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発育期・成人期の食習慣によるGene bodyエピゲノムの撹乱と代謝疾患発症

研究課題

研究課題/領域番号 20H04103
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
審査区分 小区分59040:栄養学および健康科学関連
研究機関山梨大学

研究代表者

望月 和樹  山梨大学, 大学院総合研究部, 教授 (80423838)

研究分担者 今井 千裕  山梨大学, 大学院総合研究部, 准教授 (50778842)
佐藤 憲子  日本女子大学, 家政学部, 教授 (70280956)
針谷 夏代  山梨学院大学, 健康栄養学部, 准教授 (80732784)
合田 敏尚  静岡県立大学, 食品栄養科学部, 教授 (70195923)
本間 一江  静岡県立大学, 食品栄養科学部, 客員共同研究員 (80724765)
研究期間 (年度) 2020-04-01 – 2023-03-31
研究課題ステータス 完了 (2022年度)
配分額 *注記
17,680千円 (直接経費: 13,600千円、間接経費: 4,080千円)
2022年度: 5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円)
2021年度: 5,980千円 (直接経費: 4,600千円、間接経費: 1,380千円)
2020年度: 6,630千円 (直接経費: 5,100千円、間接経費: 1,530千円)
キーワードGene bodyエピゲノム / 発達期低栄養 / 出生後の過栄養 / 中鎖脂肪 / 難消化性炭水化物 / ヒストン修飾 / フラクトオリゴ糖 / ヒストンアセチル化 / 胎生期低栄養 / 生後の過栄養 / Gene body / BRD4 / 胎生期 / 生後高脂肪食 / ライフステージ / DNAメチル化 / バイオマーカー / エピゲノム / 炎症性サイトカイン / 食品因子
研究開始時の研究の概要

本研究では、脂肪組織や腸組織のBRD4活性低下が血中の糖、脂質、細菌由来LPSの増加をもたらし、その結果として末梢血白血球や肝臓において逆にBRD4活性が上昇し、脂肪肝、脂質異常症、2型糖尿病などの代謝疾患の発症を促進する、という仮説を検証する。併せて、このようなGene bodyエピゲノム攪乱を改善できる食品因子と改善をモニターできるバイオマーカーを見出す。

研究成果の概要

胎生期栄養撹乱(タンパク質制限、コリン制限、糖質制限、胚発生初期栄養不良培地培養)や早期離乳、および生後の高脂肪食等の摂取は、代謝、腸バリア、炎症等の遺伝子発現が撹乱すること、その撹乱にはGene bodyエピゲノムが関与していること、Gene bodyエピゲノムを改変しうる食品因子(大麦、フラクトオリゴ糖、中鎖脂肪)は、それらの遺伝子発現を正常化させることによって代謝疾患の発症を抑制する可能性が高いことが明らかとなった。Gene bodyエピゲノムの撹乱を反映しうる炎症関連遺伝子のmRNA/タンパク質は、生活習慣病発症リスクを判定するバイオマーカーとして使用できる可能性が考えられた。

研究成果の学術的意義や社会的意義

学術的意義は、発育期・成人期の食習慣の撹乱による代謝性疾患の発症にはGene bodyエピゲノムが関与することを明らかにしたことである。
社会的意義は、本研究の成果により、発育期・成人期の食習慣の撹乱のリスクを国民に啓蒙できること、gene bodyの撹乱を抑制しうる食品や医薬品の開発を促進できるところである。さらに、gene bodyの撹乱を反映する血中バイオマーカーの研究をさらに進めることで、代謝性疾患の発症進展リスクを判断できるようになる可能性があることである。

報告書

(4件)
  • 2022 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2021 実績報告書
  • 2020 実績報告書
  • 研究成果

    (43件)

すべて 2023 2022 2021 2020

すべて 雑誌論文 (22件) (うち国際共著 1件、 査読あり 17件、 オープンアクセス 17件) 学会発表 (21件) (うち国際学会 3件、 招待講演 1件)

  • [雑誌論文] Dietary protein restriction during pregnancy and/or early weaning reduces the number of goblet cells in the small and large intestines of female mice pups2023

    • 著者名/発表者名
      Adachi H, Ishiyama S, Mochizuki K
    • 雑誌名

      Biochemistry and Biophysics Reports

      巻: 34 ページ: 101475-101475

    • DOI

      10.1016/j.bbrep.2023.101475

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Medium-Chain Triglycerides Reduce Glomerulosclerosis and Induce Redox Genes Level of NSY Mice with Diabetic Nephropathy2023

    • 著者名/発表者名
      Hagiwara M, Ishiyama S, Mochizuki K
    • 雑誌名

      Pharmanutrition

      巻: 23 ページ: 100325-100325

    • DOI

      10.1016/j.phanu.2022.100325

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Decreased postprandial glucose and insulin secretion after co-ingestion of barley mixed rice with yam paste in healthy Japanese participants: a randomized crossover trial2023

    • 著者名/発表者名
      Matsuoka T, Yamaji A, Kurosawa C, Shinohara M, Takayama I, Nakagomi H, Izumi K, Ichikawa Y, Hariya N, Mochizuki K
    • 雑誌名

      Decreased postprandial glucose and insulin secretion after co-ingestion of barley mixed rice with yam paste in healthy Japanese participants: a randomized crossover trial

      巻: -

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Maternal protein intake in early pregnancy and child development at age 3 years2023

    • 著者名/発表者名
      Miyake Kunio、Mochizuki Kazuki、Kushima Megumi、Shinohara Ryoji、Horiuchi Sayaka、Otawa Sanae、Akiyama Yuka、Ooka Tadao、Kojima Reiji、Yokomichi Hiroshi、Yamagata Zentaro、Japan Environment and Children’s Study Group
    • 雑誌名

      Pediatric Research

      巻: 2023 号: 1 ページ: 392-399

    • DOI

      10.1038/s41390-022-02435-8

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Supra-Multifactorial Survey YHAB revealed Highly Prevalent Sleep Apnoea Syndrome in Unaware Older Adults and Potential Combinatorial Factors for Its Initial Screening.2022

    • 著者名/発表者名
      Tanaka Y, Ando T, Mochizuki K, Igarashi S, Tsuchiya K, Saito K, Ito Y, Yamagata Z, Iwasaki M, YHAB Health Group.
    • 雑誌名

      Supra-Multifactorial Survey YHAB revealed Highly Prevalent Sleep Apnoea Syndrome in Unaware Older Adults and Potential Combinatorial Factors for Its Initial Screening.

      巻: -

    • DOI

      10.3389/fragi.2022.965199

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] 大麦摂取は2型糖尿病患者の血清尿酸高値を低下させる2022

    • 著者名/発表者名
      遅野井健,道口佐多子,久賀なつみ,横田由夏,飛田春菜,大渕健介,斎藤三代子,丸山聡子,望月和樹,加藤誠
    • 雑誌名

      大麦摂取は2型糖尿病患者の血清尿酸高値を低下させる

      巻: 59(8) ページ: 435-443

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] β-Carotene enhances the expression of inflammation-related genes and histone H3 K9 acetylation, K4 dimethylation, and K36 trimethylation around these genes in juvenile macrophage-like THP-1 cells2022

    • 著者名/発表者名
      Kondo S, Suzuki R, Nakashima Y, Mochizuki K
    • 雑誌名

      Biochemistry and Biophysics Reports.

      巻: 31 ページ: 2022-2022

    • DOI

      10.1016/j.bbrep.2022.101325

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] From lessons on the long-term effects of the preimplantation environment on later health to a "modified ART-DOHaD" animal model.2022

    • 著者名/発表者名
      Bari MW, Ishiyama S, Matsumoto S, Mochizuki K and Kishigami S
    • 雑誌名

      Reprod Med Biol.

      巻: 21(1) 号: 1

    • DOI

      10.1002/rmb2.12469

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Protein restriction during the fetal period upregulates IL1B and IL13 while suppressing MUC2 expression in the jejunum of mice after weaning2022

    • 著者名/発表者名
      Adachi H, Ishiyama S, Mochizuki K
    • 雑誌名

      Nutrition

      巻: 98 ページ: 111605-111605

    • DOI

      10.1016/j.nut.2022.111605

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Comparative Analysis of Gene Expression Profiles in the Adipose Tissue of Obese Adult Mice With Rapid Infantile Growth After Undernourishment In Utero2022

    • 著者名/発表者名
      Suzuki Misako、Kohmura-Kobayashi Yukiko、Ueda Megumi、Furuta-Isomura Naomi、Matsumoto Masako、Oda Tomoaki、Kawai Kenta、Itoh Toshiya、Matsuya Madoka、Narumi Megumi、Tamura Naoaki、Uchida Toshiyuki、Mochizuki Kazuki、Itoh Hiroaki
    • 雑誌名

      Frontiers in Endocrinology

      巻: 13 ページ: 818064-818064

    • DOI

      10.3389/fendo.2022.818064

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Medium-chain fatty acids enhance expression and histone acetylation of genes related to lipid metabolism in insulin-resistant adipocytes2022

    • 著者名/発表者名
      Kawamura Musashi、Goda Naoki、Hariya Natsuyo、Kimura Mayu、Ishiyama Shiori、Kubota Takeo、Mochizuki Kazuki
    • 雑誌名

      Biochemistry and Biophysics Reports

      巻: 29 ページ: 101196-101196

    • DOI

      10.1016/j.bbrep.2021.101196

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] 床前胚の体外培養とその長期影響~挑戦と課題、そして応用~“Embryo culture and long-term consequences: challenges, new issues, and applications”.2021

    • 著者名/発表者名
      松本沙知, 石山詩織,望月和樹,岸上哲士
    • 雑誌名

      動物細胞培養における培地と培養系の工夫 ~技術と市場~

      巻: -

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [雑誌論文] 達期環境によるサイトカインストーム形成と動脈硬化関連疾患発症との関連“Relationship between cytokine storm triggered by environments during developing stages and arteriosclerosis-related diseases”2021

    • 著者名/発表者名
      石山詩織,岸上哲士, 望月和樹
    • 雑誌名

      BIO Clinica

      巻: -

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [雑誌論文] Effects of barley intake on glycemic control in Japanese patients with type 2 diabetes mellitus undergoing antidiabetic therapy: a prospective study2021

    • 著者名/発表者名
      Osonoi Takeshi、Matsuoka Tsubasa、Ofuchi Kensuke、Katoh Makoto、Kobayashi Toshiki、Mochizuki Kazuki
    • 雑誌名

      Diabetology International

      巻: 13 号: 2 ページ: 387-395

    • DOI

      10.1007/s13340-021-00552-z

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Development of the Diabetic Kidney Disease Mouse Model Culturing Embryos in α-Minimum Essential Medium In Vitro, and Feeding Barley Diet Attenuated the Pathology2021

    • 著者名/発表者名
      Ishiyama Shiori、Kimura Mayu、Nakagawa Takao、Fujimoto Yuka、Uchimura Kohei、Kishigami Satoshi、Mochizuki Kazuki
    • 雑誌名

      Frontiers in Endocrinology

      巻: 12

    • DOI

      10.3389/fendo.2021.746838

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Regulation of Carbohydrate-Responsive Metabolic Genes by Histone Acetylation and the Acetylated Histone Reader BRD4 in the Gene Body Region2021

    • 著者名/発表者名
      Mochizuki Kazuki、Ishiyama Shiori、Hariya Natsuyo、Goda Toshinao
    • 雑誌名

      Frontiers in Molecular Biosciences

      巻: 8

    • DOI

      10.3389/fmolb.2021.682696

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Feeding Rats Medium-Chain Triglycerides and Tomato Powder Increases Liver Lycopene Content and Reduces the Expression of Genes Related to Lipid Metabolism in the Liver2021

    • 著者名/発表者名
      Kimura Mayu、Tamura Sayaka、Ishiyama Shiori、Mochizuki Kazuki
    • 雑誌名

      ACS Food Science & Technology

      巻: 1 号: 6 ページ: 993-1001

    • DOI

      10.1021/acsfoodscitech.0c00155

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Consumption of barley ameliorates the diabetic steatohepatitis and reduces the high transforming growth factor β expression in mice grown in α-minimum essential medium in vitro as embryos2021

    • 著者名/発表者名
      Ishiyama Shiori、Kimura Mayu、Umihira Nodoka、Matsumoto Sachi、Takahashi Atsushi、Nakagawa Takao、Wakayama Teruhiko、Kishigami Satoshi、Mochizuki Kazuki
    • 雑誌名

      Biochemistry and Biophysics Reports

      巻: 27 ページ: 101029-101029

    • DOI

      10.1016/j.bbrep.2021.101029

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Mice derived from in vitro αMEM-cultured preimplantation embryos exhibit postprandial hyperglycemia and higher inflammatory gene expression in peripheral leukocytes2021

    • 著者名/発表者名
      Ishiyama Shiori、Kimura Mayu、Umihira Nodoka、Matsumoto Sachi、Takahashi Atsushi、Nakagawa Takao、Wakayama Teruhiko、Kishigami Satoshi、Mochizuki Kazuki
    • 雑誌名

      Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry

      巻: 85 号: 5 ページ: 1215-1226

    • DOI

      10.1093/bbb/zbab023

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書 2020 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] S100 Genes are Highly Expressed in Peripheral Leukocytes of Type 2 Diabetes Mellitus Patients Treated with Dietary Therapy2021

    • 著者名/発表者名
      Kondo Shinnosuke、Mochizuki Kazuki、Hariya Natsuyo、Saito Miyoko、Doguchi Satako、Osonoi Takeshi
    • 雑誌名

      Drugs in R&D

      巻: 21 号: 1 ページ: 91-101

    • DOI

      10.1007/s40268-020-00334-z

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [雑誌論文] Bromodomain-containing protein 4 regulates a cascade of lipid-accumulation-related genes at the transcriptional level in the 3T3-L1 white adipocyte-like cell line2020

    • 著者名/発表者名
      Mochizuki Kazuki、Yamada Masami、Inoue Takuya、Hariya Natsuyo、Kubota Takeo、Goda Toshinao
    • 雑誌名

      European Journal of Pharmacology

      巻: 883 ページ: 173351-173351

    • DOI

      10.1016/j.ejphar.2020.173351

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [雑誌論文] Glucose and TNF enhance expression of TNF and IL1B, and histone H3 acetylation and K4/K36 methylation, in juvenile macrophage cells2020

    • 著者名/発表者名
      Honma Kazue、Machida Chie、Mochizuki Kazuki、Goda Toshinao
    • 雑誌名

      Gene: X

      巻: 5 ページ: 100034-100034

    • DOI

      10.1016/j.gene.2020.100034

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] Protein restriction during the fetal period upregulates IL1B and IL13 while suppressing MUC2 expression in the jejunum of mice after weaning2022

    • 著者名/発表者名
      Adachi H、Kudo M、Ishiyama S、Mochizuki K,
    • 学会等名
      2nd IUNS-International Congress of Nutrition
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Excessive folic acid supplementation in pregnant mice induces glucose and lipid metabolic disorders in their offspring in infancy and/or adulthood2022

    • 著者名/発表者名
      Kintaka Y、Nakamura S、Wada N、Okuda A、Tanabe K、Mochizuki K、Oku T
    • 学会等名
      22nd IUNS-International Congress of Nutrition
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Relations between carbohydrate-responsive epigenetics and DOHaD2022

    • 著者名/発表者名
      3.Mochizuki K, Natsuyo N, Shiori I, Itoh H.
    • 学会等名
      22nd IUNS-International Congress of Nutrition
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] 中鎖脂肪は、2 型糖尿病 NSY マウスの腎症の 進展を抑制する2022

    • 著者名/発表者名
      4.萩原 麻衣、石山詩織、望月和樹
    • 学会等名
      第 5 回中性脂肪学会学術集会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 胎生期タンパク質コリン低栄養マウスへのトマトパウダー投与が脂肪肝等の 代謝異常に与える影響2022

    • 著者名/発表者名
      岩崎三奈、石山詩織、望月和樹
    • 学会等名
      第12回機能油脂懇話会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 中鎖脂肪とリコペン共投与が肝臓における糖・脂質代謝へ与える影響2022

    • 著者名/発表者名
      早川 俳人、石山詩織、望月和樹
    • 学会等名
      第12回機能油脂懇話会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 胚発生初期2細胞期胚へのαMEM培地の曝露および出生後の高脂肪食投与は産仔の脂肪肝および糖尿病性腎症を誘導する2022

    • 著者名/発表者名
      石山詩織、中川隆生、内村幸平、岸上哲士、望月和樹
    • 学会等名
      第95回日本生化学会大会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 胎生期タンパク質制限が、出生後の 仔の腸バリア機能に与える影響2022

    • 著者名/発表者名
      足立遥郁、工藤美芙由、石山詩織、望月和樹
    • 学会等名
      第9回 日本DOHaD学会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 胎生期糖質制限による生後の代謝異常と大麦及び フラクトオリゴ糖摂取摂取による改善機構の解明2022

    • 著者名/発表者名
      山本裕昌、望月和樹
    • 学会等名
      第9回 日本DOHaD学会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 着床前胚の αMEM 培地暴露は,産仔マウス肝の脂肪滴形成遺伝子 Cidea 発現および同遺伝子周辺のヒス トンアセチル化を促進する2022

    • 著者名/発表者名
      石山詩織、中川隆生、岸上哲士、望月和樹
    • 学会等名
      第65回日本糖尿病学会年次学術集会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 胎生期のタンパク質・重度コリン制限による脂肪肝発症と脂肪組織のインスリン感受性遺伝子発現との関連2022

    • 著者名/発表者名
      岩崎三奈、相澤友香、針谷夏代、平山訓子、宮本和子、望月和樹
    • 学会等名
      第65回日本糖尿病学会年次学術集会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] ヒストンアセチル化修飾による脂肪滴蓄積遺伝子Cidea、CidecおよびPlin4の発現増大機構---胚環境操作により2型糖尿病-脂肪肝炎を呈するMEMマウスにおける検討---2022

    • 著者名/発表者名
      石山詩織、中川隆生、岸上哲士、望月和樹
    • 学会等名
      第76回日本栄養・食糧学会大会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 胎生期のタンパク質制限は、離乳後のマウスの空腸において、IL1B および IL13 の発現を 増大させ、MUC2 の発現を減少させる2022

    • 著者名/発表者名
      足立遥郁、工藤美芙由、石山 詩織、望月 和樹
    • 学会等名
      第76回日本栄養・食糧学会大会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 健康な後期高齢者 32 名中 16 名で疑われた睡眠時無呼吸症候群と罹患予測の可能性2022

    • 著者名/発表者名
      田中佑治、安藤隆、望月和樹、五十嵐賢、YHAB研究グループ
    • 学会等名
      第64回日本老年医学会学術集会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 睡眠時無呼吸症候群の危険因子としてのロコモティブシンドローム-山梨健康長寿コホート Y-HALE study2022

    • 著者名/発表者名
      安藤隆、田中佑治、望月和樹、、YHAB研究グループ
    • 学会等名
      日本整形外科学会総会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] MEM培地暴露後に産まれたマウスの糸球体硬化症および尿細管におけるTGFβ高発現は大麦投与により抑制される2021

    • 著者名/発表者名
      石山詩織、木村真由、中川隆生、藤本由佳、岸上哲士、望月和樹
    • 学会等名
      糖尿病性腎症研究会
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] 自然糖尿病モデルNSYマウスにおける中鎖脂肪とキサンチンオキシダーゼ阻害剤の糖尿病性腎症抑制効果の検証2021

    • 著者名/発表者名
      萩原 麻衣、望月和樹
    • 学会等名
      糖尿病性腎症研究会
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] 高グルコースによる糖、脂質代謝の攪乱と中鎖脂肪酸による改善 - HepG2 肝培養細胞による検討-2021

    • 著者名/発表者名
      萩原 麻衣、望月和樹
    • 学会等名
      高尿酸血症・メタボリックシンドローム リサーチフォーラム 第 17 回 研究集会
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] 床前の栄養不良培地暴露を経て産まれたMEMマウスは糖尿病性腎症を発症する(Mice derived from in vitro-αMEM cultured preimplantation embryos developed diabetic nephropathy)2021

    • 著者名/発表者名
      石山詩織、木村真由、海平のどか、松本沙知、高橋篤史、岸上哲士、若山照彦、中川隆生、望月和樹
    • 学会等名
      第64回日本腎臓学会学術総会
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] 栄養不良培地αMEM培地を用いた胚培養により作製されたマウスは、炎症性サイトカインを高発現する糖尿病モデルである2021

    • 著者名/発表者名
      石山詩織、木村真由、海平のどか、松本沙知、高橋篤史、岸上哲士、若山照彦、中川隆生、望月和樹
    • 学会等名
      第75回日本栄養・食糧学会
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] 胚発生時栄養不良培地暴露による糖尿病性脂肪肝・腎症の発生機構と生後の大麦摂取による改善2021

    • 著者名/発表者名
      石山詩織、木村真由、海平のどか、松本沙知、高橋篤史、中川隆生、藤本由佳、若山照彦、岸上哲士、望月和樹
    • 学会等名
      第10回日本DOHaD学会学術集会
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書

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公開日: 2020-04-28   更新日: 2024-01-30  

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