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ナノスケールの構造変化とシグナル伝達をリンクするプローブ顕微鏡の開発

研究課題

研究課題/領域番号 20H02582
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
審査区分 小区分28040:ナノバイオサイエンス関連
研究機関名古屋大学 (2021-2022)
金沢大学 (2020)

研究代表者

高橋 康史  名古屋大学, 工学研究科, 教授 (90624841)

研究期間 (年度) 2020-04-01 – 2023-03-31
研究課題ステータス 完了 (2022年度)
配分額 *注記
17,810千円 (直接経費: 13,700千円、間接経費: 4,110千円)
2022年度: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円)
2021年度: 6,110千円 (直接経費: 4,700千円、間接経費: 1,410千円)
2020年度: 7,150千円 (直接経費: 5,500千円、間接経費: 1,650千円)
キーワード単一細胞解析 / バイオイメージング / ナノピペット / シグナル伝達 / ガラスナノピペット / 単一細胞計測 / 走査型プローブ顕微鏡 / FRET / シングルオルガネラ / ライブセルイメージング / FRETバイオセンサー / SICM / 局所刺激 / 超解像度
研究開始時の研究の概要

メンブレントラフィックや、細胞遊走などのダイナミックな動きは、細胞内シグナル伝達により調整されている。シグナル伝達の起源となる受容体の位置、感受性、刺激の強度や周期、表面形状変化との関係など、複雑な細胞機能のシームレスな理解には、局所刺激技術・表面形状イメージング技術・シグナル伝達の計測技術の3つを統合させる必要がある。そこで、走査型プローブ顕微鏡と、FRETバイオセンサーの融合技術を開発し、エクソソームの取り込み、免疫シナプスの形成、一次繊毛の伸縮など局所刺激に伴うシグナル伝達や構造変化の関係を明らかとする。

研究成果の概要

メンブレントラフィックや、細胞遊走などのダイナミックな動きは、細胞内シグナル伝達により調整されている。これまで、Forster resonance energy transfer (FRET)バイオセンサーを活用することで、細胞内で不均一に生じるシグナル伝達の可視化が行われてきた。しかし、シグナルにより生じる細胞のナノスケールの構造変化をとらえることが困難であった。そこで、走査型プローブ顕微鏡と、FRETバイオセンサーの同時イメージング技術を開発し、葉状仮足の構造変化とシグナル伝達の関係を評価した。

研究成果の学術的意義や社会的意義

光学顕微鏡の高機能化では達成できないナノスケールの構造とシグナル伝達の関係をプローブ顕微鏡と光学顕微鏡の融合により達成した。リガンドの局所投与や形状変化により生じる細胞内シグナル伝達は、これまで一貫して捉えることが困難であったが、一連の細胞の表面構造変化からシグナル伝達までを可視化できるようになった。さらに、本システムは、センシング・イメージングに加え、ナノピペットを用いた細胞表面のナノスケールのマニュピレーションを行うことが可能であり、化学物質の局所投与や回収や、局所的な化学刺激に伴うシグナル伝達の評価も実現できる。

報告書

(4件)
  • 2022 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2021 実績報告書
  • 2020 実績報告書
  • 研究成果

    (22件)

すべて 2023 2022 2021 その他

すべて 雑誌論文 (10件) (うち国際共著 3件、 査読あり 8件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (11件) (うち国際学会 1件、 招待講演 11件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] Topographical evaluation of human mesenchymal stem cells during osteogenic differentiation using scanning ion conductance microscopy2023

    • 著者名/発表者名
      Nozawa Kota、Zhang Xuyang、Nakamura Takuo、Nashimoto Yuji、Takahashi Yasufumi、Ino Kosuke、Shiku Hitoshi
    • 雑誌名

      Electrochimica Acta

      巻: 449 ページ: 142192-142192

    • DOI

      10.1016/j.electacta.2023.142192

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Surface morphology live-cell imaging reveals how macropinocytosis inhibitors affect membrane dynamics2023

    • 著者名/発表者名
      Ida Hiroki、Taira Noriko、Azuma Koichi、Kumatani Akichika、Akishiba Misao、Futaki Shiroh、Takahashi Yasufumi、Shiku Hitoshi
    • 雑誌名

      Electrochimica Acta

      巻: 441 ページ: 141783-141783

    • DOI

      10.1016/j.electacta.2022.141783

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] In Vitro/ In Vivo Electrochemical Detection of Pt(II) Species2022

    • 著者名/発表者名
      Vaneev Alexander N., et al.,
    • 雑誌名

      Analytical Chemistry

      巻: 94 号: 12 ページ: 4901-4905

    • DOI

      10.1021/acs.analchem.2c00136

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 国際共著
  • [雑誌論文] A noncanonical endocytic pathway is involved in the internalization of 3 μm polystyrene beads into HeLa cells2022

    • 著者名/発表者名
      Hirose Hisaaki、Maekawa Masashi、Ida Hiroki、Kuriyama Masashi、Takahashi Yasufumi、Futaki Shiroh
    • 雑誌名

      Biomaterials Science

      巻: 10 号: 24 ページ: 7093-7102

    • DOI

      10.1039/d2bm01353c

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Topography and Permeability Analyses of Vasculature‐on‐a‐Chip Using Scanning Probe Microscopies (Adv. Healthcare Mater. 21/2021)2021

    • 著者名/発表者名
      Nashimoto Yuji、Abe Minori、Fujii Ryota、Taira Noriko、Ida Hiroki、Takahashi Yasufumi、Ino Kosuke、Ramon‐Azcon Javier、Shiku Hitoshi
    • 雑誌名

      Advanced Healthcare Materials

      巻: 10 号: 21 ページ: 2170101-2170101

    • DOI

      10.1002/adhm.202170101

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [雑誌論文] Electrochemical Quantitative Evaluation of the Surface Charge of a Poly(1-vinylimidazole) Multilayer Film and Application to Nanopore pH Sensor2021

    • 著者名/発表者名
      Katsuhiko Sato, Fumiya Sato, Masayuki Kumano, Toshio Kamijo, Takaya Sato, Yuanshu Zhou, Yuri Korchev, Takeshi Fukuma, Tsutomu Fujimura, Yasufumi Takahashi
    • 雑誌名

      Electroanalysis

      巻: 10 号: 6 ページ: 121-125

    • DOI

      10.1002/elan.202100041

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Nanoscale Visualization of Morphological Alteration of Live-Cell Membranes by the Interaction with Oligoarginine Cell-Penetrating Peptides2021

    • 著者名/発表者名
      Ida Hiroki、Takahashi Yasufumi、Kumatani Akichika、Shiku Hitoshi、Murayama Tomo、Hirose Hisaaki、Futaki Shiroh、Matsue Tomokazu
    • 雑誌名

      Analytical Chemistry

      巻: 93 号: 13 ページ: 5383-5393

    • DOI

      10.1021/acs.analchem.0c04097

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書 2020 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Micropipette-based navigation in a microvascular model for imaging endothelial cell topography using scanning ion conductance microscopy2021

    • 著者名/発表者名
      Taira, Noriko, Nashimoto, Yuji, Ino, Kosuke, Ida, Hiroki, Imaizumi, Takuto, Kumatani, Akichika, Takahashi, Yasufumi, Shiku, Hitoshi
    • 雑誌名

      Analytical Chemistry

      巻: 93 号: 11 ページ: 4902-4908

    • DOI

      10.1021/acs.analchem.0c05174

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書 2020 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Scanning Electrochemical Microscopy for biosurface imaging2021

    • 著者名/発表者名
      Zhou Yuanshu、Takahashi Yasufumi、Fukuma Takeshi、Matsue Tomokazu
    • 雑誌名

      Current Opinion in Electrochemistry

      巻: 2 ページ: 100739-100739

    • DOI

      10.1016/j.coelec.2021.100739

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Mapping mechanical properties of living cells at nanoscale using intrinsic nanopipette?sample force interactions2021

    • 著者名/発表者名
      Kolmogorov Vasilii S., et al.,
    • 雑誌名

      Nanoscale

      巻: 13 号: 13 ページ: 6558-6568

    • DOI

      10.1039/d0nr08349f

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [学会発表] ガラスナノピペットを用いたバイオイメージング2023

    • 著者名/発表者名
      高橋康史
    • 学会等名
      生体内情報計測・バイオイメージングのための 先端メディカルデバイス開発の最前線
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Super-resolution chemical imaging using scanning probe microscopy2022

    • 著者名/発表者名
      Yasufumi Takahashi
    • 学会等名
      Bioinspired Engineering and Biomechanics Center (BEBC) of Xi'an Jiaotong University seminar
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] ナノスケールの細胞機能評価を実現する走査型プローブ顕微鏡2022

    • 著者名/発表者名
      高橋康史
    • 学会等名
      第37回マルチモーダルバイオイメージセンサ研究会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 走査型イオンコンダクタンス顕微鏡を用いた 単一オルガネラ回収技術の開発2022

    • 著者名/発表者名
      高橋康史
    • 学会等名
      第45回日本分子生物学会年会 2
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] ナノ電極・ナノピペットを用いた電気化学イメージング技術の新展開2022

    • 著者名/発表者名
      高橋康史
    • 学会等名
      2022電気化学秋季大会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 単一オルガネラ分析に資する走査型プローブ顕微鏡の開発2022

    • 著者名/発表者名
      高橋康史
    • 学会等名
      第31回日本バイオイメージング学会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] ガラスナノピペットを利用した 新奇プローブ顕微鏡の開発と応用2022

    • 著者名/発表者名
      高橋康史
    • 学会等名
      FRIS/TI-FRIS Material Science Seminar
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 走査型プローブ顕微鏡による 超解像度ライブセルイメージング2022

    • 著者名/発表者名
      高橋康史
    • 学会等名
      九州大学理学研究院化学部門 分析化学特別講演会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] ナノピペットを用いた細胞膜表面の超解像度イメージング2022

    • 著者名/発表者名
      高橋康史
    • 学会等名
      コロイド先端技術講座2021
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] ガラスナノピペットを用いた単一オルガネラの単離と分析2021

    • 著者名/発表者名
      高橋康史
    • 学会等名
      第44回日本分子生物学会年会
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] ガラスナノピペットを用いた細胞のナノ構造・機能解明に資するプローブ顕微鏡の開発2021

    • 著者名/発表者名
      高橋康史
    • 学会等名
      第167委員会第98回研究会
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 招待講演
  • [備考] ホームページ

    • URL

      http://takahashi.w3.kanazawa-u.ac.jp/index.html

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書

URL: 

公開日: 2020-04-28   更新日: 2024-01-30  

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