LC-MS/MSによる先天性ステロール代謝異常症の簡易スクリーニングに関する検討

• 研究課題/領域番号: 20591309
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 胎児・新生児医学
• 研究機関: 東京医科大学
• 研究代表者: 本多 彰 東京医科大学, 医学部, 准教授 (10468639)
• 研究分担者: 松崎 靖司 東京医科大学, 医学部, 教授 (50209532) ; 池上 正 東京医科大学, 医学部, 准教授 (40439740)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 2,600千円 (直接経費: 2,000千円、間接経費: 600千円); 2010年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円); 2009年度: 780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円); 2008年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
• キーワード: 先天異常学 / ステロール代謝 / 生化学的診断 / 血清診断 / 高速液体クロマトグラフィー / タンデムマススペクトロメトリー / 先天代謝異常 / ステロール / コレステロール / LC-MS/MS / スクリーニング / LC-MS / MS

研究概要

本研究はコレステロール関連ステロイドの高感度・高精度一斉分析法を開発し,本邦における先天性ステロール代謝異常症診断システムの確立を目指すことを目的とした。10μl以下の極少量の乾燥血清中ステロールをピコリン酸で誘導体化し,エレクトロスプレーイオン化(ESI)を用いた高速液体クロマトグラフィータンデムマススペクトロメトリー(HPLC-MS/MS)によって分析を行った。コレステロールのほか50種類以上のコレステロール関連ステロールを,1回の分析で50分以内に同時分析することを可能にした。20種類の代表的ステロールを用いて行った定量的評価では,最小検出感度は1pg未満であり,再現性,添加回収に関しても満足のいく結果が得られた。本方法は極少量の血清でコレステロール関連ステロールの一斉分析が可能であり,まだ本邦において系統的な診断システムが確立されていない,先天性ステロール代謝異常症の血清診断に寄与できると考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Cholesterol 25-hydroxylation activity of CYP3A (2011)
  • 著者名/発表者名: Honda A, Miyazaki T, Ikegami T, Iwamoto J, Maeda T, Hirayama T, Saito Y., Teramoto T, Matsuzaki Y
  • 雑誌名: J. Lipid Res(Epub ahead of print)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cholesterol and chronic hepatitis C infection (2011)
  • 著者名/発表者名: Honda A, Matsuzaki Y
  • 雑誌名: Hepatol. Res(In press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Highly sensitive and specific analysis of sterol profiles in biological samples by HPLC-ESI-MS/MS. (2010)
  • 著者名/発表者名: Honda A, Miyazaki T, Ikegami T, Iwamoto J, Yamashita K, Numazawa M, Matsuzaki Y
  • 雑誌名: J. Steroid Biochem. Mol. Biol 121 ページ: 556-564
  • 査読あり
• [雑誌論文] A SNP of NPC1L1 affects cholesterol absorption in Japanese. (2010)
  • 著者名/発表者名: Maeda T, Honda A, Ishikawa T, Kinoshita M, Mashimo Y, Takeoka Y, Yasuda D, Kusano J, Tsukamoto K, Matsuzaki Y, Teramoto T
  • 雑誌名: J. Atheroscler. Thromb 17 ページ: 356-360
  • NAID: 130004444429
  • 査読あり
• [雑誌論文] Highly sensitive and specific analysis of sterol profiles in biological samples by HPLC-ESI-MS/MS (2010)
  • 著者名/発表者名: Honda A, et al.
  • 雑誌名: J.Steroid Biochem.Mol.Biol. 巻: 50 ページ: 556-564
  • 査読あり
• [雑誌論文] A SNP of NPC1L1 affects cholesterol absorption in Japanese (2010)
  • 著者名/発表者名: Maeda T, et al.
  • 雑誌名: J.Atheroscler.Thromb. 巻: 17 ページ: 356-360
  • 査読あり
• [雑誌論文] Highly sensitive quantification of key regulatory oxysterols in biological samples by LC-ESI-MS/MS (2009)
  • 著者名/発表者名: Honda A, Yamashita K, Hara T, Ikegami T, Miyazaki T, Shirai M, Xu G, Numazawa M, Matsuzaki Y
  • 雑誌名: J. Lipid Res 50 ページ: 350-357
  • 査読あり
• [雑誌論文] Highly-sensitive quantification of serum malonate, a possible marker for de novo lipogenesis, by LC-ESI-MS/MS (2009)
  • 著者名/発表者名: Honda A, Yamashita K, Ikegami T, Hara T, Miyazaki T, Hirayama T, Numazawa M, Matsuzaki Y
  • 雑誌名: J. Lipid Res. 50 ページ: 2124-2130
  • 査読あり
• [雑誌論文] Highly sensitive quantification of key regulatory oxysterols in biological samples by LC-ESI-MS/MS. (2009)
  • 著者名/発表者名: Honda A, et al.
  • 雑誌名: J.Lipid Res. 50 ページ: 350-357
  • 査読あり
• [雑誌論文] Highly-sensitive quantification of serum malonate, a possible marker for de novo lipogenesis, by LC-ESI-MS/MS. (2009)
  • 著者名/発表者名: Honda A, et al.
  • 雑誌名: J.Lipid Res. 50 ページ: 2124-2130
  • 査読あり
• [雑誌論文] Highly sensitive analysis of sterol profiles in human serum by LC-ESI-MS/MS. (2008)
  • 著者名/発表者名: Honda A, Yamashita K, Miyazaki H, Shirai M, Ikegami T, Xu G, Numazawa M, Hara T, Matsuzaki Y
  • 雑誌名: J. Lipid Res 49 ページ: 2063-2073
  • 査読あり
• [雑誌論文] Determination of key intermediates in cholesterol and bile acid biosynthesis by stable isotope dilution mass spectrometry. (2008)
  • 著者名/発表者名: Yoshida T, Honda A, Miyazaki H, Matsuzaki Y
  • 雑誌名: Anal. Chem. Insights 3 ページ: 45-60
  • 査読あり
• [雑誌論文] Highly sensitive analysis of sterol profiles in human serum by LC-ESI-MS/MS. (2008)
  • 著者名/発表者名: Honda A, et al.
  • 雑誌名: Journal of Lipid Research 49 ページ: 2063-2073
  • 査読あり
• [雑誌論文] Determination of key intermediates in cholesterol and bile acid biosynthesis by stable isotope dilution mass spectrometry. (2008)
  • 著者名/発表者名: Yoshida T, et al.
  • 雑誌名: Analytical Chemistry Insights 3 ページ: 45-60
  • 査読あり
• [学会発表] 原発性胆汁性肝硬変に対するUDCAおよびベザフィブラートによる治療効果発現メカニズムの比較 (2010)
  • 著者名/発表者名: 本多彰, 池上正, 中牟田誠, 宮崎照雄, 齋藤吉史, 平山剛, 松崎靖司
  • 学会等名: 第46回日本肝臓学会総会(ワークショップ)
  • 発表場所: 山形
  • 年月日: 2010-05-27
• [学会発表] 原発性胆汁性肝硬変に対するUDCAおよびベザフィブラートによる治療効果発現メカニズムの比較 (2010)
  • 著者名/発表者名: 本多彰, 他
  • 学会等名: 第46回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 山形
  • 年月日: 2010-05-27
• [学会発表] HPLC-MS/MSを用いた先天性ステロール代謝異常症一斉診断システムの確立 (2009)
  • 著者名/発表者名: 本多彰, 宮崎照雄, 池上正, 原孝, 松崎靖司
  • 学会等名: 第51回日本先天代謝異常学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2009-11-07
• [学会発表] Non-invasive measurement of cholesterol metabolism in patients with HCV infection by using serum marker sterols (2009)
  • 著者名/発表者名: Ikegami T, Honda A, Nakamuta M, Miyazaki T, Hirayama T, Saitoh Y, Matsuzaki Y.
  • 学会等名: 第60回米国肝臓病学会
  • 発表場所: Boston
  • 年月日: 2009-11-02
• [学会発表] 原発性胆汁性肝硬変におけるコレステロール代謝の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 本多彰,中牟田誠,松崎靖司
  • 学会等名: 第51回日本消化器病学会大会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2009-10-16
• [学会発表] コレステロール・胆汁酸代謝系に関するメタボローム解析方法の開発 (2008)
  • 著者名/発表者名: 本多彰, 池上正, 宮崎照雄, 松崎靖司
  • 学会等名: 第12回日本肝臓学会大会
  • 発表場所: 東京
• [図書] Encyclopedia of Molecular Mechanisms of Disease(F. Lang ed.) (Cerebrotendinous Xanthomatosis) (2009)
  • 著者名/発表者名: Honda A
  • 出版者: Springer
• [備考] ホームページ等