ヒト遺伝子ノックアウト白血病細胞株の作製とアポトーシスの分子機序の解析

• 研究課題/領域番号: 20591261
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 小児科学
• 研究機関: 北里大学
• 研究代表者: 宮下 俊之 北里大学, 医学部, 教授 (60174182)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2010年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2009年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2008年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
• キーワード: アポトーシス / グルココルチコイド / RCAN1 / 白血病 / 相同組換え / カスパーゼ

研究概要

グルココルチコイド(GC)によって誘導される白血病細胞のアポトーシスの分子機序を解明する目的で、GC感受性ヒト白血病細胞株Nalm6においてGCの標的遺伝子をターゲッティングベクターを用いてノックアウトした。標的遺伝子の1つであるRCAN1をノックアウトしたRCAN1-/-細胞は野性株に比べて著明にGCによるアポトーシスが抑制された。逆にRCAN1 を強制発現した細胞株ではアポトーシス誘導の増強が認められた。以上の結果よりRCAN1遺伝子はGC によるアポトーシスを媒介する標的遺伝子の1つであると考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Entire PTCH1 deletion is a common event in point mutation-negative cases with nevoid basal cell carcinoma syndrome in Japan. (2011)
  • 著者名/発表者名: Nagao K., Fujii K., Saito K., Sugita K., Endo M., Motojima T., Hatsuse H., Miyashita T.
  • 雑誌名: Clin.Genet. 79 ページ: 196-198
  • 査読あり
• [雑誌論文] Entire PTCH1 deletion is a common event in point mutation-negative cases with nevoid basal cell carcinoma syndrome in Japan. (2011)
  • 著者名/発表者名: Miyashita, T.
  • 雑誌名: Clin.Genet. 巻: 79 ページ: 196-198
  • 査読あり
• [雑誌論文] 見逃してはいけない家族性腫瘍:本邦における母斑基底細胞癌症候群の遺伝子変異と臨床的特徴 (2011)
  • 著者名/発表者名: 宮下俊之
  • 雑誌名: 家族性腫瘍 巻: 11 ページ: 14-18
  • NAID: 130007529694
  • 査読あり
• [雑誌論文] Multiple keratocystic odontogenic tumors associated with nevoid basal cell carcinoma syndrome having distinct PTCH1 mutations : a case report. (2010)
  • 著者名/発表者名: Sasaki R., Miyashita T., Matsumoto N., Fujii K., Saito K., Ando T.
  • 雑誌名: Oral Surg.Oral Med.Oral Pathol.Oral Radiol.Endod. 110
  • 査読あり
• [雑誌論文] Blasts in transient leukemia in neonates with Down syndrome differentiate into basophil/mast-cell and megakaryocyte lineages in vitro in association with down-regulation of truncated form of GATA1. (2010)
  • 著者名/発表者名: Miyauchi J., Ito Y., Tsukamoto K., Takahashi H., Ishikura K., Sugita K., Miyashita T.
  • 雑誌名: Brit.J.Haematol. 148 ページ: 898-909
  • 査読あり
• [雑誌論文] ヘッジホッグと形態形成-Gorlin症候群とPTCH遺伝子変異- (2010)
  • 著者名/発表者名: 藤井克則,宮下俊之
  • 雑誌名: 日本小児皮膚科学会雑誌 28 ページ: 65-71
  • NAID: 10026418020
  • 査読あり
• [雑誌論文] グルココルチコイド受容体 (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮下俊之
  • 雑誌名: 日本薬理学会誌 135 ページ: 117-118
  • NAID: 10026334909
  • 査読あり
• [雑誌論文] Multiple keratocystic odontogenic tumors associated with nevoid basal cell carcinoma syndrome having distinct PTCH1 mutations : a case report. (2010)
  • 著者名/発表者名: Miyashita, T.
  • 雑誌名: Oral Surg.Oral Med.Oral Pathol.Oral Radiol.Endod. 巻: 110
• [雑誌論文] Blasts in transient leukemia in neonates with Down syndrome differentiate into basophil/mast-cell and megakaryocyte lineages in vitro in association with down-regulation of truncated form of GATAl. (2010)
  • 著者名/発表者名: Miyashita, T.
  • 雑誌名: Brit.J.Haematol. 148 ページ: 898-909
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nevoid basal cell carcinoma syndrome with cleft lip and palate associated with the novel PTCH gene mutations. (2009)
  • 著者名/発表者名: Sasaki R., Saito K., Watanabe Y., Miyashita T., Fujii K., Agawa K., Takayama Y., Ando T., Akizuki, T.
  • 雑誌名: J.Hum.Genet. 54 ページ: 398-402
  • NAID: 10030731005
  • 査読あり
• [雑誌論文] EYA4, Deleted in a case with middle interhemispheric variant of holoprosencephaly, interacts with SIX3 both physically and functionally. (2009)
  • 著者名/発表者名: Abe Y., Oka A., Mizuguchi M., Igarashi T., Ishikawa S., Aburatani H., Yokoyama S., Asahara H., Nagao K., Yamada M., Miyashita T.
  • 雑誌名: Hum.Mutat. 30
  • 査読あり
• [雑誌論文] ヘッジホッグと形態形成-発生生物学から臨床医学への応用- (2009)
  • 著者名/発表者名: 藤井克則,宮下俊之
  • 雑誌名: 脳と発達 41 ページ: 247-252
  • NAID: 10024846234
  • 査読あり
• [雑誌論文] Gorlin症候群における臨床的検討-主要症状を中心とした多様な症候スペクトラム- (2009)
  • 著者名/発表者名: 田辺良,藤井克則,宮下俊之,他
  • 雑誌名: 脳と発達 41 ページ: 253-257
  • NAID: 10024846296
  • 査読あり
• [雑誌論文] Gorlin症候群における分子遺伝学的検討-PTCH1遺伝子変異とその多様な変異スペクトラム- (2009)
  • 著者名/発表者名: 遠藤真美子,藤井克則,宮下俊之,他
  • 雑誌名: 脳と発達 41 ページ: 259-263
  • NAID: 10024846313
  • 査読あり
• [雑誌論文] EYA4, deleted in a case with middle interhemispheric variant of holoprosencephaly, interacts with SIX3 both physically and functionally. (2009)
  • 著者名/発表者名: Miyashita, T.
  • 雑誌名: Hum.Mutat. 30
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nevoid basal cell carcinoma syndrome with cleft lip and palate associated with the novel PTCH gene mutations. (2009)
  • 著者名/発表者名: Miyashita, T.
  • 雑誌名: J.Hum.Genet. 54 ページ: 398-402
  • NAID: 10030731005
  • 査読あり
• [雑誌論文] Patched1 haploinsufficiency increases adult bone mass and modulates Gli3 repressor activity. (2008)
  • 著者名/発表者名: Ohba S., Kawaguchi H., Kugimiya F., Ogasawara T., Kawamura N., Saito T., Ikeda T., Fujii K., Miyajima T., Kuramochi A., Miyashita T., Oda H., Nakamura K., Takato T., Chung, U.I.
  • 雑誌名: Dev.Cell 14 ページ: 689-699
  • 査読あり
• [雑誌論文] ステロイドの抗腫瘍作用マイクロアレイを用いた作用機序の解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 宮下俊之,押田忠弘
  • 雑誌名: 日本臨床 66 ページ: 89-93
• [雑誌論文] Patchedl haploinsufficiency increases adult bone mass and modulates Gli3 repressor activity. (2008)
  • 著者名/発表者名: Ohba S, Miyashita T
  • 雑誌名: Dev. Cell 14 ページ: 689-699
  • 査読あり
• [雑誌論文] ステロイドの抗腫瘍作用-マイクロアレイを用いた作用機序の解析- (2008)
  • 著者名/発表者名: 宮下 俊之
  • 雑誌名: 日本臨床 66 ページ: 89-93
• [学会発表] 母斑基底細胞癌症候群の約16%がPTCH1遺伝子全欠損で発症する (2010)
  • 著者名/発表者名: 長尾和右,桐生麻衣子,高山吉永,宮下俊之
  • 学会等名: 第69回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] ヘッジホッグシグナル伝達経路に抑制的に働く抗PTCH1マウスモノクロナル抗体の作製 (2010)
  • 著者名/発表者名: 高山吉永,長尾和右,桐生麻衣子,宮下俊之
  • 学会等名: 第69回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] 日本人母斑基底細胞癌症候群の16%はPTCH1遺伝子の片アレル欠損で発症する (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮下俊之,長尾和右,遠藤真美子,本島敏乃,齋藤加代子,杉田克生,藤井克則
  • 学会等名: 第16回日本家族性腫瘍学会学術集会
  • 発表場所: 新潟
• [学会発表] (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮下俊之,遠藤真美子,齋藤加代子,杉田克生,藤井克則
  • 学会等名: 第16回日本家族性腫瘍学会学術集会
  • 発表場所: 新潟
• [学会発表] 母斑基底細胞癌症候群症例の16%がPTCH1遺伝子の全欠失によって発症する (2010)
  • 著者名/発表者名: 長尾和右,高山吉永,亀山孝三,宮下俊之
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] ヒトPatched1(PTCH1)レセプターに対して作製したマウスモノクロナル抗体の評価 (2010)
  • 著者名/発表者名: 高山吉永,志村将人,桐生麻衣子,長尾和右,亀山孝三,宮下俊之
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] 本邦における母斑基底細胞癌症候群の遺伝子変異と臨床的特徴 (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮下俊之
  • 学会等名: 第16回日本家族性腫瘍学会学術集会
  • 発表場所: 朱鷺メッセ(新潟県)
• [学会発表] ヘッジホッグシグナル伝達経路に抑制的に働く抗PTCH1マウスモノクロナル抗体の作製 (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮下俊之
  • 学会等名: 第69回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 大阪国際会議場(大阪府)
• [学会発表] 母斑基底細胞癌症候群症例の16%がPTCH1遺伝子の全欠失によって発症する (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮下俊之
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸国際会議場(兵庫県)
• [学会発表] 6番染色体長腕に欠損を認めた全前脳胞症亜型における原因遺伝子についての検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 阿部裕一、島田隆史、古山晶子、星野英紀、久保田雅也、宮下俊之、岡明
  • 学会等名: 第51回日本小児神経学会総会
  • 発表場所: 米子
• [学会発表] 多発性顎嚢胞を契機に診断したPTCH遺伝子異常を伴った基底細胞母斑症候群 (2009)
  • 著者名/発表者名: 佐々木亮、齋藤加代子、宮下俊之、渡辺頼勝、藤井克則、阿川かおり、高山吉永、秋月種高、安藤智博
  • 学会等名: 第15回日本家族性腫瘍学会学術集会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] FKBP5ノックアウト細胞株を用いたアポトーシス誘導機序の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 長尾和右、山田正夫、宮下俊之
  • 学会等名: 第68回日本癌学会総会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] FKBP5ノックアウト白血病細胞株を用いたグルココルチコイドによるアポトーシス誘導機序の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 長尾和右、宮下俊之
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] 全前脳症原因候補遺伝子としてのEYA4に関する検討 (2008)
  • 著者名/発表者名: 阿部裕一、石川俊平、油谷浩幸、横山成俊、浅原弘嗣、山田正夫、岡明、五十嵐隆、宮下俊之
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会・第80回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] PTCH1遺伝子領域を含むゲノム欠損による母斑基底細胞癌症候群3例の解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 宮下俊之、藤井克則
  • 学会等名: 第14回日本家族性腫瘍学会学術集会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] Nevoid basal cell careinoma syndrome with cleft lip and palate associated with mutation of the PTCH gene : report of two cases (2008)
  • 著者名/発表者名: Sasaki R, Miyashita T
  • 学会等名: XIX Congress of the European Association for Cranio-MaXillo-Facial Surgery
  • 発表場所: Bologna, Italy
• [学会発表] 全前脳症原因候補遺伝子としてのEYA4に関する検討 (2008)
  • 著者名/発表者名: 阿部裕一, 宮下 俊之
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸
• [図書] メディカル・サイエンス・インターナショナル(症例でわかる新臨床遺伝学 水谷修紀 監訳) (2008)
  • 著者名/発表者名: 宮下俊之(分担翻訳)
• [図書] 症例でわかる新臨床遺伝学(分担翻訳) (2008)
  • 著者名/発表者名: Andrew Read宮下 俊之
  • 総ページ数: 431
  • 出版者: メディカル・サイエンス・インターナショナル
• [備考] ホームページ等
  • URL: http://www.med.kitasato-u.ac.jp/~molgen/
• [備考]
  • URL: http://www.med.kitasato-u.ac.jp/~molgen/index.html
• [備考]
  • URL: http://www.med.kitasato-u.ac.jp/~molgen/index.html
• [備考]
  • URL: http://www.med.kitasato-u.ac.jp/~molgen/sub3.html