遺伝生化学的手法を用いたスフィンゴ糖脂質代謝・輸送関連因子の探索と解析

• 研究課題/領域番号: 20770114
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 機能生物化学
• 研究機関: 国立感染症研究所
• 研究代表者: 山地 俊之 国立感染症研究所, 細胞化学部, 主任研究官 (50332309)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2010年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2009年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2008年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
• キーワード: スフィンゴ糖脂質 / 志賀毒素 / 糖転移酵素 / トランスゴルジネットワーク / 糖鎖 / 脂質 / 細菌毒素 / 代謝 / スクリーニング

研究概要

スフィンゴ脂質の代謝・細胞内輸送機構に影響を与える新規因子を探索するため、志賀毒素耐性を指標に遺伝生化学的スクリーニングを行ったところ、過剰発現により志賀毒素の受容体である糖脂質Gb3を低下させる因子として、複数回膜貫通タンパクTMBIMファミリーに属するGRINAのC末側断片(GRINA-C)を同定した。GRINA-C及び他のTMBIMファミリー分子であるFAIM2の過剰発現により、Gb3合成酵素の量及び細胞内分布に影響を与えたことから、糖脂質代謝に関して糖転移酵素に対する新たな制御機構の可能性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Transmembrane BAX inhibitor motif containing (TMBIM) family proteins perturb a trans-Golgi network enzyme, Gb3 synthase, and reduce Gb3 biosynthesis. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yamaji, T., Nishikawa, K., Hanada, K.
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. 285 ページ: 35505-35518
  • 査読あり
• [雑誌論文] Siglec-7 mediates non-apoptotic cell death independently of its immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motifs in monocytic cell line U937. (2010)
  • 著者名/発表者名: Mitsuki, M., Nara, K., Yamaji, T., Enomoto A., Kanno, M., Yamaguchi, Y., Yamada, A., Waguri, S., Hashimoto, Y. (equal contribution)
  • 雑誌名: Glycobiology 20 ページ: 395-402
  • 査読あり
• [雑誌論文] Transmembrane BAX inhibitor motif containing (TMBIM) family proteins perturbs a trans-Golgi network enzyme, Gb3 synthase, and reduces Gb3 biosynthesis (2010)
  • 著者名/発表者名: Yamaji, T., Nishikawa, K., Hanada, K.
  • 雑誌名: Journal of Biological Chemistry 巻: 285 ページ: 35505-35518
  • 査読あり
• [雑誌論文] Siglec-7 mediates nonapoptotic cell death independently of its immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motifs in monocytic cell line U937 (2010)
  • 著者名/発表者名: Mitsuki, M., Nara, K., Yamaji, T., Enomoto, A., Kanno, M., Yamaguchi, Y., Yamada, A., Waguri, S., Hashimoto, Y.
  • 雑誌名: Glycobiology 20(3) ページ: 395-402
  • 査読あり
• [雑誌論文] CERT-mediated trafficking of ceramide. (2009)
  • 著者名/発表者名: Hanada, K., Kumagai, K., Tomishige, N., Yamaji, T.
  • 雑誌名: Biochim. Biophys.A cta 1791 ページ: 684-691
  • 査読あり
• [雑誌論文] CERT-mediated trafficking of ceramide (2009)
  • 著者名/発表者名: Hanada, K., Kumagai, K., Tomishige, N., Yamaji, T.
  • 雑誌名: Biochim Biophys Acta. 1791(7) ページ: 684-691
  • 査読あり
• [雑誌論文] CERT-mediated trafficking of ceramide (2009)
  • 著者名/発表者名: Hanada, K., Kumagai, K., Tomishige, N., and Yamaji, T.
  • 雑誌名: Biochim Biophys Acta. (印刷中)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Two sphingolipid transfer proteins, CERT and FAPP2 : Their roles in sphingolipid metabolism. (2008)
  • 著者名/発表者名: Yamaji, T., Kumagai, K., Tomishige, N., Hanada, K.
  • 雑誌名: IUBMB Life 60 ページ: 511-518
  • 査読あり
• [雑誌論文] Two sphingolipid transfer proteins, CERT and FAPP2 : Their roles in sphingolimd metabolism (2008)
  • 著者名/発表者名: Yamaji, T., Kumagai, K., Tomishige, N., and Hanada, K.
  • 雑誌名: IUBMB Life. 60(8) ページ: 511-518
  • 査読あり
• [学会発表] 糖鎖受容体Siglec-7を解する細胞死の分子機構の解明 (2010)
  • 著者名/発表者名: 奈良清光、三ツ木元章、榎本綾子、菅野真由美、山口芳樹、二川了次、城谷圭朗、山地俊之、山田茜、和栗聡
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2010-12-10
• [学会発表] 糖鎖受容体Siglec-7を解する細胞死の分子機構の解明 (2010)
  • 著者名/発表者名: 奈良清光、三ツ木元章、榎本綾子、菅野真由美、山口芳樹、二川了次、城谷圭朗、山地俊之、山田茜、和栗聡
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(兵庫県)
  • 年月日: 2010-12-10
• [学会発表] Globotriaosylceramide (Gb3) is reduced by the expression of hydrophobic polypeptides including TMBIM family : Isolation of Shiga toxin-resistant genes (2010)
  • 著者名/発表者名: Yamaji, T., Nishikawa, K., Hanada, K.
  • 学会等名: The 28^<th> Naito Conference on Glycan Expression and Regulation[I]
  • 発表場所: 湘南
  • 年月日: 2010-07-29
• [学会発表] Globotriaosylceramide (Gb3) is reduced by the expression of hydrophobic polypeptides including TMBIM family : Isolation of Shiga toxin-resistant genes (2010)
  • 著者名/発表者名: Yamaji, T., Nishikawa, K., Hanada, K.
  • 学会等名: The 28^<th> Naito Conference on Glycan Expression and Regulation [I]
  • 発表場所: 湘南国際村センター(神奈川県)
  • 年月日: 2010-07-29
• [学会発表] Globotriaosylceramide (Gb3) is reduced by the expression of hydrophobic polypeptides including TMBIM family : Isolation of Shiga toxin-resistant genes (2010)
  • 著者名/発表者名: Yamaji, T., Nishikawa, K., Hanada, K.
  • 学会等名: The 27^<th> Naito Conference on Membrane Dynamics and Lipid Biology [I]
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2010-07-01
• [学会発表] Globotriaosylceramide (Gb3) is reduced by the expression of hydrophobic polypeptides including TMBIM family : Isolation of Shiga toxin-resistant genes (2010)
  • 著者名/発表者名: Yamaji, T., Nishikawa, K., Hanada, K.
  • 学会等名: The 27^<th> Naito Conference on Membrane Dynamics and Lipid Biology [I]
  • 発表場所: シャトレーゼガトーキンクダムサッポロ(北海道)
  • 年月日: 2010-07-01
• [学会発表] Siglec-7を介したU937細胞の細胞死に必要な細胞外領域の同定" 日本生化学会東北支部 (2010)
  • 著者名/発表者名: 奈良清光、菅野真由美、三ツ木元章、山地俊之、山口芳樹、和栗聡、橋本康弘
  • 学会等名: 第76回例会・シンポジウム
  • 発表場所: 福島
  • 年月日: 2010-05-08
• [学会発表] Siglec-7を介したU937細胞の細胞死に必要な細胞外領域の同定 (2010)
  • 著者名/発表者名: 奈良清光、菅野真由美、三ツ木元章、山地俊之、山口芳樹、和栗聡、橋本康弘
  • 学会等名: 日本生化学会東北支部 第76回例会・シンポジウム
  • 発表場所: コラッセ福島(福島県)
  • 年月日: 2010-05-08
• [学会発表] Binding specificity of siglec-7 prepared from various animal cell lines (2009)
  • 著者名/発表者名: Ito, S., Ito, N., Tsuchida, A., Tokuda, N., Yagi, H., Kato, K., Mitsuki, M., Yamaji, T., Hashimoto, Y., Crocker, P.R., Furukawa K.
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2009-12-10
• [学会発表] 志賀毒素耐性遺伝子の単離 (2009)
  • 著者名/発表者名: 山地俊之、西川喜代孝、花田賢太郎
  • 学会等名: 第82回日本生化学会大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2009-10-24
• [学会発表] 志賀毒素耐性遺伝子の単離 (2009)
  • 著者名/発表者名: 山地俊之、西川喜代孝、花田賢太郎
  • 学会等名: 第29回日本糖質学会年会
  • 発表場所: 高山
  • 年月日: 2009-09-11
• [学会発表] Binding specificity of siglec-7 prepared from various animal cell lines (2008)
  • 著者名/発表者名: Ito, S., Ito, N., Tsuchida, A., Tokuda, N., Yagi, H., Kato, K., Mitsuki, M., Yamaji, T., Hashimoto, Y., Crocker, P. R., and Furukawa K.
  • 学会等名: 日本分子生物学会年会・日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2008-12-10