| 研究課題/領域番号 |
20J10182
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| 研究種目 |
特別研究員奨励費
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 国内 |
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| 審査区分 |
小区分38010:植物栄養学および土壌学関連
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| 研究機関 | 岐阜大学 |
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研究代表者 |
山下 寛人 岐阜大学, 連合農学研究科, 特別研究員(DC2)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-24 – 2022-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2020年度)
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| 配分額 *注記 |
1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
2020年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
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| キーワード | 代謝 / 栄養応答 / 好アンモニア性 / チャ / テアニン |
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| 研究開始時の研究の概要 |
好NH4+性植物は，NH4+の同化代謝を発達させ，代謝バランスを最適化することで，毒性のあるNH4+を体内に留めないシステムを獲得している．我々が着目する茶樹は，一般的なN同化代謝反応から分化する形で特異的なアミノ酸アミドである「テアニン」を多量に生合成する．テアニンはGlnやAsnと同様にN/C比の高いアミノ酸アミドであり，過剰なN同化反応に対応した代謝物としての関与が示唆されるが，その生合成の意義や役割は未だ不明瞭な点が多い．そこで本研究では，N同化代謝において分化したテアニン生合成に着目し，分子情報科学・生理生化学的な視点から植物の栄養応答における代謝分化の役割を理解することを目指す．
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| 研究実績の概要 |
現在までに、テアニン生合成酵素遺伝子において3つのホモログ (CsTS1、CsTS2、CsTSI) の存在と定性的な酵素活性が報告されている．これまでに我々は、CsTSIのみがテアニン集積と同調した発現パターンを有すことを同定したが、各ホモログの貢献度は未だ明白でない．そこでまず、安定的な形質転換系が構築されていないチャにおいて、Rhizobium rhizogenes (R. rhizogenes) を用いた毛状根系の構築を試みた．チャ幼苗の地上部基部をR. rhizogenesの感染部位に供すin planta法を用いた形質転換実験において、毛状根の形成が確認された．現在、当手法を用いて、TSs過剰発現個体ならびに発現抑制個体の作出に着手しており、これら組換え個体の表現型試験により、チャにおけるTSsの生理的役割を検証する予定である．
水耕栽培したチャ36系統の若根中のテアニンとその前駆体物質の含量評価を行ったところ、顕著な系統間差異が観察された．また、テアニン含量と両前駆体物質含量の間に正の相関関係が示された．つまり，遺伝的にテアニンの生合成能は前駆体物質の代謝と協調している影響が大きいことが示唆された．根内テアニン生合成能の系統間差とTSsの関係を明らかにするために，まず，根内テアニン含量の代表的な上位・下位系統を対象にTSsの発現量を比較したところ，両者の発現量に差は見られなかった．そこで，両系統におけるTSsのアミノ酸配列を比較したところ，数多くのハプロタイプが観察された．つまり，根内テアニン含量の系統間差の一つの原因としては，TSsの発現量多型ではなく，アミノ酸配列多型によるタンパク機能の差異が影響している可能性が示唆された．ハプロタイプ毎に、タンパク質発現用のコンストラクトの作出も完了し、in vitro活性試験を随時進める予定である．
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| 現在までの達成度 (段落) |
翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。
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