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キュウリモザイクウイルスの2bによる宿主抵抗性のエピジェネティクス制御の研究

研究課題

研究課題/領域番号 20F20389
研究種目

特別研究員奨励費

配分区分補助金
応募区分外国
審査区分 小区分39040:植物保護科学関連
研究機関北海道大学

研究代表者

増田 税  北海道大学, 農学研究院, 教授 (60281854)

研究分担者 KIM HANGIL  北海道大学, (連合)農学研究科(研究院), 外国人特別研究員
研究期間 (年度) 2020-11-13 – 2023-03-31
研究課題ステータス 完了 (2022年度)
配分額 *注記
2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
2022年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
2021年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
2020年度: 600千円 (直接経費: 600千円)
キーワードエピジェネティクス / cucumber mosaic virus / 2b / WRKY70 / キュウリモザイクウイルス / 花芽形成 / アラビドプシス
研究開始時の研究の概要

CMVの2bタンパク質を発現するシロイヌナズナ(Col-o)形質転換体(Col-2b)では、Col-0と比較してWRKY70の発現レベルが下がる。本研究では、WRKY70が関与するCMV抵抗性の2bによるエピジェネティックス制御を調べ、その後、CMV感染植物の子孫植物とCol-2bを比較して、WRKY70が制御する抵抗性経路に関与する遺伝子群の発現とDNAメチル化との関係を調べる。次に、ウイルス感染や宿主免疫応答におけるそれらWRKY70制御下の遺伝子群の機能を明らかにする。すなわち、2bの宿主遺伝子発現のエピジェネティック制御がWRKY70による抵抗性誘導に関わるメカニズムを解明する。

研究実績の概要

キュウリモザイクウイルス(CMV)感染Arabidopsisで誘導される抵抗反応について、WRKY70遺伝子に注目し、2年間研究してきた。CMVの2bタンパク質が、WRKY70遺伝子の発現変動に関わることをつきとめ、2b遺伝子を組み込んだ形質転換Arabidopsisを作出した。2b遺伝子の発現程度の異なる組換体を3系統選抜して、表現系を観察したところ、非形質転換体に比較して、花を早く咲かせるものと逆に遅く咲かせるものが得られた。これらの系統で、RNA-seq(transcriptome解析)によって発現変動が観察されたものにWRKY70があり、この遺伝子に着目した。WRKY70の発現パターンを系統間で比較解析したところ、2bの発現パターンとWRKY70の発現パターンにリンクが見いだされた。この結果からWRKY70はウイルス抵抗性に関与するのみならず、花の形成にも役割を担っているものと思われる。このWRKY70の発現変動がDNAのメチル化によって制御されているのか調査するために、WGBS法によりWRKY70遺伝子とその周辺のDNAを解析した。その結果、WRKY70遺伝子にはメチル化が集積は観察されず、この遺伝子の発現制御は別のメカニズムによるものと判断した。さらに2bの形質転換体に注目して、ゲノム全体のDNAのメチル化パターンを非形質転換体と比較してみたところ、花茎が抽たいする前には全ゲノムで特にCHHのメチル化が増加することを見いだした。また、花茎の抽たいが起きてしまうと速やかにゲノムDNAのメチル化も低下していくことが観察された。この現象については、Arabidopsisの花形成とゲノムDNAのhypermethylationのリンクについて、報告がある。これらの結果から、CMVの2bがArabidopsisのゲノムDNAのメチル化を促進させる能力があることが判明した。

現在までの達成度 (段落)

令和4年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和4年度が最終年度であるため、記入しない。

報告書

(3件)
  • 2022 実績報告書
  • 2021 実績報告書
  • 2020 実績報告書
  • 研究成果

    (3件)

すべて 2022

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (2件)

  • [雑誌論文] Importin/Exportin-mediated nucleocytoplasmic shuttling of cucumber mosaic virus 2b protein is required for 2b’s efficient suppression of RNA silencing2022

    • 著者名/発表者名
      Kim H, Shimura H, Sueda K, Masuta C
    • 雑誌名

      PLoS Pathogens

      巻: 18 号: 1 ページ: e1010267-e1010267

    • DOI

      10.1371/journal.ppat.1010267

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] Study of cucumber mosaic virus 2b-meidated epigenetic regulation on host genome2022

    • 著者名/発表者名
      Kim, Hangil, Togawa, Y. and Masuta, C.
    • 学会等名
      令和4年度日本植物病理学会大会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] Study of cucumber mosaic virus 2b-meidated epigenetic regulation on host genome2022

    • 著者名/発表者名
      Kim, Hangil, Togawa, Y. and Masuta, C.
    • 学会等名
      令和4年度日本植物病理学会大会(オンライン)
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書

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公開日: 2020-11-16   更新日: 2024-03-26  

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