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試料状態変調型固体NMRプローブ開発とその適用

研究課題

研究課題/領域番号 20655017
研究種目

挑戦的萌芽研究

配分区分補助金
研究分野 分析化学
研究機関分子科学研究所

研究代表者

西村 勝之  分子科学研究所, 物質分子科学研究領域, 准教授 (00334631)

研究期間 (年度) 2008 – 2009
研究課題ステータス 完了 (2009年度)
配分額 *注記
3,200千円 (直接経費: 3,200千円)
2009年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
2008年度: 2,500千円 (直接経費: 2,500千円)
キーワード固体NMR / プローブ / 変調 / 脂質膜 / 配向 / 開発 / 膜タンパク質
研究概要

本研究は脂質膜に結合する生体試料を対象として、その試料状態を変調する外部摂動を適用するプローブを製作し、そのプローブを有効活用するための測定法および解析法の開発を行うことを目的とした。
プローブは静止試料を対象とした精密な温度調節機能を持つプローブの開発を行った。完全独自設計のプローブでは回路構成の変更を何度か行ったため、観測核の周波数を固定にした。このため、観測核を可変にする目的で市販のマジックアングルスピニング(MAS)プローブを改造し、独自設計のプローブヘッドに入れ替えた精密な温度制御が可能な静止試料プローブの開発も行った。プローブの製作が大幅に遅れたため、試料変調を行う部分に関しては独立モジュールで実験を行い、期間内には目的のプローブの試作品の完成に至った。最終調整を行い、今後NMR測定を行う。
プローブ製作と平行して、上記の必要な試料調製技術の開発を行った。試料は自発磁場配向する試料を前提としたため、室温以下で安定的な自発磁場配向を可能にする新たな脂質組成のバイセルの開発を行い、これに成功し特許の出願を行った。また、脂質膜表面に結合してホスフォリパーゼCδ1(PLC-δ1)の脂質結合部位であるPHドメインの脂質膜局率に依存した構造変化に関する固体NMRを用いた研究を行った。さらに、配向試料を対象とした感度増強を目的とした新規分極移動法の開発に成功した。

報告書

(2件)
  • 2009 実績報告書
  • 2008 実績報告書
  • 研究成果

    (7件)

すべて 2009 2008 その他

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (3件) 備考 (1件) 産業財産権 (1件)

  • [雑誌論文] Influence of membrane curvature on the structure of the membrane-associated pleckstrin homology domain of phospholipase C-δ12009

    • 著者名/発表者名
      上釜奈緒子、西村勝之, 他X名
    • 雑誌名

      Biochimica et Biophysica Acta 1788

      ページ: 2575-2583

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Influence of Membrane Curvature on the Structure of the Membrane-Associated Pleckstrin Homology Domain of Phospholipase C-δ12008

    • 著者名/発表者名
      上釜奈緒子
    • 雑誌名

      分子科学研究所 Annual review 2008

      ページ: 63-63

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] 配向試料のためのオフセット依存性を改善した固体NMR分極移動法の開発2009

    • 著者名/発表者名
      西村勝之
    • 学会等名
      第48回NMR討論会
    • 発表場所
      九州大学(福岡県)
    • 年月日
      2009-11-10
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [学会発表] 固体NMRを用いた不飽和脂質を含有するバイセルに関する研究2009

    • 著者名/発表者名
      上釜奈緒子
    • 学会等名
      第48回NMR討論会
    • 発表場所
      九州大学(福岡県)
    • 年月日
      2009-11-10
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [学会発表] Planer Lipid Bilayers System using Bicelle for Structural Characterization of Membrane Bound Proteins by Solid State NMR2009

    • 著者名/発表者名
      上釜奈緒子
    • 学会等名
      第47回生物物理学会年会
    • 発表場所
      徳島文理大学(徳島県)
    • 年月日
      2009-10-30
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [備考]

    • URL

      http://www.ims.ac.jp/english/know_en/publications/ann_rev_2008/index.html

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [産業財産権] リン脂質混合物及びバイセル2009

    • 発明者名
      西村勝之, 上釜奈緒子
    • 権利者名
      自然科学研究機構
    • 産業財産権番号
      2009-245245
    • 出願年月日
      2009-10-26
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書

URL: 

公開日: 2008-04-01   更新日: 2016-04-21  

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