生体内分解性高分子微粒子を用いた子宮局所におけるドラッグデリバリーシステムの開発

• 研究課題/領域番号: 20659258
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 産婦人科学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 木村 正 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (90240845)
• 研究分担者: 筒井 建紀 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (00294075) ; 中村 仁美 大阪大学, 医学部附属病院, 特任臨床検査技師 (80467571)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2009
• 研究課題ステータス: 完了 (2009年度)
• 配分額: 3,200千円 (直接経費: 3,200千円); 2009年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円); 2008年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
• キーワード: 子宮 / drug delivery system (DDS / カチオン化多糖 / bio-nanocapsule(BNC) / drug delivery system(DDS) / 不妊 / pre-eclampsia

研究概要

子宮は特に子宮内膜を標的とした場合、全身投与する事なく、子宮腔内に直接アプローチする事により、局所の標的化が可能な臓器である。本研究では、子宮腔内に直接投与する事ができるような、新たな子宮に対するdrug delivery system(DDS)として、(1)カチオン化多糖および(2)B型肝炎ウイルス(HBV)を利用したウイルス粒子を用いた中空ナノ粒子であるbio-nanocapsule(BNC)を用いて、まずこれらが子宮に対する遺伝子導入の担体として用いる事ができるのか検討し、それぞれの最適化を行った。
子宮内膜においては多くの糖鎖の発現が報告されているものの、妊娠に係る病態および子宮体癌に特異的なものは未だ見つかっていない。そこで、本研究ではカチオン化多糖として、経口薬剤のコーティング剤として既に広く用いられている、デキストランを用いた。スペルミンでカチオン化したデキストランとplasmid DNAのナノオーダーの複合体を作製した。
N/P=0.25、アミノ基導入率5%のデキストラン-DNA複合体において、有効な遺伝子導入効率が得る事ができた。
BNCは酵母を用いて精製され、この粒子はすでに全世界で20年以上も臨床で使用されてきたB型肝炎ワクチンと同様の構造であり、BNCを臨床応用する際の毒性や安全性に対する懸念を著しく低減できる。BNCはHBVがその表面に肝臓に特異的な結合部位を持つために、全身投与したとしても肝臓に特異的に送達される特性を持っている。我々はこの肝臓に特異的な結合部位であるpre-S1領域のN末端をTATペプチドに置換した。TAT-BNCにより、子宮内膜上皮細胞において一過性の有効な遺伝子効率が得る事ができた。今回、TAT修飾したpre-S1領域は糖鎖やサイトカインなどを修飾する事も可能であり、将来病態特異的な物質が明らかになれば、細胞標的化したDDSとしてこれを用いる事ができると考える。
これら結果より、カチオン化デキストランおよびTAT-BNCが子宮に対する新たなDDSに成り得る事が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Concurrent weekly nedaplatin, external beam radiotherapy and high-dose rate brachytherapy in patients with FIGO stage IIIB cervical cancer : A comparison with a cohort treaated by radiotheraphy alone (2010)
  • 著者名/発表者名: Mabuchi, S., Ugaki, H., Isohashi, F., Yoshioka, Y., Temma, K., Yoda-Hashimoto, N., Takeda, T., Yamamoto, T., Yoshino, K., Nakajima, R., Kuragaki, C., Morishige, K., Enomoto, T., Inoue, T., Kimura, T.
  • 雑誌名: Gynecologic and Obstetric Investigation 69 ページ: 224-232
  • 査読あり
• [雑誌論文] Temporal and spatial expression of tumor-associated antigen RCASI in pregnant mouse uterus. (2010)
  • 著者名/発表者名: Tskitishvili, E., Nakamura, H., Kinugasa-Taniguchi, Y., Kanagawa, T., Kimura, T., Tomimatsu, T., Shimoya, K.
  • 雑誌名: Int J Gynecol Cancer. 63 ページ: 137-143
  • 査読あり
• [雑誌論文] Spinal subarachnoid hematoma following spinal anesthesia in a patient with HELLP syndrome. (2010)
  • 著者名/発表者名: Koyama, S., Tomimatsu, T, Kanagawa, T., Sawada, K., Tsutsui, T., Kimura, T., Chang, YS., Wasada, K., Imai, S., Murata, Y.
  • 雑誌名: Int J Obstet Anesth. 19 ページ: 87-91
  • 査読あり
• [雑誌論文] Oxidative stress-induced S100B protein from placenta and amnion affects soluble Endoglin release from endothelial cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Tskitishvili, E., Sharentuya, N., Temma-Asano, K., Mimura, K., Kinugasa-Taniguchi, Y., Kanagawa, T Fukuda, H., Kimura, T, Tomimatsu, T., Shimoya, K.
  • 雑誌名: Mol Hum Reprod 16 ページ: 188-199
  • 査読あり
• [雑誌論文] A case of complete hydatidiform mole with co-existent fetus; conclusive diagnosis of androgenesis of the molar placenta by variation of paternal acrocentric short arm (2010)
  • 著者名/発表者名: Koyama, S., Tomimatsu, T., Sawada, K., Kanagawa, T., Isobe, A., Kinugasa, Y., Tsutsui,T,,Kmura T.
  • 雑誌名: America Journal of Perinatology 27 ページ: 143-149
  • 査読あり
• [雑誌論文] 妊娠子宮局所におけるマクロファージの役割 (2010)
  • 著者名/発表者名: 中村仁美、木村正
  • 雑誌名: 医学のあゆみ 233巻(In press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Spinal subarachnoid hematoma following spinal anesthesia in a patient with HELLP syndrome (2009)
  • 著者名/発表者名: Koyama, S., Tomimatsu, T., Kanagawa, T., Sawada, K., Tsutsui, T., Kimura, T., Chang YS., Wasada.K., Imai, S., Murata, Y.
  • 雑誌名: Int Obestet Anesth 19 ページ: 87-91
  • 査読あり
• [雑誌論文] Evidence that oxytocin exerts anxiolytic effects via oxytocin receptor expressed in serotonergic neurons in mice (2009)
  • 著者名/発表者名: Yoshida, M., Takayanagi, Y., Inoue, K., Kimura, T,, Young, L.J., Onaka, T., Nishimori, K.
  • 雑誌名: Journal of Neuroscience 29 ページ: 2259-2271
  • 査読あり
• [雑誌論文] Uterine cervical carcinoma : preoperative staging 3.0-T MR imaging-comparison with1.5-TMR imaging (2009)
  • 著者名/発表者名: Hori, M., Kim, T., Murakami, T., Imaoka, I., Onishi, H., Tomoda, K., Tsutsuui, T., Enomoto, T., Kimura, T., Nakamura, H.
  • 雑誌名: Radiology 251 ページ: 96-104
  • 査読あり
• [雑誌論文] The activity of carboplatin and paclitaxel for recurrent cervical cancer after definitive radiotherapy (2009)
  • 著者名/発表者名: Mabuchi, S., Morishige, K., Fujita, M., Tsutsui, T., Sakata, M., Enomoto T., Kimura, T.
  • 雑誌名: Gynecologic Oncology 113 ページ: 200-204
  • 査読あり
• [雑誌論文] Amniotic fluid `sludge' detected in patients with subchorionic hematoma : a report of two cases (2009)
  • 著者名/発表者名: Tskitishvili, E,, Tomimatsu, T., Kanagawa, T., Sawada, Y., Kinugasa, Y., Mimura, K., Kimura, T.
  • 雑誌名: Ultrasouond Obstet Gynecol 33 ページ: 484-486
  • 査読あり
• [雑誌論文] Peripheral quantitative computed tomography is useful to monitor response to alendronate therapy in postmenopausal women (2009)
  • 著者名/発表者名: Sawada, K., Morishige, K., Nishio, Y., Hayakawa, J., Mabuchi, S., Iosbe, A., Ogata, S., Sakata, M., Ohmichi, M., Kimura, T.
  • 雑誌名: J Bone Miner Metab 27 ページ: 175-181
  • NAID: 10025336716
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cesarean scar pregnancies succseefully treated with methotrexate (2009)
  • 著者名/発表者名: Muraji, M., Mabuchi, S., Hisamoto, K., Muranishi, M., Kanagawa, T., Nishio, Y., Kimura, T.
  • 雑誌名: Acta Obstetricia et Gynecologica Scandinavica 88 ページ: 720-723
  • 査読あり
• [雑誌論文] Wilms' tumor I (WTI) peptide immunotherapy for gynecological malignancy (2009)
  • 著者名/発表者名: Ohno, S., Kyo, S., Myojo, S., Dohi, S., Ishizaki, J., Miyamoto, K-I., Morita, S., Sakamoto, J-I., Enomoto, T., Kimura, T., Oka, Y., Tsuboi, A., Sugiyama, H., Inoue, M.
  • 雑誌名: Anticancer Research 29 ページ: 4779-4784
  • 査読あり
• [雑誌論文] The activity of carboplatin and paclitaxel for recurrent cervical cancer after definitive radiotherapy (2009)
  • 著者名/発表者名: Mabuchi, S., Morishige, K., Fujita, M., Tsutsui, T., Sakata, M., Enomoto, T., Kimura, T.
  • 雑誌名: Gynecologic Oncology 113 ページ: 200-204
  • 査読あり
• [雑誌論文] A case of recurrent cesarean scar pregnancy (2009)
  • 著者名/発表者名: Mabuchi, S., Kawase, C., Muraji, M., Kanagawa, T., Kimura, T.
  • 雑誌名: Acta Obstetricia et Gynecologica Scandinavica 88 ページ: 1059-1060
  • 査読あり
• [雑誌論文] Metal transcription factor-I is involved in hypoxia-dependent regulation of placenta growth factor in trophoblast-derived cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Nishimoto, F., Sakata, M., Minekawa, R., Okamoto, Y., Miyake, A., Isobe, A., Yamamoto, T., Takeda, T., Ishida, E., Sawada, K., Morishige, K-I., Kimura, T.
  • 雑誌名: Endocrinology 150 ページ: 1801-1808
  • 査読あり
• [雑誌論文] Up-regulation of alpha5-integrin by E-cadherin loss in hypoxia and its key role in the migration of extravillous trophoblast cells during early implantation. (2009)
  • 著者名/発表者名: Arimoto-Ishida, E., Sakata, M., Sawada, K., Nakayama, M., Nishimoto F., Mabuchi, S., Takeda, T., Yamamoto, T., Isobe, A., Okamoto, Y., Lengyel, E., Suehara, N., Morishige, K., Kimura, T.
  • 雑誌名: Endocrinology. 150 ページ: 4306-4315
  • 査読あり
• [雑誌論文] Calcineurin/NFAT pathway : a novel regulator of parturition (2009)
  • 著者名/発表者名: Tabata, C., Ogita, K., Sato, K., Nakamura, H., Negoro, H., Kumasawa, K., Temma-Asano, K., Tsutsui, T., Nishimori, K., Kimura, T.
  • 雑誌名: American Journal of Reproductive Immunology 62 ページ: 44-50
  • 査読あり
• [雑誌論文] MR Imaging of endometrial carcinoma for preoperative staging at 3.O T : comparison with imaging at 1.5 T (2009)
  • 著者名/発表者名: Hori, M., Kim, T., Murakami, T., Imaoka, I., Onishi, H., Nakamoto, A., Nakaya, Y., Tomoda, K., Tsutsui, T., Enomoto, T., Kimura, T., Nakamura, H. ,
  • 雑誌名: Journal of Magnetic Resonance Imaging 30 ページ: 621-630
  • 査読あり
• [雑誌論文] mTOR is a promising therapeutic target both in cisplatin-sensitive and cisplatin-resistant clear cell carcinoma of the ovary. (2009)
  • 著者名/発表者名: Mabuchi, S., Kawase, C., Aitomare, DA., Morishige, K., Sawada, K., Hayashi, M., Tsujimoto, M., Yamoto, M., Klein-Szanto, AJ., Schilder, RJ., Ohmichi, M., Testa, JR., Kimura, T.
  • 雑誌名: Clin Cancer Res 15 ページ: 5404-5413
  • 査読あり
• [雑誌論文] Postoperative concurrent nedaplatin-based chemoradiotherapy imprves survival in early-stage cervical cancer patients with adverse risk factors. (2009)
  • 著者名/発表者名: Mabuchi, S., Morishige, K., Isohashi, F., Yoshioka., Y, Takeda, T., Yamamoto, T., Yoshino, K., Enomoto, T, Inoue, T., Kimura, T.
  • 雑誌名: Gynecologic Oncology 115 ページ: 482-487
  • 査読あり
• [雑誌論文] Postpartum outcome of cervical intraepithelial neoplasia in pregnant women determined determined b route of delivery (2009)
  • 著者名/発表者名: Ueda, Y., Enomoto, T., Miyatake, T., Yoshino, K., Fujita, M., Miyake, T., Fujiwara, K., Muraji, M., Kanagawa,
  • 雑誌名: Reproductive Science 16 ページ: 1034-1039
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fasudil inhibits lysophosphatidic acid-induced invasiveness of human ovarian cancer cells. (2009)
  • 著者名/発表者名: Ogata, S., Morishige, K., Sawada, K., Hashimoto, K., Mabuchi, S., Kawase, C., Ooyagi, C., Sakata, M., Kimura, T.
  • 雑誌名: Int J Gynecol Cancer. 19 ページ: 1473-1480
  • 査読あり
• [雑誌論文] 妊娠子宮局所におけるマクロファージの役割 (2009)
  • 著者名/発表者名: 中村仁美、香山晋輔、谷口武、荻田和秀、熊澤恵一、張慶、筒井建紀、古山将康、杉野法広、田村博史、金田安史、木村正
  • 雑誌名: 生殖内分泌学会雑誌 14巻 ページ: 35-40
• [雑誌論文] Late postpartum eclampsia : report of two cases managed by uterinecurettage and review of the literature (2008)
  • 著者名/発表者名: Matsuo K., Rimura T., et al.
  • 雑誌名: Am J Perinatol 24 ページ: 257-266
  • 査読あり
• [雑誌論文] Relationship between metabolic syndrome and uterine leiomyomata : a case-control study (2008)
  • 著者名/発表者名: Takeda T., Kimura T., et al
  • 雑誌名: Gynecol Obstet Invest 66 ページ: 14-17
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dual repressive effect of angiotensin II-type l receptor blockertelmisartan on angiotensin II-induced and estradiol-induceduterine leiomyoma cell proliferation (2008)
  • 著者名/発表者名: Isobe S., Kimura T., et al
  • 雑誌名: Human Reproduction 23 ページ: 440-446
  • 査読あり
• [雑誌論文] Infusion of oxytocin induces successful delivery in prostanoid FP-receptor-deficient mice (2008)
  • 著者名/発表者名: Rawamata M., Kimura K., et al
  • 雑誌名: Molecular and Cellular Endocrinology 283 ページ: 32-37
  • 査読あり
• [雑誌論文] Maternal urinoma during pregnancy (2008)
  • 著者名/発表者名: Ushioda N., Kimura T., et al
  • 雑誌名: Journal of Obstetrics and Gynaecology Research 34 ページ: 88-91
  • NAID: 10021250356
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inununisation with a plasmid DNA vaccine encoding gonadotrophinreleasing hormone (GnRH-1) and T-helper epitopes in salinesuppresses rodent fertility (2008)
  • 著者名/発表者名: Khan M. A. H, Kimura T., et al
  • 雑誌名: Vaccine 26 ページ: 1365-1374
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect iveness of the herbal medicine Daikenchuto forradiat ion-induced enteritis (2008)
  • 著者名/発表者名: Takeda T., Kimura T., et al
  • 雑誌名: The Journal of Alternative and Complementary Medicine 14 ページ: 753-755
  • 査読あり
• [雑誌論文] In vitro and in vivo assays to analyze the contribution of Rhokinase in angiogenesis (2008)
  • 著者名/発表者名: Sawada K., Kimura T., et al
  • 雑誌名: Methods in Enzymology 439 ページ: 395-412
  • 査読あり
• [雑誌論文] Frequent inactivation of RUNX3 in endometrial carcinoma (2008)
  • 著者名/発表者名: Yoshizaki T., Rifflura T. etal.
  • 雑誌名: Gynecologic Oncology 110 ページ: 439-444
  • 査読あり
• [雑誌論文] PIK3CA gene mutations and amplifications in uterine cancers, identi fied by methods that avoid confounding by PIR3CA pseudogeneseauences (2008)
  • 著者名/発表者名: Miyake T., Kimura T., et al
  • 雑誌名: Cancer letter 261 ページ: 120-126
  • 査読あり
• [雑誌論文] The human tumor-associated ant igen RCASI in pregnanciescomplicated by pre-eclampsia (2008)
  • 著者名/発表者名: Tskitishvili E., Kimura T. etal.
  • 雑誌名: Journal of Reproductive Immunology 77 ページ: 100-108
  • 査読あり
• [雑誌論文] Maintnance treatment wi th bevacizumab prolongs survival in an invivo ovarian cancer model (2008)
  • 著者名/発表者名: Mabuchi S., Kimura T., et al
  • 雑誌名: Clinical Cancer Research 14 ページ: 7781-7789
  • 査読あり
• [雑誌論文] Spatio-temporal image correlation (SITC)used by generalobstetrician : is as effect ive as 2D fetal echocardiography scannedby experts (2008)
  • 著者名/発表者名: Wani tpongpan T. Rimura T., et al
  • 雑誌名: Perinatal Diagnosis 28 ページ: 923-928
  • 査読あり
• [雑誌論文] 産婦人科医療体制に発想の転換を一過酷な労働と高い訴訟リスクからの脱却 (2008)
  • 著者名/発表者名: 木村 正
  • 雑誌名: 都市問題 99 ページ: 17-22
  • 査読あり
• [雑誌論文] 子宮筋腫に対する子宮動脈塞栓術 (2008)
  • 著者名/発表者名: 武田 卓, 木村 正, 他
  • 雑誌名: 産婦人科治療 97 (2) ページ: 157-159
  • 査読あり
• [雑誌論文] 不正出血・過多月経・大量出血に対する対応 (2008)
  • 著者名/発表者名: 木村 正
  • 雑誌名: 救急医学 32 ページ: 1067-1072
  • 査読あり
• [雑誌論文] 卵巣癌における血管新生抑制療法 (2008)
  • 著者名/発表者名: 馬淵誠二, 木村 正, 他
  • 雑誌名: 臨床婦人科産科 62 (10) ページ: 1339-1345
  • 査読あり
• [雑誌論文] 臨床医の婦人科がん検診-病理標本を見ない実地医科のために- (2008)
  • 著者名/発表者名: 木村 正
  • 雑誌名: 産婦人科治療 97 (3) ページ: 225-231
  • 査読あり
• [雑誌論文] 婦人科がんの検診-その効果と問題点- 企画者のことば (2008)
  • 著者名/発表者名: 木村 正
  • 雑誌名: 産婦人科の実際 57 (9) ページ: 1340-1340
  • 査読あり
• [雑誌論文] 卵巣がんスクリーニングの有効性と限界 (2008)
  • 著者名/発表者名: 上田 豊, 木村 正, 他
  • 雑誌名: 産婦人科の実際 57 (9) ページ: 1341-1404
  • 査読あり
• [学会発表] Endometrial Stat3 activation and implantation failure (2009)
  • 著者名/発表者名: Kimura, T.
  • 学会等名: IUPS Satellite Symposium on Endometrial Receptivity and Blastocyst Implantation
  • 発表場所: lnamori Hall, Kyoto University
  • 年月日: 2009-07-25
• [学会発表] Mouse model of human infertility : transient and local inhibition of endo metrial STAT-3 activation results in implantation failure (2009)
  • 著者名/発表者名: Kimura, T.
  • 学会等名: 5^<th> lnternational Conference on the Female Reproductive Tact
  • 発表場所: Frauenchiemsee, Germany
  • 年月日: 2009-05-17
• [学会発表] 一過性遺伝子導入方法を用いた着床現象の検討(シンポジウム) (2008)
  • 著者名/発表者名: 中村仁美, 筒井建紀, 木村 正, 他
  • 学会等名: 第23回日本生殖免疫学会
  • 発表場所: 富山国際会議場
  • 年月日: 2008-12-07
• [学会発表] 着床期子宮局所におけるSTAT-3活性の役割 (2008)
  • 著者名/発表者名: 中村仁美, 筒井建紀, 木村 正, 他
  • 学会等名: 第13回日本内分泌学会
  • 発表場所: 大阪国際会議場
  • 年月日: 2008-11-29
• [学会発表] 着床期子宮内膜におけるマクロファージの役割 (2008)
  • 著者名/発表者名: 中村仁美, 筒井建紀, 木村 正, 他
  • 学会等名: 第53回日本生殖医学会総会・学術講演会
  • 発表場所: 神戸国際会議場
  • 年月日: 2008-10-24
• [学会発表] 子宮局所における一過性遺伝子導入方法を用いた着床不全マウスモデルの作製 (2008)
  • 著者名/発表者名: 香山晋輔, 中村仁美, 筒井建紀, 木村 正, 他
  • 学会等名: 第53回日本生殖医学会総会・学術講演会
  • 発表場所: 神戸国際会議場
  • 年月日: 2008-10-24
• [学会発表] 教育講演5「一過性遺伝子導入マウスを用いた妊娠成立期における子宮内膜機能の解析」 (2008)
  • 著者名/発表者名: 木村 正
  • 学会等名: 第53回日本生殖医学会総会・学術講演会
  • 発表場所: 神戸国際会議場
• [学会発表] 子宮局所における一過性遺伝子導入方法を用いたヒト不妊症のマウスモデルの作製 (2008)
  • 著者名/発表者名: 中村仁美, 筒井建紀, 木村 正, 他
  • 学会等名: 第2 4回日本DDS学会
  • 発表場所: 六本木アカデミーヒルズ
• [図書] スーパーローテイターのための内視鏡外科手術トレーニングマニュアル (2008)
  • 著者名/発表者名: 木村 正
  • 総ページ数: 2
  • 出版者: シュプリンガー・ジャパン
• [図書] 今日の治療指針 (2008)
  • 著者名/発表者名: 木村 正
  • 総ページ数: 2
  • 出版者: 医学書院
• [備考] 第13回日本生殖内分泌学会学術奨励賞受賞