増殖性網膜症の新規治療法の開発-miRNAを標的とした血管新生抑制

• 研究課題/領域番号: 20592063
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 眼科学
• 研究機関: 金沢医科大学
• 研究代表者: 吉竹 佳の 金沢医科大学, 医学部, 准教授 (00150764)
• 研究分担者: 米倉 秀人 金沢医科大学, 医学部, 教授 (80240373) ; 矢口 裕基 金沢医科大学, 医学部, 助教 (40410344)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円); 2010年度: 650千円 (直接経費: 500千円、間接経費: 150千円); 2009年度: 650千円 (直接経費: 500千円、間接経費: 150千円); 2008年度: 3,640千円 (直接経費: 2,800千円、間接経費: 840千円)
• キーワード: 血管内皮細胞 / miRNA / 増殖性網膜症 / sFlt-1 / レンチウイルス / 白内障 / UVB / 水晶体上皮細胞 / 管腔形成 / 低酸素 / レンチウイルスベクター / mRNA / マイクロアレイ / Dicer / siRNA / miRNAマイクロアレイ

研究概要

病的な血管新生をする微小血管内皮細胞(HMVEC)がシャーレ内で血管様管腔形成をする際に必要な遺伝子を調べた。最近発見されたミクロRNA遺伝子はタンパクを作る遺伝子の量を調節するのでそれについても調べた。HMVECを2.5%の低酸素で培養すると血管新生因子VEGFが増加し、抑制因子sFlt-1が減少した。白内障の原因のひとつである紫外線を水晶体上皮細胞に照射し、その際分泌される因子を調べて白内障との関連を示した。病因に関した遺伝子が発現しないようにする薬の開発に役立つと思う。

研究成果

• [雑誌論文] An intracellular amyloid-R toxicity is counteracted by expressionofHomerlain neocortex pyramidal cells. (2011)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto K, Ueta Y, Yamamoto R, Inoue N, Inokuchi K, Yonekura H, Kato N
  • 雑誌名: J.Neurosci. (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hypoxia down-regulates sFlt-1 (sVEGFR-1) expression in human microvascular endothelial cells by a mechanism involving mRNA alternative processing. (2011)
  • 著者名/発表者名: Ikeda T, Sun L, Tsuruoka N, Ishigaki Y, Yoshitomi Y, Yoshitake Y, Yonekura H
  • 雑誌名: Biochem.J. 436 ページ: 399-407
  • 査読あり
• [雑誌論文] Septic shock is associated with receptor for advanced glycation endproducts (RAGE) ligation of LPS. (2011)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto Y, Harashima A, Saito H, Tsuneyama K, Munesue S, Motoyoshi S, Han D, Watanabe T, Asano M, Takasawa S, Okamoto H, Shimura S, Karasawa T, Yonekura H, Yamamoto H
  • 雑誌名: J.Immunol. 186 ページ: 3248-57
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of the COL2Al Mutation in Patients with Type I Stickler Syndrome Using RNA from Freshly Isolated Peripheral White Blood Cells. (2011)
  • 著者名/発表者名: Yaguchi H, Ikeda T, Osada H, Yoshitake Y, Sasaki H, Yonekura H
  • 雑誌名: Genet.Test.Mol.Biomarkers. 15 ページ: 231-237
  • 査読あり
• [雑誌論文] ピアルロン酸ナトリウム点眼液の角膜細胞に対する影響の検討 (2011)
  • 著者名/発表者名: 福田正道、矢口裕基、藤田信之、稲垣伸亮、長田ひろみ、柴田奈央子、佐々木洋
  • 雑誌名: 新しい眼科 28 ページ: 549-552
• [雑誌論文] Ultraviolet B-induced expression of amphiregulin and growth differentiation factor 15 in human lens epithelial cells. (2011)
  • 著者名/発表者名: Yoshitake Y, Osada H,, Ikeda T, Ishigaki Y, Takata T, Tomosugi N, Sasaki H, Yonekura H
  • 雑誌名: Mol.Vis. 17 ページ: 159-169
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cyclin-dependent kinase inhibitor p16 and p21 expression, and cell cycle change in human Lens epithelial cell line SRA01/04 following contact inhibition in normal culture. (2011)
  • 著者名/発表者名: Yamashiro Y, Sasaki H, Ibaraki N, Nagai K, Kawakami Y, Yaguchi H, Fujita N, Osada H, Sasaki K
  • 雑誌名: Ophtal.Res. 46 ページ: 38-43
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ultraviolet B-induced expression of amphiregulin and growth differentiation factor 15 in human lens epithelial cells. (2011)
  • 著者名/発表者名: Yoshitake, Y.
  • 雑誌名: Mol Vis. 巻: 17 ページ: 159-169
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hypoxia down-regulates sFlt-1(sVEGFR-1) expression in human microvascular endothelial cells by a mechanism involving mRNA alternative processing. (2011)
  • 著者名/発表者名: Ikeda, T.
  • 雑誌名: Biochemical J. 巻: Mar 7(Epub ahead of print)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of the COL2A1 mutation in patients with type I Stickler syndrome using RNA from freshly isolated peripheral white blood cells. (2011)
  • 著者名/発表者名: Yaguchi, H.
  • 雑誌名: Genet Test Mol Biomarkers. 巻: 15 ページ: 231-237
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cyclin-dependent kinase inhibitor p16 and p21 expression and cell cycle changes in human lens epithelial cell line SRA01/04 following contact inhibition in normal culture. (2011)
  • 著者名/発表者名: Yamashiro, Y.
  • 雑誌名: Ophthal.Res. 巻: 46 ページ: 38-43
  • 査読あり
• [雑誌論文] Septic shock is associated with receptor for advanced glycation end products ligation of LPS. (2011)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto Y.
  • 雑誌名: J Immunol. 巻: 186 ページ: 3248-3257
  • 査読あり
• [雑誌論文] Regulation ofalternative splicing of the receptor for advanced glycation endproducts (RAGE) through G-rich cis-elements and heterogenous nuclear ribonucleoprotein (hnRNP) H. (2010)
  • 著者名/発表者名: Ohe K, Watanabe T, Harada SI, Munesue S, Yamamoto Y, Yonekura H, Yamamoto H
  • 雑誌名: J.Biochem. 147 ページ: 651-659
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of HITS, anewly identified TU3A/DDR1 family of protein(FAM107B), in cancer cells by heat shock stimulation. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nakajima H, Ishigaki Y, Xia Q, Ikeda T, Yoshitake Y, Yonekura H, Nojima T, Tanaka T, Umehara H, Tomosugi N, Takada T, Shimasaki T, Nakaya N, Sato I, Koizumi K, Kawakami K, Minamoto T, Motoo Y
  • 雑誌名: Int.J.Oncol. 37 ページ: 583-593
  • 査読あり
• [雑誌論文] Induction of HITS, a newly identified family with sequence similarity 107 protein (FAM107B), in cancer cells by heat shock stimulation (2010)
  • 著者名/発表者名: Nakajima, H.
  • 雑誌名: Int J Oncol. 巻: 37 ページ: 583-593
  • 査読あり
• [雑誌論文] Regulation of alternative splicing of the receptor for advanced glycation endproducts (RAGE) through G-rich cis-elements and heterogenous nuclear ribonucleoprotein H. (2010)
  • 著者名/発表者名: Ohe K.
  • 雑誌名: J Biochem. 巻: 147 ページ: 651-659
  • 査読あり
• [雑誌論文] Solution structure ofthe variable-type domain of the receptor for advanced glycation end products : new insight into AGE-RAGE interachon. (2008)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto S, Yoshida T, Murata H, Harada S, Fujita N, Nakamura S, Yamamoto Y, Watanabe T, Yonekura H, Yamamoto H, Ohkubo T, Kobayashi Y
  • 雑誌名: Biochemistry 47 ページ: 12299-12311
  • 査読あり
• [雑誌論文] Solution structure of the variable-type domain of the receptor for advanced glycation endproducts: New insight into AGE-RAGE interaction. (2008)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto, S.
  • 雑誌名: Biochemistry 47 ページ: 12299-12311
  • 査読あり
• [学会発表] 低酸素刺激による微小血管内皮細胞の可溶型VEGF受容体(可溶型Flt-1)産生の抑制 (2011)
  • 著者名/発表者名: 池田崇之、吉冨泰夫、石垣靖人、吉竹佳の、米倉秀人
  • 学会等名: 第83回日本生化学会北陸支部会
  • 発表場所: 金沢大学角間キャンパス(金沢市)
  • 年月日: 2011-05-28
• [学会発表] Soluble VEGFR-1 production is down-regulated under hypoxia in human microvascular endothelial cells by a mechanism involving alternative mRNA 3'-end processing. (2011)
  • 著者名/発表者名: Ikeda T, Yoshitomi Y, Ishigaki Y, Yoshitake Y, Yonekura H
  • 学会等名: 日本分子生物学会第11回春季シンポジウム・金沢国際がん生物学シンポジウム
  • 発表場所: 石川県立音楽堂(金沢市)
• [学会発表] UVB曝露ストレスによる水晶体上皮細胞のAmphiregulin発現の上昇 (2010)
  • 著者名/発表者名: 吉竹佳の、長田ひろみ、池田崇之、石垣靖人、高田尊信、友杉直久、佐々木洋、米倉秀人
  • 学会等名: 第83回日本生化学会大会・第33回日本分子生物学会年会・合同大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸市)
• [学会発表] 低酸素状態は3'端プロセシングを制御することによって血管内皮細胞での可溶型VEGF受容体(可溶型Flt-1)産生を減少させる (2010)
  • 著者名/発表者名: 池田崇之、吉竹佳の、米倉秀人
  • 学会等名: 第83回日本生化学会大会・第33回日本分子生物学会年会・合同大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸市)
• [学会発表] 可溶型VEGF受容体(可溶型Flt-1)産生を制御する選択的3'端プロセシングメカニズムの解明 (2010)
  • 著者名/発表者名: 池田崇之、吉竹佳の、米倉秀人
  • 学会等名: 第12回日本RNA学会年会
  • 発表場所: 一橋記念講堂(東京都)
• [学会発表] UVB暴露による培養水晶体上皮細胞での遺伝子発現変化 (2010)
  • 著者名/発表者名: 長田ひろみ、吉竹佳の、石垣靖人、池田崇之、山代陽子、米倉秀人、佐々木洋
  • 学会等名: 第114回日本眼科学会総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場(名古屋市)
• [学会発表] UVB暴露による培養水晶体上皮細胞での遺伝子発現変化 (2010)
  • 著者名/発表者名: 長田ひろみ、吉竹佳の、石垣靖人、池田崇之、山代陽子、米倉秀人、佐々木洋
  • 学会等名: 第36回水晶体研究会
  • 発表場所: 晴海グランドホテル(東京都)
• [学会発表] UVB曝露による培養水晶体上皮細胞の遺伝子発現変化 (2010)
  • 著者名/発表者名: 長田ひろみ
  • 学会等名: 第114回日本眼科学会総会
  • 発表場所: 第114回日本眼科学会総会
• [学会発表] The role of AGE in atherosclerosis. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto H
  • 学会等名: XXth World Congress of the International Society for Heart Research
  • 発表場所: Kyoto, Japan.
• [学会発表] Enemies and friends within in the pathogenesis and prevention of diabetic vascular complications. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto H
  • 学会等名: The 4th International HMGB1 Symposium SIGNALS OF TISSUE DAMAGE
  • 発表場所: Helsinki, Finland.
• [学会発表] UVB暴露ストレスによる水晶体上皮細胞のAmphiregulin発現の上昇 (2010)
  • 著者名/発表者名: 吉竹佳の
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会第83回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸)
• [学会発表] 低酸素状態はmRNA 3'端プロセシングに影響し血管内皮細胞の可溶型VEGF受容体(可溶型Flt-1)産生を抑制する (2010)
  • 著者名/発表者名: 池田崇之
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会第83回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸)
• [学会発表] UVB曝露による培養水晶体上皮細胞での遺伝子発現変化 (2010)
  • 著者名/発表者名: 長田ひろみ
  • 学会等名: 第36回水晶体研究会
  • 発表場所: 晴海グランドホテル(東京)
• [学会発表] 患者末梢血白血球RNAを用いたStickler症候群原因遺伝子COL2Alの新規3'splice site変異の同定 (2009)
  • 著者名/発表者名: 米倉秀人、池田崇之、吉竹佳の、矢口裕基、長田ひろみ、佐々木洋
  • 学会等名: 第82回日本生化学会大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸市)
• [学会発表] 2型リアノジン受容体遺伝子にはGG-AG配列で切断されるイントロンが存在する (2009)
  • 著者名/発表者名: 池田崇之、野口直哉、吉川雄朗、宇留野晃、那谷耕司、高澤伸、岡本宏、米倉秀人、菅原明
  • 学会等名: 第82回日本生化学会大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸市)
• [学会発表] Identification of the mutation site of Stickler syndrome causative gene in RNA extracted from peripheral blood leukocyte. (2009)
  • 著者名/発表者名: Osada H, Yaguchi H, Yoshitake Y, Sasaki H, Yonekura H
  • 学会等名: The Association for Research in Vision and Ophthalmology
  • 発表場所: Florida, USA
• [学会発表] 末梢血白血球RNAを用いたStickler症候群原因遺伝子の変異部位の同定 (2009)
  • 著者名/発表者名: 長田ひろみ、矢口裕基、佐々木洋、孫立、吉竹佳の、米倉秀人
  • 学会等名: 第113回日本眼科学会総会
  • 発表場所: 東京国際フォーラム(東京都)
• [学会発表] Identification of the Mutation Site of Stickler Syndrome Causative Gene in Rna Extracted from Peripheral Blood Leukocyte (2009)
  • 著者名/発表者名: H.Osada.
  • 学会等名: The Association for Research in Vision and Ophthalmology
  • 発表場所: Florida(USA)
• [学会発表] 末梢血白血球RNAを用いたStickler症候群遺伝子の変異部位の同定 (2009)
  • 著者名/発表者名: 長田ひろみ
  • 学会等名: 第113回日本眼科学会総会
  • 発表場所: 東京国際フォーラム(東京)
• [学会発表] 患者抹消血白血球RNAを用いたStickler症候群原因遺伝子COL2A1の新規3'splice site変異の同定 (2009)
  • 著者名/発表者名: 米倉秀人
  • 学会等名: 第82回日本生化学会大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸)
• [学会発表] 2型リアノジン受容体遺伝子にはGG-AG配列で切断されるイントロンが存在する (2009)
  • 著者名/発表者名: 池田崇之
  • 学会等名: 第82回日本生化学会大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸)
• [学会発表] Micro-RNAs expressed in human microvascular endothelial cells. (2008)
  • 著者名/発表者名: Yoshitake Y, Yonekura H
  • 学会等名: The 33rd FEBS Congress & 11th IUBMB Conference
  • 発表場所: Athens, Greek
• [学会発表] Regulatory mechanisms of alternative 3'-end processing of soluble VEGF receptor pre-mRNA in vascular endothelial cells. (2008)
  • 著者名/発表者名: Yonekura H, Tsuruoka N, Yoshitake Y, Sun L, Watanabe T, Yamamoto H
  • 学会等名: The 33rd FEBS Congress & 11th IUBMB Conference
  • 発表場所: Athens, Greek
• [学会発表] ヒト骨芽細胞のコラーゲン産生およびラットの骨折治癒に対するコラーゲン・トリペプチドの効果 (2008)
  • 著者名/発表者名: 酒井康夫、鶴岡直樹、吉竹佳の、米倉秀人、沼田徳暁
  • 学会等名: 第62回日本栄養食糧学会
  • 発表場所: 女子栄養大学坂戸キャンパス(埼玉県坂戸市)
• [学会発表] カルテオロール塩酸塩持続性点眼液の培養角膜細胞に対する影響 (2008)
  • 著者名/発表者名: 矢口裕基,福田正道,高橋信夫,佐々木洋
  • 学会等名: 第112回日本眼科学会総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(横浜市)
• [学会発表] Micro‐RNAs expressed in human microvascular endothelia1 cells (2008)
  • 著者名/発表者名: Yoshitake, Y.
  • 学会等名: The 33rd FEBS Congress & 11th IUBMB Conference
  • 発表場所: Athens, Greek
• [学会発表] Regulatory mechanisms of alternative 3'-end processing of soluble VEGF receptor pre-mRNA in vascular endothelial cells (2008)
  • 著者名/発表者名: Yonekura, H.
  • 学会等名: The 33rd FEBS Congress & 11th IUBMB Conference
  • 発表場所: Athens, Greek
• [学会発表] An approach toward identification of cis-RNA elements and trans-factors involved in alternative splicing of RAGE gene transcript (2008)
  • 著者名/発表者名: Ohe, K.
  • 学会等名: The 6th Korea-Japan Joint Symposium on Vascular Biology
  • 発表場所: Kanazawa, Japan
• [学会発表] ヒト骨芽細胞のコラーゲン産生およびラットの骨折治癒に対するコラーゲン・トリペプチドの効果 (2008)
  • 著者名/発表者名: 酒井 康夫
  • 学会等名: 第62回日本栄養食糧学会
  • 発表場所: 埼玉県坂戸市
• [学会発表] 血管内皮細胞におけるRAGE mRNA選択的スプライシングの制御機構 (2008)
  • 著者名/発表者名: 大江 和代
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会 合同大会
  • 発表場所: 神戸市
• [学会発表] AβとRAGE(receptor for advanced glycation endproducts) の相互作用におけるesRAGE(endogenous secretory RAGE) の役割 (2008)
  • 著者名/発表者名: 杉原 崇大
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会 合同大会
  • 発表場所: 神戸市