精子幹細胞におけるRNAi法による

• 研究課題/領域番号: 20790302
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 実験病理学
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 高島 誠司 京都大学, 医学研究科, 助教 (40396891)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2009
• 研究課題ステータス: 完了 (2009年度)
• 配分額: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2009年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円); 2008年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: 疾患モデル動物 / 遺伝子改変動物 / 精子幹細胞 / RNA interference

研究概要

まず、精子幹細胞においてRNAi法による遺伝子ノックダウンが有効であるかを検討すべく、緑色蛍光(EGFP)マウス由来精子幹細胞へ、EGFPに対するRNAiを導入した。レンチウイルスベクターによるRNAi導入によりEGFPの発現を有意に抑制することができたが、完全にノックダウンすることはできず、個体を作製するには至らなかった。一方このRNAi導入法を用いてDNAメチル転移酵素1が精子幹細胞の生存に重要であることを示したが、これは同時に、この課題で確立したRNAi法による遺伝子ノックダウンが内在性の遺伝子に対しては有効であることを示唆している。

研究成果

• [雑誌論文] Genetic influences in mouse spermatogonial stem cell self-renewal. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kanatsu-Shinohara M, Ogonuki N, Miki H, Inoue K, Morimoto H, Takashima S, Ogura A, Shinohara T.
  • 雑誌名: Journal of Reproduction and Development 56(1) ページ: 145-153
  • NAID: 10026323942
  • 査読あり
• [雑誌論文] Transmission distortion by loss of p21 or p27 cyclin-dependent kinase inhibitors following competitive spermatogonial transplantation. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kanatsu-Shinohara M., et al.
  • 雑誌名: Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A. 107(14) ページ: 6210-6215
  • 査読あり
• [雑誌論文] Genetic influences in mouse spermatogonial stem cell self-renewal. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kanatsu-Shinohara M., et al.
  • 雑誌名: Journal of Reproduction and Development 56(1) ページ: 143-153
  • 査読あり
• [雑誌論文] Phenotypic Plasticity of Mouse Spermatogonial Stem Cells. (2009)
  • 著者名/発表者名: Morimoto H, Kanatsu-Shinohara M, Takashima S, Chuma S, Nakatsuji N, Takehashi M, Shinohara T.
  • 雑誌名: PLoS One 4(11)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Genetic reconstruction of mouse spermatogonial stem cell self-renewal in vitro by Rascyclin D2 activation. (2009)
  • 著者名/発表者名: Lee J, Kanatsu-Shinohara M, Morimoto H, Kazuki Y, Takashima S, Oshimura M, Toyokuni S, Shinohara T
  • 雑誌名: Cell Stem Cell 5(1) ページ: 76-86
  • 査読あり
• [雑誌論文] Abnormal DNA methyltransferase expression in mouse germline stem cells results in spermatogenic defects. (2009)
  • 著者名/発表者名: Takashima S, Takehashi M, Lee J, Chuma S, Okano M, Hata K, Suetake I, Nakatsuji N, Miyoshi H, Tajima S, Tanaka Y, Toyokuni S, Sasaki H, Kanatsu-Shinohara M, Shinohara T
  • 雑誌名: Biology of Reproduction. 81(1) ページ: 155-164
  • 査読あり
• [雑誌論文] Alpha 1 antitrypsin activity is decreased in human amnion in premature rupture of the fetal membranes. (2009)
  • 著者名/発表者名: Izumi-Yoneda N, Toda A, Okabe M, Koike C, Takashima S, Yoshida T, Konishi I, Saito S, Nikaido T
  • 雑誌名: Molecular Human Reproduction 15(1) ページ: 49-57
  • 査読あり
• [雑誌論文] Phenotypic Plasticity of Mouse Spermatogonial Stem Cells. (2009)
  • 著者名/発表者名: Morimoto H., et al.
  • 雑誌名: PLoS ONE 4(11)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Genetic reconstruction of mouse spermatogonial stem cell self-renewal in vitro by Ras-cyclin D2 activation. (2009)
  • 著者名/発表者名: Lee J., et al.
  • 雑誌名: Cell Stem Cell 5(1) ページ: 76-86
  • 査読あり
• [雑誌論文] Abnormal DNA Methyltransferase Expression in Mouse Germline Stem Cells Results in Spermatogenic Defects (2009)
  • 著者名/発表者名: Takashima S, Takehashi M, Lee J, Chuma S, Okano M, Hata K, Suetake. I, et.al.
  • 雑誌名: Biology of Reproduction (印刷中)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Homing of mouse spermatogonial stem cells to germline niche depends on beta1- integrin. (2008)
  • 著者名/発表者名: Kanatsu-Shinohara M, Takehashi M, Takashima S, Lee J, Morimoto H, Chuma S, Raducanu A, Nakatsuji N, Fassler R, Shinohara T
  • 雑誌名: Cell Stem Cell 3(5) ページ: 533-542
  • 査読あり
• [雑誌論文] Production of transgenic rats via lentiviral transduction and xenogeneic transplantation of spermatogonial stem cells. (2008)
  • 著者名/発表者名: Kanatsu-Shinohara M, Kato M, Takehashi M, Morimoto H, Takashima S, Chuma S, Nakatsuji N, Hirabayashi M, Shinohara T
  • 雑誌名: Biology of Reproduction 79(6) ページ: 1121-1128
  • 査読あり
• [雑誌論文] Characterization of laminin isoforms in human amnion. (2008)
  • 著者名/発表者名: Takashima S, Yasuo M, Sanzen N, Sekiguchi K, Okabe M, Yoshida T, Toda A, Nikaido T
  • 雑誌名: Tissue and Cell 40(2) ページ: 75-81
  • 査読あり
• [雑誌論文] Homing of mouse spermatogonial stem cells to germline niche depends on betal-integrin (2008)
  • 著者名/発表者名: Kanatsu-Shinohara M, Takehashi M, Takashima S, Lee J, Morimoto H, et.al.
  • 雑誌名: Cell Stem Cell 3(5) ページ: 533-542
  • 査読あり
• [雑誌論文] Production of transgenic rats via lentiviral transduction and xenogeneic transplantation of spermatogonial stem cells (2008)
  • 著者名/発表者名: Kanatsu-Shinohara M, Kato M, Takehashi M, Morimoto H, Takashima S, et.al.
  • 雑誌名: Biolggy of Reproduction 79(6) ページ: 1121-1128
  • 査読あり
• [備考]
  • URL: http://www.med.kyoto-u.ac.jp/J/grad_school/introduction/1504/