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不斉反応を触媒する酵素群の分子育種:非天然アミノ酸ケミカルライブラリーの構築

研究課題

研究課題/領域番号 20780076
研究種目

若手研究(B)

配分区分補助金
研究分野 応用生物化学
研究機関高知大学

研究代表者

村松 久司  高知大学, 教育研究部・総合科学系, 准教授 (90437343)

研究期間 (年度) 2008 – 2011
研究課題ステータス 完了 (2011年度)
配分額 *注記
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2011年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2010年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2009年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2008年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
キーワード不斉合成 / タンパク質の耐熱化 / 非タンパク質性アミノ酸 / N-メチル-L-アミノ酸脱水素酵素 / Pseudomonas putida / DpkA / N-メチル-L-アミノ酸脱水酵素 / 安全性 / 不斉反応
研究概要

Pseudomonas putida由来のdpkA遺伝子にエラープローンPCRでランダム変異を導入し、耐熱性が向上した変異型酵素V117M、Q302Rを取得した。野生型酵素と耐熱化酵素V117M、Q302R、V117M/ Q302Rを精製して機能解析した。耐熱化酵素は野生型酵素よりも温度やpHの変化に対して高い安定性を示したが、基質特異性に変化はなく、様々なN-メチル-L-アミノ酸の生産に利用できると考えられた。

報告書

(6件)
  • 2011 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2010 実績報告書   自己評価報告書 ( PDF )
  • 2009 実績報告書
  • 2008 実績報告書
  • 研究成果

    (5件)

すべて 2012 2010

すべて 学会発表 (5件)

  • [学会発表] N-メチル-L-アミノ酸脱水素酵素の耐熱化2012

    • 著者名/発表者名
      松井祐士(村松久司)
    • 学会等名
      日本生化学会中四国支部例会
    • 発表場所
      岡山大学(岡山県)
    • 年月日
      2012-05-18
    • 関連する報告書
      2011 研究成果報告書
  • [学会発表] エラープローンPCRによるN-メチル-L-アミノ酸脱水素酵素の耐熱化2012

    • 著者名/発表者名
      松井祐士(村松久司)
    • 学会等名
      日本農芸化学会中四国支部講演会
    • 発表場所
      鳥取大学(鳥取県)
    • 年月日
      2012-01-21
    • 関連する報告書
      2011 研究成果報告書
  • [学会発表] エラープローンPCRによるN-メチル-L-アミノ酸脱水素酵素の耐熱化2012

    • 著者名/発表者名
      松井祐士(村松久司)
    • 学会等名
      日本農芸化学会中四国支部第32回講演会
    • 発表場所
      鳥取大学(鳥取県)
    • 年月日
      2012-01-21
    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
  • [学会発表] ランダム変異導入によるN-メチル-L-アミノ酸脱水素酵素の改変2010

    • 著者名/発表者名
      松井祐士(村松久司)
    • 学会等名
      日本農芸化学会中四国支部講演会
    • 発表場所
      香川大学(香川県)
    • 年月日
      2010-09-25
    • 関連する報告書
      2011 研究成果報告書
  • [学会発表] ランダム変異導入によるN-メチル-L-アミノ酸脱水素酵素の改変2010

    • 著者名/発表者名
      松井祐士(村松久司)
    • 学会等名
      日本農芸化学会中四国支部大会
    • 発表場所
      香川大学(香川県)
    • 年月日
      2010-09-25
    • 関連する報告書
      2010 実績報告書 2010 自己評価報告書

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公開日: 2008-04-01   更新日: 2016-04-21  

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