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ミオシンVの正確な歩幅決定プロセスのマイクロ秒追跡

研究課題

研究課題/領域番号 20770121
研究種目

若手研究(B)

配分区分補助金
研究分野 生物物理学
研究機関大阪大学

研究代表者

西川 宗  阪大, 生命機能研究科, 助教 (60402997)

研究期間 (年度) 2008
研究課題ステータス 完了 (2009年度)
配分額 *注記
4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円)
2009年度: 780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円)
2008年度: 3,640千円 (直接経費: 2,800千円、間接経費: 840千円)
キーワードミオシンV / ミオシンVI / 暗視野顕微鏡 / 金粒子 / 分解能 / ハロタグ / A
研究概要

本年度の研究目標は「新しい暗視野顕微鏡法の時空間分解能の評価と改善」および「金粒子の固定法の確立」であった. 第1の目標に関しては, 我々は全反射照明を応用した新しい暗視野顕微鏡技術を確立しスペックルや干渉縞の問題を解決した. 結果, 40nmの金プローブでは100μ秒, 80nmでは10μ秒の時間分解能でオングストローム単位の空間分解能を実現した. 第2の目標に関しては, ミオシンVのモータードメイン(N末端)にハロタグを用いたビオチンラベル法を確立し, アビジン標識した金プローブを効率よく結合することが可能になった. これらを用いて歩幅決定プロセスのマイクロ秒追跡を行い, 以下が明らかになった.
ミオシンVは80nmのステップを実現するために, まず50nm地点で16m秒だけ停留し±40nmの範囲をくまなく探索する. 停留地点から30nm先の最適位置を検出した後は, 300μ秒以内にステップ反応を終了する. 同様の方法論を用いて, ミオシンVIは2種類のフォワードステップをもつことが明らかになった. 80nmステップは50nm地点で停留し, 40nmステップは10nm地点で停留する. これはミオシンVIの軸足の向きが2種類存在することを意味し, 同時にバックステップを含む多彩な歩行様式メカニズムも明らかになった.

報告書

(1件)
  • 2008 実績報告書
  • 研究成果

    (4件)

すべて 2008

すべて 学会発表 (3件) 図書 (1件)

  • [学会発表] ミオシン5の高速1分子イメージング2008

    • 著者名/発表者名
      西川宗
    • 学会等名
      日本生物物理学会第46回年会
    • 発表場所
      福岡国際会議場
    • 年月日
      2008-12-05
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] ミオシン6の高速1分子イメージング2008

    • 著者名/発表者名
      有本行雄
    • 学会等名
      日本生物物理学会第46回年会
    • 発表場所
      福岡国際会議場
    • 年月日
      2008-12-05
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] Single molecule detection of two-legged nano-machines2008

    • 著者名/発表者名
      西川宗
    • 学会等名
      2^<nd> International Symposium on Bio-nanosystems
    • 発表場所
      Koshiba Hall, the University of Tokyo
    • 年月日
      2008-10-31
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [図書] "ミオシンの運動方向を逆転する仕掛け"別冊「化学」「最新分子マシン」2008

    • 著者名/発表者名
      西川宗
    • 出版者
      化学同人
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書

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公開日: 2008-04-01   更新日: 2016-04-21  

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