshima Y, Matsuo M.
  • 学会等名: Pediatric Academic Societies' 2008 Annual Meeting.
  • 発表場所: Hawaii.
• [学会発表] A novel retrotransposon that was recently inserted into exon 67 of the dystrophin gene. (2008)
  • 著者名/発表者名: Awano H, Yagi M, Okizuka Y, Zhang Z, Takeshima Y, Matsuo M.
  • 学会等名: Joint 7th Human Genome Organization (HUGO)-Pacific Meeting and the 8th Asia-Pacific Conference on Human Genetics.
  • 発表場所: Cebu.
• [学会発表] Mutation spectrum of the dystrophin gene in 433 Japanese dystrophinopathy cases. (2008)
  • 著者名/発表者名: Takeshima Y
  • 学会等名: The American Society of Human Genetics 58th Annual Meeting
  • 発表場所: Philadelphia, USA